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ナノスーツ法による病理標本の非破壊的な光ー電子相関顕微鏡法の開発とその応用

Research Project

Project/Area Number 20K07390
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 49020:Human pathology-related
Research InstitutionHamamatsu University School of Medicine

Principal Investigator

河崎 秀陽  浜松医科大学, 光尖端医学教育研究センター, 准教授 (90397381)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Keywordsナノスーツ / 光-電子相関顕微鏡 (CLEM) 法 / パラフィン切片 / 卓上低真空SEM / FE-SEM / ナノーツ / ナノスーツ法 / 病理標本
Outline of Research at the Start

申請者は光学顕微鏡で同定したパラフィン切片上の病変部位を、生物適合性高分子溶液(ナノスーツ液)と走査型電子顕微鏡(SEM)を用いて非破壊的かつ簡便に高解像立体的組織像を観察することに成功した(Kawasaki H. et al. Laboratory Investigation, 2019年)。
今後は本法が広く世界で利用され、診断や研究に応用されると期待される。本申請では光学顕微鏡を中心として築き上げられた組織形態情報と、ナノスーツ/光-電子相関顕微鏡(CLEM)法で得られる立体的組織微細構造・タンパク発現分布・元素分布情報を融合させた新たな診断法の確立を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

光学顕微鏡を用いたパラフィン組織切片の形態診断には、100年以上にわたって蓄積された膨大な知識が含まれている。病理診断において、光学顕微鏡で同定した組織切片の病変部位を高倍率で観察する必要にしばしば遭遇する。申請者は生体適合性高分子溶液(ナノスーツ液)と走査型電子顕微鏡(SEM)を用いて、非破壊的かつ簡便に同一切片・同一部位の高解像度立体的組織像を観察することに成功した。またSEM観察後にHE染色を施し、元の標本に戻すことにも成功した。
この方法により世界中に現存する膨大な病理標本を失うことなく、SEM観察できる道が開かれた。今後は本法が広く世界で利用され、診断や研究に応用されると期待される。本申請では光学顕微鏡を中心として築き上げられた組織形態情報と、ナノスーツ/光-電子相関顕微鏡 (CLEM) 法で得られる立体的組織微細構造・タンパク発現分布・元素分布情報を融合させた新たな診断法の確立を目指す。本年度はこの方法により3本の論文を発表することができた。
病理診断時に沈着物を観察することがある。その判定をするとき、HE所見と臨床情報を考慮して、特殊染色を依頼することが多いが、想定した元素しか知ることができない。ナノスーツ法による元素分析により、複数の元素の分布を一回の測定で判断することができる。当該年度は消化管に沈着した鉄をナノスーツ法を用いた元素分析で解析し、dataをまとめて論文として投稿している。その他に現在病理検体を中心として多くの臨床例を解析している。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

理由
研究ではナノスーツCLEM法を利用することにより、光学顕微鏡では観察できない微細構造を観察し、タンパク発現・元素分布などの情報を融合させた新たな診断法を目指している。当該年度は消化管に沈着した鉄をナノスーツ法を用いた元素分析で解析し、dataをまとめて論文化している。当該年度はこの方法を利用して、3本の論文を発表した。また他の消化器の沈着物の解析が現在進んでおり、当初の計画以上に進展している。

Strategy for Future Research Activity

今後の研究の推進方法としては、人工知能を使用して、病理医が予期しない病変をナノスーツCLEM法を用いて観察することを目指しています。またナノスーツ-CLEM法の応用例を増すことで有用性を更に確認していく予定である。

Report

(4 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • Research Products

    (40 results)

All 2024 2023 2022 2021 2020 2019

All Journal Article (22 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 22 results,  Open Access: 19 results) Presentation (10 results) (of which Invited: 6 results) Book (3 results) Patent(Industrial Property Rights) (5 results)

  • [Journal Article] Human induced pluripotent stem cells are resistant to human cytomegalovirus infection primarily at the attachment level due to the reduced expression of cell-surface heparan sulfate2024

    • Author(s)
      Kawasaki Hideya、Hariyama Takahiko、Kosugi Isao、Meguro Shiori、Iwata Futoshi、Shimizu Kosuke、Magata Yasuhiro、Iwashita Toshihide
    • Journal Title

      Journal of Virology

      Volume: 98 Issue: 3

    • DOI

      10.1128/jvi.01278-23

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    • Author(s)
      Suzuki Daisuke、Meguro Shiori、Furusawa Shin、Hashimoto Nanako、Kawasaki Hideya、Kosugi Isao、Enomoto Yasunori、Fujihiro Mayu、Tsukui Hiroe、Iwashita Toshihide
    • Journal Title

      Clinical Case Reports

      Volume: 11 Issue: 9

    • DOI

      10.1002/ccr3.7877

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    • Author(s)
      Ohta Kazuyoshi、Ito Masahiko、Chida Takeshi、Nakashima Kenji、Sakai Satoshi、Kanegae Yumi、Kawasaki Hideya、Aoshima Takuya、Takabayashi Shuji、Takahashi Hirotaka、Kawata Kazuhito、Shoji Ikuo、Sawasaki Tatsuya、Suda Takafumi、Suzuki Tetsuro
    • Journal Title

      PLOS Pathogens

      Volume: 19 Issue: 8 Pages: e1011591-e1011591

    • DOI

      10.1371/journal.ppat.1011591

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    • Author(s)
      .Muraki R, Morita Y, Ida S, Kitajima R, Furuhashi S, Takeda M, Kikuchi H, Hiramatsu Y, Takanashi Y, Hamaya Y, Sugimoto K, Ito J, Kawata K, Kawasaki H, Sato T, Kahyo T, Setou M, Takeuchi H.
    • Journal Title

      Cancer Med

      Volume: 12 Issue: 12 Pages: 13007-13018

    • DOI

      10.1002/cam4.5973

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      Yamada Satoshi、Itoh Toshiya、Ikegami Taro、Imai Atsushi、Mochizuki Daiki、Nakanishi Hiroshi、Ishikawa Ryuji、Kita Junya、Nakamura Yuki、Takizawa Yoshinori、Okamura Jun、Noda Yoshihiro、Iwashita Toshihide、Hariyama Takahiko、Suzuki Mikio、Misawa Kiyoshi、Kawasaki Hideya
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      Scientific Reports

      Volume: 13 Issue: 1 Pages: 5514-5514

    • DOI

      10.1038/s41598-023-32486-8

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      Shinmura Kazuya、Kato Hisami、Kawasaki Hideya、Hariyama Takahiko、Yoshimura Kimio、Tsuchiya Kazuo、Watanabe Hirofumi、Ohta Isao、Asahina Eri、Sumiyoshi Fumiya、Hamada Keisuke、Kawanishi Yuichi、Kawase Akikazu、Funai Kazuhito、Sugimura Haruhiko
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      Laboratory Investigation

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      Itoh Toshiya、Yamada Satoshi、Ohta Isao、Meguro Shiori、Kosugi Isao、Iwashita Toshihide、Itoh Hiroaki、Kanayama Naohiro、Okudela Koji、Sugimura Haruhiko、Misawa Kiyoshi、Hariyama Takahiko、Kawasaki Hideya
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      Laboratory Investigation

      Volume: 103 Issue: 1 Pages: 100020-100020

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      10.1016/j.labinv.2022.100020

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      Suzuki Daisuke、Meguro Shiori、Inagaki Koji、Hashimoto Masahiro、Kawasaki Hideya、Kosugi Isao、Enomoto Yasunori、Sugiyama Miho、Fukushima Mayu、Iwashita Toshihide
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      Volume: 10 Issue: 11

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      Volume: 4 Issue: 2 Pages: 447-447

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      10.3390/biomedicines10020447

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      Shimizu Yuta、Takeda‐Kawaguchi Tomoko、Kuroda Izumi、Hotta Yasuaki、Kawasaki Hideya、Hariyama Takahiko、Shibata Toshiyuki、Akao Yukihiro、Kunisada Takahiro、Tatsumi Junichi、Tezuka Ken‐ichi
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      Volume: 57 Issue: 1 Pages: 162-172

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      Volume: 9 Issue: 8 Pages: 2165-2172

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      Diagnostics

      Volume: 11 Issue: 7 Pages: 1193-1193

    • DOI

      10.3390/diagnostics11071193

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      Volume: - Issue: 5 Pages: 519-530

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      Volume: 71 Issue: 7 Pages: 453-462

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      Volume: - Issue: 3 Pages: 113924-113924

    • DOI

      10.1007/s00408-021-00440-y

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      Takahiko Hariyama, Yasuharu Takaku, Chiyo Senoh, Satoshi Yamada, Toshiya Itoh, Chiaki Suzuki, Sayuri Takehara, Satoshi Hirakawa, Hideya Kawasaki
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      Journal of Photopolymer Science and Technology

      Volume: 33 Issue: 5 Pages: 517-522

    • DOI

      10.2494/photopolymer.33.517

    • NAID

      130007867678

    • ISSN
      0914-9244, 1349-6336
    • Year and Date
      2020-07-01
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      Volume: 8 Pages: 113924-113924

    • DOI

      10.1016/j.jpba.2021.113924

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    • Journal Title

      Pathology

      Volume: 52 Issue: 6 Pages: 676-685

    • DOI

      10.1016/j.pathol.2020.05.005

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    • Journal Title

      Pathology International

      Volume: 70 Issue: 7 Pages: 476-478

    • DOI

      10.1111/pin.12939

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      Misawa Kiyoshi、Misawa Yuki、Mima Masato、Yamada Satoshi、Imai Atsushi、Mochizuki Daiki、Nakagawa Takuya、Kurokawa Tomoya、Endo Shiori、Kawasaki Hideya、Brenner John Chadwick.、Mineta Hiroyuki
    • Journal Title

      Cellular Oncology

      Volume: 43 Issue: 4 Pages: 631-641

    • DOI

      10.1007/s13402-020-00509-5

    • NAID

      120007026256

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    • Journal Title

      Diagnostics

      Volume: 10 Issue: 1 Pages: 1-1

    • DOI

      10.3390/diagnostics10010001

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    • Industrial Property Rights Holder
      浜松医科大学, NTN株式会社
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2020-185342
    • Filing Date
      2020
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 検査キット(補足:捕捉抗体を微小ドットでメンブレンに塗布した)(イムノクロマト検査キット)2020

    • Inventor(s)
      河崎 秀陽, 針山 孝彦, 大庭 博明
    • Industrial Property Rights Holder
      浜松医科大学, NTN株式会社
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2020-185343
    • Filing Date
      2020
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 検査キット(補足:メンブレンの凹部底面に捕捉抗体を塗布した) (イムノクロマト検査キット)2020

    • Inventor(s)
      河崎 秀陽, 針山 孝彦
    • Industrial Property Rights Holder
      浜松医科大学, NTN株式会社
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2020-185344
    • Filing Date
      2020
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] ナノスーツイムノクロマト法による病原体や疾患関連タンパク質などの高感度・定量観察法(イムノクロマトグラフィーによる測定方法)2020

    • Inventor(s)
      河崎 秀陽, 針山 孝彦
    • Industrial Property Rights Holder
      浜松医科大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2020-079912
    • Filing Date
      2020
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 電子顕微鏡によるナノ粒子の直接的な同定・定量のための検出キットおよび2020

    • Inventor(s)
      河崎 秀陽, 針山 孝彦
    • Industrial Property Rights Holder
      浜松医科大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2020
    • Acquisition Date
      2021
    • Related Report
      2020 Research-status Report

URL: 

Published: 2020-04-28   Modified: 2024-12-25  

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