• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to previous page

The analysis of retrotransposon activity of HERV-K and the screening of inhibitory compounds

Research Project

Project/Area Number 20K07517
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 49060:Virology-related
Research InstitutionKumamoto University

Principal Investigator

門出 和精  熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 助教 (70516137)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2022: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2020: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
KeywordsHERV-K / SOX2 / iPS cells / retrotransposon
Outline of Research at the Start

ヒト内在性レトロウイルスは胚発生過程で重要な役割を担う一方で、近傍の宿主遺伝子の転写を制御することにより様々な疾患の発症や進行にも関与する可能性が注目されている。本研究では、HERV-Kレトロトランスポゾンスクリーニングシステム構築とHERV-K関連疾患の治療薬探索とHERV-Kゲノム転移の簡易的検出システムの構築を実施する。本研究成果から、HERV-Kのゲノム転移が癌や神経疾患に影響する可能性について明らかにできる。さらに、iPS細胞の安定性維持やHERV-K関連疾患の治療薬開発に繋がることが期待される。

Outline of Annual Research Achievements

ヒト内在性レトロウイルス(HERVs)は宿主との長い共存関係の中で本来の機能を消失し、化石化したと考えられてきた。申請者の準備研究では、Sox2で活性化したHERV-KはiPS細胞のゲノムを転移することを見出した。そこで、本研究では、HERV-Kレトロトランスポゾンスクリーニングシステム構築とHERV-K関連疾患の治療薬探索(計画1)とHERV-Kゲノム転移の簡易的検出システムの構築(計画2)を実施する。本研究成果から、HERV-Kのゲノム転移が癌や神経疾患に影響する可能性について明らかにできる。さらに、iPS細胞の安定性維持やHERV-K関連疾患の治療薬開発に繋がることが期待される。
計画1:初年度、HERV-Kレトロトランスポゾン活性を定量するためのレポーターとして発光遺伝子にイントロンを挿入することで、レトロトランスポゾン活性を間接的に定量する方法を構築することに成功した。また、コンストラクトに改良を重ねることで、HeLa細胞株でも感度良く検出することが可能となった。また、候補阻害剤として、HIV-1で承認されている治療薬がHERV-Kゲノム転移にも阻害効果を示すことがわかった。
計画2:新規HERV-Kインテグレーションサイトを次世代シークエンスで同定することができるようになったので、簡易的スクリーニングシステムを構築することを試みたが、細胞内に大量に組み込まれているHERV-Kの存在により、新規HERV-Kインテグレーションサイトの検出に関しては解決することができなかった。現在、Oxford大学と共同でSingle cell Long-read sequencingにより解決できるかを検討している。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

計画1:HERV-Kレトロトランスポゾン活性を検出するための細胞株、またレポーターコンストラクトをそれぞれ確立することに成功した。サンプル間の誤差が大きいために薬剤スクリーニングとして応用することができなかったが、現行のHIV-1薬剤がHERV-Kのゲノム転移の阻害剤として利用できることがわかった。また、レトロトランスポゾン活性がSOX2発現細胞で起きていることが論文として認められた(J.Virol 2022)。前年度に発見したレトロトランスポゾン活性に、Gagに存在する核内移行シグナルが重要であることについては再現性が取れなかった。しかし、HERV-Kの転写活性化にSOX2だけでなく、他のSOX因子も関与している新規知見が得られたので、現在その詳しい機構ついて解析を続けている。
計画2:iPS細胞でのHERV-Kレトロトランスポゾンの解析については、他の実験系でも証明することができ、前年度に論文に投稿することができた(J.Virol 2022)。また、量子生命科学研究所の先生と共同研究することとなり、多検体のiPS細胞を分与いただいたため、他のiPS細胞でのHERV-Kレトロトランスポゾン活性を検討している段階であるが、解析は難航している。

Strategy for Future Research Activity

当初計画していた内容は完結し、その後の研究については難航している。そこで、推進方針を少し変更する。計画1では、HERV-Kの転写に関与する因子の同定に注目する。さらに、転写活性化したHERV-Kが、粒子を形成し、放出されるかについて電子顕微鏡にて観察を行う。
計画2については、Oxford大学と連携することで、プラットフォーム構築に尽力する。

Report

(4 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • Research Products

    (14 results)

All 2023 2022 2020 Other

All Int'l Joint Research (5 results) Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (5 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 1 results) Remarks (2 results)

  • [Int'l Joint Research] University of Michigan(米国)

    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Int'l Joint Research] Oxford University(英国)

    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Int'l Joint Research] University of Michigan(米国)

    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Int'l Joint Research] University of Michigan(米国)

    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Int'l Joint Research] University of Michigan(米国)

    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Journal Article] Movements of Ancient Human Endogenous Retroviruses Detected in SOX2-Expressing Cells2022

    • Author(s)
      Kazuaki Monde, Yorifumi Satou, Mizuki Goto, Yoshikazu Uchiyama, Jumpei Ito, Taku Kaitsuka, Hiromi Terasawa, Nami Monde, Shinya Yamaga, Tomoya Matsusako, Fan-Yan Wei, Ituro Inoue, Kazuhito Tomizawa, Akira Ono, Takumi Era, Tomohiro Sawa, Yosuke Maeda
    • Journal Title

      Journal of Virology

      Volume: NA Issue: 9

    • DOI

      10.1128/jvi.00356-22

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Movements of ancient human endogenous retroviruses detected in SOX2-expressing cells2020

    • Author(s)
      Monde Kazuaki、Satou Yorifumi、Goto Mizuki、Uchiyama Yoshikazu、Ito Jumpei、Kaitsuka Taku、Terasawa Hiromi、Yamaga Shinya、Matsusako Tomoya、Wei Fan-Yan、Inoue Ituro、Tomizawa Kazuhito、Ono Akira、Era Takumi、Sawa Tomohiro、Maeda Yosuke
    • Journal Title

      bioRxiv

      Volume: -

    • DOI

      10.1101/2020.07.14.202135

    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Presentation] The mechanisms of viral retrotransposon in the absence of Env2023

    • Author(s)
      門出和精
    • Organizer
      令和4年度第2回Oxford大学・熊本大学共同シンポジウム
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] The mechanisms of viral retrotransposon in the absence of Env2023

    • Author(s)
      門出和精
    • Organizer
      Cold Spring Harbor laboratory meeting
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] HERV-K レトロトランスポジションに関与するGagタンパク質の解析2023

    • Author(s)
      門出和精
    • Organizer
      日本ウイルス学会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] ヒト内在性レトロウイルスのレトロトランスポゾンに関わる宿主因子の解析2022

    • Author(s)
      門出和精
    • Organizer
      第69回日本ウイルス学会学術集会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] Identification of host factors inhibiting the retrotransposition of human endogenous retroviruses2022

    • Author(s)
      Kazuaki Monde
    • Organizer
      The 69th Annual Meeting of the Japanese Society for Virology
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Remarks] iPS細胞における内在性レトロウイルスのゲノム転移を発見

    • URL

      https://www.kumamoto-u.ac.jp/daigakujouhou/kouhou/pressrelease/2022-file/release220419-2.pdf

    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Remarks] ゲノムの中で今なお活動する、古代ウイルス

    • URL

      https://c86ea3cb-263f-4684-8f1a-3b072ffa3c60.filesusr.com/ugd/b31ef2_ebec819ee2f0414bb50e47c6a80b44ba.pdf

    • Related Report
      2021 Research-status Report

URL: 

Published: 2020-04-28   Modified: 2024-12-25  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi