| Project/Area Number |
20K07743
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 51030:Pathophysiologic neuroscience-related
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
Koike Masato 順天堂大学, 大学院医学研究科, 教授 (80347210)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
波田野 琢 順天堂大学, 大学院医学研究科, 准教授 (60338390)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | パーキンソン病 / α-シヌクレイン / 凝集体 / 伝播モデル / p62 / 伝播 / 線条体 / 黒質 / シヌクレイン / リン酸化シヌクレイン / 免疫電子顕微鏡 |
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| Outline of Research at the Start |
α-シヌクレインオリゴマーのマウス脳局所への注入による凝集体伝播のメカニズムを更に明らかにするためには、凝集体を特異的に標識し、凝集体や凝集体を含む神経細胞内のオルガネラやシナプスの構造を電顕レベルで観察する必要である。そこで、凝集体の蛍光による可視化が可能なp62-GFPノックインマウスを用いて凝集体伝播モデルを作成し、全脳組織における同一部位の光顕・電顕相関観察を行うことで、新たなバイオマーカーとしての超微形態像を明らかする。更に新規パーキンソン病モデルマウスでも同様の検討を行い、パーキンソン病における病理学的進展機構の更なる解明を目指す。
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| Outline of Final Research Achievements |
To investigate the time-course of phosphorylated alpha synuclein localization, wild-type mice were sacrificed at 1, 4, 8, and 16 weeks after injection of mouse alpha-synlcein fibril. Many dotted or fibril phosphorylated alpha synuclein-positive structures were observed in the ipsilateral striatum at 4 weeks after injection. At this stage, round-shaped alpha synuclein-positive aggregates were observed in the cortex and substantia nigra. These round-shaped aggregates were mainly localized in the neuronal perikarya, which was confirmed by pre-embedding immunoelectron microscopy. We also investigated the time-course of phosphorylated alpha synuclein localization in p62-GFP knock-in mice. We confirmed colocalization of GFP signals with phosphorylated alpha synuclein by immunohistochemistry. However, GFP fluorescence were too weak to observe directly under the confocal laser microscope.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
α-シヌクレインのオリゴマーを動物脳局所へ注入後、リン酸化α-シヌクレイン陽性の凝集体の陽性領域を経時的に評価するin vivoの伝播モデルは、パーキンソン病における病理学的進展機構を明らかにする上で有用である。本研究課題においては、in vivoの実験系の入口にあたるオリゴマー注入と出口の伝播後の凝集体検出の間を繋ぐ凝集体伝播の途中の過程に関する経時的変化について光学顕微鏡レベルのみならず、電子顕微鏡レベルで詳細に検討を行うことに成功した。以上の成果はパーキンソン病における新たなバイオマーカーを見出すことに繋がる所見である。以上が研究成果の学術的、社会的意義である。
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