食品のウイルス汚染を評価するための高感度新規汚染指標マーカーの検討

Research Project

Project/Area Number	20K02339
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 08030:Family and consumer sciences, and culture and living-related
Research Institution	Osaka Institute of Public Health
Principal Investigator	山元誠司地方独立行政法人大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 主任研究員 (20649008)
Project Period (FY)	2020-04-01 – 2024-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000) Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000) Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000) Fiscal Year 2020: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Keywords	バクテロイデス / RTE食品 / ウイルス汚染 / ふん便汚染 / ノロウイルス / A型肝炎ウイルス
Outline of Research at the Start	そのまま食べることのできるRTE食品のウイルス汚染はdiffuse outbreakにつながる恐れがある。これまでも、冷凍イチゴ・ラズベリー類や刻み海苔などがノロウイルスやA型肝炎ウイルスに汚染されていたことによるdiffuse outbreakは大きくメディアに取り上げられた。これらのウイルスは極微量のふん便汚染を介して感染成立・発症に至るため、高感度のふん便汚染指標マーカーが必要である。本研究では、ヒトふん便中にウイルスと同量程度存在しうるバクテロイデスをふん便汚染の新たな指標マーカーとし、それをRTE食品のリスク評価に利用する。
Outline of Annual Research Achievements	そのまま食べることのできる冷凍ベリー類などのRTE食品がウイルスに汚染されていると食中毒事件に発展することがある。本研究では、大腸菌よりもより高感度でふん便汚染を検出し得るバクテロイデスに着目し、ウイルス性食中毒を引き起こし得る極微量のふん便汚染を検出する検査法を確立することを目的としている。本研究課題代表者は所属機関である大阪健康安全基盤研究所にてウイルス検査の主担当であったことから令和2年度～令和4年度は新型コロナウイルス感染症の検査対応を最優先にせざるを得ない状況に加えて、令和4年度は研究所の移転作業も重なり、本研究課題実施に時間を割くことが不可能であった。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 4: Progress in research has been delayed. Reason これまで新型コロナウイルス感染症の検査対応および研究所の移転作業に忙殺されたため、本研究課題実施に時間を割くことが全くできず、令和4年度も本研究課題を進めることが不可能であった。
Strategy for Future Research Activity	令和5年5月8日に新型コロナウイルス感染症が5類感染症に移行されたことに伴い、令和5年度は時間の捻出が見込まれる。令和2年度～令和4年度は研究進捗がなかったため、令和2年度の研究実施報告書に記載した推進方策、RTE食品の汚染実態の調査を速やかに進める。すなわち、様々な生活環境のふきとり水やRTE食品に含まれるバクテロイデス遺伝子の検出を試みるにあたり、そこにPCR反応を阻害する物質が存在すると、バクテロイデスがいても検出することができないため、PCR反応阻害物質の有無を評価するInternal controlとして使用可能な標的遺伝子（GFPなど）の検討を行う。また、核酸抽出試薬やバクテロイデス濃縮法の検討（遠心法、フィルタ―ろ過法、PEG沈法）の検討も行う。考慮すべき事項として、①素手で食品を触った際にバクテロイデスがどの程度付着するか、②ヒトの皮膚におけるバクテロイデスの量、③農業用水由来のバクテロイデス量、④土由来のバクテロイデス量、などが挙げられ、順次解析してデータを蓄積する。また、令和5年5月に台湾の量販店「コストコ」にて、アメリカから輸入された冷凍ベリーからA型肝炎ウイルスが検出され、輸入が停止される事件があった。RTE食品の汚染実態の調査も本研究の最大の目的であり、早急に準備を進める。