臨床現場で利用可能なコレステロール引き抜き能評価法の確立

• Project/Area Number: 20J13446
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Review Section: Basic Section 52010:General internal medicine-related
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 堀内 優奈 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 特別研究員(DC2)
• Project Period (FY): 2020-04-24 – 2021-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2020)
• Budget Amount: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2020: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
• Keywords: 高比重リポタンパク / コレステロール引き抜き能 / 固相化リポソーム結合ゲルビーズ / 粥状動脈硬化症 / 心血管疾患

Outline of Research at the Start

抗動脈硬化機能を有する高比重リポタンパク（HDL）の量は必ずしも動脈硬化を起因とする心血管疾患（CVD）のリスクを反映しないことから、従来のHDLの量に加え機能の測定が試みられている。コレステロール引き抜き能（CEC）はHDLの主要な機能であり、CVDリスクマーカーとしての有用性もすでに報告されているものの、その測定の煩雑さから実臨床での利用には至っていない。
我々は病院検査室で測定可能なCEC測定法である固相化リポソーム結合ゲルビーズ（ILG）法を開発した。本研究では、ILG法で測定したCECと実臨床における冠動脈の動脈硬化病変との関連を明らかにし、ILG法によるCEC評価法の確立を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

現在、心血管疾患（CVD）発症リスクマーカーとして広く用いられている高比重リポタンパクコレステロール濃度（HDL-C）は、必ずしもCVD発症リスクを反映しないことも同時に報告されている。そのため、HDL-Cに加え、HDLの持つ抗粥状動脈硬化機能そのものの測定が試みられている。コレステロール引き抜き能（CEC）はHDLの主要な機能であり、CVDリスクマーカーとしての有用性もすでに報告されているものの、その測定の煩雑さから実臨床での利用には至っていない。我々は本研究実施以前に、病院検査室で測定可能なCEC測定法である固相化リポソーム結合ゲルビーズ（ILG）法を開発し、その臨床利用における妥当性を報告した。本研究では、ILG法によるCEC評価法の確立およびその臨床的意義の解明を目指した。
ILG法は従来法より簡便なCEC測定法ではあるものの、まだ臨床現場で測定を行うには明らかにすべき点が残っていた。本検討では、ILG法による臨床現場でのCEC測定をより実現可能なものへと改良することを目的とした。測定時間の短縮、reference物質の設定、血清以外の測定検体の検討、血清中の他の物質の影響などについて検討を行い、従来法よりより簡便に、かつより様々な特性の検体を測定できるILG改良法を確立した。
また、これまで確立したILG法で測定したCECが、実臨床における冠動脈の動脈硬化病変とどのように関連するかを明らかにすることは、ILG法の臨床利用を目指す上で最も重要である。冠動脈疾患を有する患者または冠動脈疾患が疑われる患者を対象とし、116名の患者より得られた血液検体のCECの測定を行った。現在、患者の基礎背景や生化学検査結果、心エコー検査結果や、冠動脈造影所見および光干渉断層法所見等の臨床データとCEC値について解析を進めている最中である。

Research Progress Status

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Marked Changes in Serum Amyloid A Distribution and High-Density Lipoprotein Structure during Acute Inflammation (2021)
  • Author(s): Shimano Shitsuko、Ohkawa Ryunosuke、Nambu Mayu、Sasaoka Mai、Yamazaki Azusa、Fujii Yuki、Horiuchi Yuna、Lai Shao-Jui、Kameda Takahiro、Ichimura Naoya、Fujita Koji、Tohda Shuji、Tozuka Minoru
  • Journal Title: BioMed Research International Volume: 2021 Issue: 1 Pages: 1-8
  • DOI: 10.1155/2021/9241259
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Comparison of a novel cholesterol efflux assay using immobilized liposome-bound gel beads with the conventional method (2020)
  • Author(s): Horiuchi Yuna、Lai Shao-Jui、Kameda Takahiro、Tozuka Minoru、Ohkawa Ryunosuke
  • Journal Title: Bioscience Reports Volume: 40 Issue: 8 Pages: 1-11
  • DOI: 10.1042/bsr20201495
  • URL: https://pure.teikyo.jp/en/publications/3e428e4d-83ce-4a05-9c69-ae4800ad38e9
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Cholesterol transport between red blood cells and lipoproteins contributes to cholesterol metabolism in blood (2020)
  • Author(s): Ohkawa, R., Low, H., Mukhamedova, N., Fu, Y., Lai, S.J., Sasaoka, M., Hara, A., Yamazaki, A., Kameda, T., Horiuchi, Y., Meikle, J.P., Pernes, G., Lancaster, G.I., Ditiatkovski, M., Nestel, P., Vaisman, B.L., Sviridov, D., Murphy, A.J., Remaley, A.T., Sviridov, D., and Tozuka, M
  • Journal Title: Journal of Lipid Research Volume: 61 Issue: 12 Pages: 1577-1588
  • DOI: 10.1194/jlr.ra120000635
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Apolipoprotein C-II and C-III preferably transfer to both high-density lipoprotein (HDL)₂and the larger HDL₃from very low-density lipoprotein (VLDL) (2020)
  • Author(s): Yamazaki Azusa、Ohkawa Ryunosuke、Yamagata Yuka、Horiuchi Yuna、Lai Shao-Jui、Kameda Takahiro、Ichimura Naoya、Tohda Shuji、Tozuka Minoru
  • Journal Title: Biological Chemistry Volume: 402 Issue: 4 Pages: 439
  • DOI: 10.1515/hsz-2020-0288
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 培養細胞および放射性物質を用いない新たな測定法によるコレステロール引き抜き能とHbA1cの関連の検討 (2020)
  • Author(s): 堀内 優奈, 山崎 あずさ, 島野 志都子, 亀田 貴寛, 市村 直也, 東田 修二, 戸塚 実, 大川 龍之介
  • Organizer: 第52回日本動脈硬化学会総会・学術集会
• [Presentation] Novel cholesterol efflux assay using immobilized liposome-bound gel beads: comparison to conventional method (2020)
  • Author(s): Yuna Horiuchi, Shao-Jui Lai, Shitsuko Shimano, Takahiro Kameda, Naoya Ichimura, Shuji Tohda, Minoru Tozuka, Ryunosuke Ohkawa.
  • Organizer: the 88th European Atherosclerosis Society Congress
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 炎症患者における血清アミロイドAによる高比重リポタンパクのコレステロール引き抜き能への影響 (2020)
  • Author(s): 陸田 優芽，堀内 優奈，島野 志都子，藤井 祐葵，山崎 あずさ，賴 劭睿，亀田 貴寛，市村 直也，藤田 浩二，東田 修二，戸塚 実，大川 龍之介
  • Organizer: 日本医療検査科学会第52回大会
• [Presentation] 無細胞系コレステロール引き抜き能測定法の臨床現場での測定に向けた検討 (2020)
  • Author(s): 堀内 優奈, 島野 志都子, 賴 劭睿，亀田 貴寛, 市村 直也, 東田 修二, 戸塚 実, 大川 龍之介.
  • Organizer: 第60回日本臨床化学会年次学術集会
• [Presentation] MPO酸化修飾およびN-ホモシステイン化修飾がHDLの血管内皮修復能に及ぼす影響について (2020)
  • Author(s): 亀田 貴寛, 島野 志都子, 堀内 優奈, 矢野 康次, 賴 劭睿, 市村 直也, 東田 修二, 栗原 由利子, 戸塚 実, 大川 龍之介.
  • Organizer: 第60回日本臨床化学会年次学術集会
• [Presentation] HDL亜分画におけるアポリポタンパクC-IIおよびアポリポタンパクC-IIIの分布とVLDLからの転送について (2020)
  • Author(s): 山崎 あずさ，堀内 優奈，賴 劭睿，亀田 貴寛，市村 直也，東田 修二，戸塚 実，大川 龍之介.
  • Organizer: 第60回日本臨床化学会年次学術集会
• [Presentation] 無細胞系コレステロール引き抜き能測定法の臨床現場での測定に向けた検討 (2020)
  • Author(s): 堀内 優奈, 島野 志都子, 賴 劭睿，亀田 貴寛, 市村 直也, 東田 修二, 戸塚 実, 大川 龍之介.
  • Organizer: 第60回日本臨床化学会年次学術集会 学生シンポジウム（日本臨床検査学教育学会臨床化学分科会共催）
  • Invited
• [Presentation] 無細胞系コレステロール引き抜き能測定法におけるreference serumに代わるタンパクの探索 (2020)
  • Author(s): 堀内 優奈, 賴 劭睿，島野 志都子, 亀田 貴寛, 市村 直也, 東田 修二, 戸塚 実, 大川 龍之介
  • Organizer: 第67回日本臨床検査医学会学術集会
• [Presentation] 自動分析装置による高比重リポタンパク亜分画コレステロールの測定 (2020)
  • Author(s): 藤井 祐葵, 島野 志都子, 渡部 芽以, 堀内 優奈, 亀田 貴寛, 大野 一彦, 市村 直也, 東田 修二, 大川 龍之介.
  • Organizer: 第67回日本臨床検査医学会学術集会
• [Presentation] 赤血球膜コレステロール含有量測定法の検討 (2020)
  • Author(s): 山崎 あずさ，堀内 優奈，賴 劭睿，亀田 貴寛，市村 直也，東田 修二，大川 龍之介.
  • Organizer: 第67回日本臨床検査医学会学術集会
• [Presentation] Novel cholesterol efflux assay using immobilized liposome-bound gel beads: confirmation and improvement for application in clinical laboratory (2020)
  • Author(s): Yuna Horiuchi, Shao-Jui Lai, Shitsuko Shimano, Takahiro Kameda, Naoya Ichimura, Shuji Tohda, Minoru Tozuka, Ryunosuke Ohkawa.
  • Organizer: the 2020 AACC Annual Scientific Meeting
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Evaluation of cholesterol uptake and efflux by red blood cells (2020)
  • Author(s): Ryunosuke Ohkawa, Hann Low, Nigora Mukhamedova, Ying Fu, Shao-Jui Lai, Mai Sasaoka, Yuna Horiuchi, Michael Ditiatkovski, Paul Nestel, Dmitri Sviridov, Minoru Tozuka.
  • Organizer: the 2020 AACC Annual Scientific Meeting
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Dramatic change of high-density lipoprotein structure and serum amyloid A distribution after orthopedic surgery (2020)
  • Author(s): Shituko Shimano, Ryunosuke Ohkawa , Mayu Nambu, Mai Sasaoka, Azusa Yamazaki，Yuki Fujii, Konomi Igarashi, Yuna Horiuchi, Shao-Jui Lai, Naoya Ichimura, Koji Fujita, Shuji Tohda, Minoru Tozuka.
  • Organizer: the 2020 AACC Annual Scientific Meeting
  • Int'l Joint Research