Identification for oncogenic target and establishment of novel therapy for refractory leukemia or neuroblastoma
Project/Area Number |
20K07693
|
Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 50020:Tumor diagnostics and therapeutics-related
|
Research Institution | Teikyo University (2022) The University of Tokyo (2020-2021) |
Principal Investigator |
樋渡 光輝 帝京大学, 医学部, 講師 (40597126)
|
Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
|
Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
|
Budget Amount *help |
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
|
Keywords | 神経芽腫 / ALK / チロシンキナーゼ / 阻害剤 / 機能解析 / TENM3-ALK融合遺伝子 / ALKチロシンキナーゼ / 造腫瘍性 / ALK阻害剤 / 難治性白血病 / 難治性神経芽腫 / 分子標的療法 / 治療標的 / 多層的オミックス解析 |
Outline of Research at the Start |
1. 小児腫瘍臨床検体を用いた、腫瘍発生に関与する分子標的の探索 2. 標的分子候補の機能解析 3. 新規分子標的療法の開発 上記の目標を小児白血病および固形腫瘍臨床検体を用い、1)エクソームおよびトランスクリプトーム解析2)非翻訳領域のゲノム解析、3)ノンコーディングRNA seq、4)エピゲノム解析、5)シングルセルシーケンス、6)メタボローム解析、7)創薬のスクリーニングといった多層的オミックス解析を行うことで、腫瘍発生および進展に対する分子病態を明らかにして、新規治療を実現することを目標にする。
|
Outline of Annual Research Achievements |
神経芽腫患者検体及び細胞株を用いて、マイクロアレイ、RNAシークエンスを行った。その結果、神経芽腫患者検体より新規TENM 3-ALK融合遺伝子を同定した。ALK関連融合遺伝子は悪性リンパ腫においてNPM -ALKが、非小細胞性肺がんにおいてEML 4-ALKが同定されており、その他にも、腎細胞がんなど他の癌種でもALK融合遺伝子は同定されており、腫瘍発生に重要な役割を持つと考えれている。これらの腫瘍のALK融合遺伝子は5’側に相手遺伝子、ALK側の切断点はexon 19-exon 20に固定されているのに対し、今回新規に見出されたTENM 3-ALK融合遺伝子のALKの切断点はexon 12であったので、この融合遺伝子が造腫瘍性に関わっているのかを検証する必要があった。TENM3-ALK融合遺伝子を組み込んだベクターを作成し、恒常的にこの融合タンパクを発現する細胞株を作成した。この細胞株を用いたタンパクの発現検討ではALK及びその下流のSTAT3, AKT, ERKの恒常的活性化を認め、細胞株の自律増殖能が示された。さらに免疫不全マウスに移植し移植後9日目には腫瘍が可視化でき、生体内でも腫瘍発生を確認した。このマウスに移植した腫瘍が300mm^3に発育したタイミングでALK阻害剤を投与したところ腫瘍は縮小し、ALK阻害剤の抗腫瘍効果が生体内で証明された。 今後の残された課題はTENM 3-ALK融合遺伝子の構造がこれまで報告されてきた癌種のものと違うことは、造腫瘍性に意味があるのか、つまりTENM3がALKに融合することによって造腫瘍性を起こすのかどうかの検討が必要である。また、TENM 3-ALK融合遺伝子を認めた細胞株にALK阻害剤は有効であったが、そのメカニズムは既報と同様なのかどうかの検討が必要である。
|
Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
融合しているTENM3の3’側の配列を削除したベクターを作成して、その発現タンパクを解析することによりTENM3-ALKのもつ自律増殖能に影響を与えているかどうかの検討がまだ完遂されていない。
|
Strategy for Future Research Activity |
①融合しているTENM3の3’側の配列つまりTENM3のexon 13以降を削除したベクターを作成して、その発現タンパクを解析することによりTENM3-ALKのもつ自律増殖能に影響を与えているかどうか ②融合しているALKの5’側の配列を削除した細胞株つまりALK exon1から11を削除したベクターを作成し、この発現タンパクを導入した細胞株を作成し、ALK恒常的活性化を示していることを確認した。現在、TENM 3-ALKが持つALKの恒常的活性化と比較して違いがあるのかを検討する。 ③他の ALK阻害剤になる候補がないか、450種類の低分子化合物ライブラリーを用いてTENM 3-ALK融合遺伝子を導入した細胞株で検討を行っている。
|
Report
(3 results)
Research Products
(21 results)
-
[Journal Article] Novel TENM3-ALK fusion is an alternate mechanism for ALK activation in neuroblastoma2022
Author(s)
Mitsuteru Hiwatari1, 2, 3, Masafumi Seki1, Ryosuke Matsuno4, Kenichi Yoshida5, Takeshi Nagasawa1, Aiko Sato-Otsubo1, Shohei Yamamoto6, Motohiro Kato1, Kentaro Watanabe1, Masahiro Sekiguchi1, Satoru Miyano7, Seishi Ogawa5, 8, 9, and Junko Takita10
-
Journal Title
Oncogene
Volume: -
Issue: 20
Pages: 2789-2797
DOI
Related Report
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Integrated multiomics analysis of hepatoblastoma unravels its heterogeneity and provides novel druggable targets.2020
Author(s)
Sekiguchi M, Seki M, Kawai T, Yoshida K, Yoshida M, Isobe T, Hoshino N, Shirai R, Tanaka M, Souzaki R, Watanabe K, Arakawa Y, Nannya Y, Suzuki H, Fujii Y, Kataoka K, Shiraishi Y, Chiba K, Tanaka H, Shimamura T, Sato Y, Sato-Otsubo A, Kimura S, Kubota Y, Hiwatari M, et al
-
Journal Title
NPJ Precis Oncol.
Volume: Jul 7;4:20.
Issue: 1
Pages: 20-20
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
-
-
[Journal Article] Comprehensive genetic analysis of pediatric germ cell tumors identifies potential drug targets.2020
Author(s)
Kubota Y, Seki M, Kawai T, Isobe T, Yoshida M, Sekiguchi M, Kimura S, Watanabe K, Sato-Otsubo A, Yoshida K, Suzuki H, Kataoka K, Fujii Y, Shiraishi Y, Chiba K, Tanaka H, Hiwatari M, Oka A, Hayashi Y, Miyano S, Ogawa S, Hata K, Tanaka Y, Takita J.
-
Journal Title
Commun Biol.
Volume: Sep 30;3(1)
Issue: 1
Pages: 544-544
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] The impact of a glycosylation-related gene on osteosarcoma cells and its potential as a novel therapeutic target.2020
Author(s)
Kentaro Watanabe, Shota Kato, Tomoya Isobe, Masahiro Sekiguchi, Yasuo Kubota, Eito Ogata, Keisuke Tasaka, Hiroo Ueno, Yasuhito Nannya, Hiroko Tanaka, Yuichi Shiraishi, Kenichi Chiba, Katsutsugu Umeda, Mitsuteru Hiwatari, Akira Oka, Satoru Miyano, Seishi Ogawa, Junko Takita.
Organizer
The 52nd Congress of the International Society of Pediatric Oncology (SIOP)
Related Report
Int'l Joint Research
-
-
-
-
-
-
-
-
-