肝細胞における免疫反応と毛細胆管破壊との関連の解明、移植後肝生検への応用

• Project/Area Number: 20K07411
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 49020:Human pathology-related
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 宮川 文 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (90432385)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2024-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2021)
• Budget Amount: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000); Fiscal Year 2023: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000); Fiscal Year 2021: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2020: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
• Keywords: 肝免疫反応 / STK17A / 毛細胆管 / S1P2受容体

Outline of Research at the Start

移植後の肝臓の免疫反応は肝内の小葉間胆管上皮へのリンパ球浸潤、上皮の破壊・消失と定義されているが、類洞側から侵入した免疫細胞が肝細胞頂端側の胆管の破壊にどう結びつくのか不明である。我々はセリンスレオニンキナーゼSTK17Aが肝細胞の頂端側に局在し、肝移植後の慢性拒絶として小葉間胆管が消失する前に毛細胆管レベルでSTK17Aの消失があり、胆管の形態変化につながることを示した。本研究では、STK17Aがかかわると考えられる胆管形成のシグナル系と、胆汁酸ないし免疫細胞を介した肝細胞のS1P2受容体のシグナル伝達経路の相互関係に着目することで肝細胞における免疫反応と毛細胆管破壊との関係を明らかにする。

Outline of Annual Research Achievements

我々はこれまでにSTK17Aが肝細胞の毛細胆管に局在することを初めて報告し、進行性に小葉間胆管の減少・消失をきたす病態である肝移植後の慢性拒絶反応をきたした患者肝生検において、その発現量が著しく低下し、肝移植後早期から毛細胆管の破壊が進行していることを示した。本課題では肝細胞におけるその局在と共局在蛋白の確認とともに、機能解析を進めている。HepG2細胞の通常培養では毛細胆管が明瞭に構築されないために、コラーゲンビトリゲル膜を用いた３次元培養系を導入し、STK17Aの強制発現やノックダウンを行い、毛細胆管形成能、胆汁排泄機能とSTK17Aの関与について解析した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

３次元培養の導入により毛細胆管様の構築を形成させることができ、STK17Aの強制発現およびノックダウンによる形態変化の観察とともに、ウエスタンブロッティングにより蛋白レベルでの発現を解析しているが、発現量が少ないため他の手法を検討している。

Strategy for Future Research Activity

ウエスタンブロッティングやELISAを用いて毛細胆管機能におけるSTK17Aの役割を解析していく。免疫沈降によりSTK17Aの結合パートナーの同定を試みることにより、STK17Aの機能に関連する蛋白質の同定、検証を行う予定である。

Research Products

• [Journal Article] Spatially resolved immune microenvironmental profiling for follicular thyroid carcinoma with minimal capsular invasion (2021)
  • Author(s): Saburi Sumiyo、Tsujikawa Takahiro、Miyagawa-Hayashino Aya、Mitsuda Junichi、Yoshimura Kanako、Kimura Alisa、Morimoto Hiroki、Ohmura Gaku、Arai Akihito、Ogi Hiroshi、Konishi Eiichi、Itoh Kyoko、Sugino Kiminori、Hirano Shigeru
  • Journal Title: Modern Pathology Volume: e-pub Issue: 6 Pages: 1-7
  • DOI: 10.1038/s41379-021-00993-6
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Spatial Profiles of Intratumoral PD-1+ Helper T Cells Predict Prognosis in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma (2021)
  • Author(s): Yoshimura Kanako、Tsujikawa Takahiro、Mitsuda Junichi、Ogi Hiroshi、Saburi Sumiyo、Ohmura Gaku、Arai Akihito、Shibata Saya、Thibault Guillaume、Chang Young Hwan、Clayburgh Daniel R.、Yasukawa Satoru、Miyagawa-Hayashino Aya、Konishi Eiichi、Itoh Kyoko、Coussens Lisa M.、Hirano Shigeru
  • Journal Title: Frontiers in Immunology Volume: 12 Pages: 4554-4554
  • DOI: 10.3389/fimmu.2021.769534
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Case With Transthyretin Amyloid Cardiomyopathy Complicated With Rapidly Progressive Aortic Stenosis Possibly Caused by Amyloid Deposition in the Aortic Valve. Circ Cardiovasc Imaging. (2021)
  • Author(s): Fujimoto T, Yamano T, Miyagawa-Hayashino A, Naiki H, Ueda M, Tasaki M, Yamano M, Zen K, Numata S, Matoba S.
  • Journal Title: Circ Cardiovasc Imaging Volume: 14 Issue: 11
  • DOI: 10.1161/circimaging.121.013357
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 濾胞性リンパ腫からBリンパ芽球性リンパ腫への形質転換が示唆された2症例の検討 (2022)
  • Author(s): 加藤 大思, 藤野 貴大, 伊佐 怜子, 塚本 拓, 水谷 信介, 志村 勇司, 古林 勉, 黒田 純也, 長峯 理子, 宮川 文
  • Organizer: 臨床血液
• [Presentation] Monomorphic epitheliotropic intestinal T-cell lymphoma secondary to intestinal MALT lymphoma (2021)
  • Author(s): 藤野 貴大, 服部 雄, 木元 弥生, 長峯 理子, 宮川 文, 伊佐 怜子, 塚本 拓, 水谷 信介, 志村 勇司, 古林 勉, 堀池 重夫, 黒田 純也
  • Organizer: 日本血液学会学術集会