| Project/Area Number |
20K08180
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
山下 信子 岡山大学, 医学部, 客員研究員 (40379798)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小川 寛人 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (80455237)
八代 将登 岡山大学, 大学病院, 助教 (80585943)
難波 ひかる 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (20273972)
本田 知之 岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (80402676)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2022: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
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| Keywords | インフルエンザ / RSウイルス / セシウム / インフルエンザウイルス |
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| Outline of Research at the Start |
近年、インフルエンザウイルス（IV）やRSウイルス（RSV）の流行像が変化している。この変化の原因を解明する一助として、本研究では、セシウム（Cs）がIVやRSV感染に影響するかどうかをin vitroで検討する。Csは安定同位体Csと放射性同位体Csに大別されるが、本研究では安定同位体Csについて検討を行う。即ち、培地にCsClを添加した場合の、ウイルス増殖や宿主細胞側因子の変動を定量的に解析する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度は、RSウイルス（Respiratory syncytial virus）の感染実験系を確立した。RSウイルスとHep-2 (HeLa derivative)細胞・A549細胞を用いて感染実験を行った。ウイルス増殖を測定する指標として、quantitative RT-PCR 、プラークアッセイ、RSウイルスのミニゲノムアッセイを用いることとした。quantitative RT-PCRは、RSウイルスのN遺伝子を用いた系、プラークアッセイは文献（J Virol Methods,2004, 120(1) 113-7）に記載された系を使用した。またRSウイルスのミニゲノムアッセイは、pCAGGSにRSウイルスN遺伝子、P遺伝子、M2-1遺伝子をそれぞれ組み込んだベクターと、Gaussia ルシフェラーゼをもつRSウイルスミニゲノム、またpCAGGS-T7ポリメラーゼ、pTK-CLuc ベクターをHEK293T細胞にトランスフェクションする系を新しく作成した。
これらの系を用いたPreliminary dataでは、安定同位体セシウム（Cesium；Cs）添加は、RSウイルスの増殖に影響を及ぼしていないようであるが、今後特に低濃度のＣsＣl添加時(0, 0.1, 0.5, 1ｍM)における検討を繰り返して行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
セシウムがインフルエンザウイルスの複製にあまり影響しないことが、細胞実験の段階で判明したため、動物実験を行う必要性がなくなったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、インフルエンザウイルスの他の亜型（H1N1pdm等）についての検討、インフルエンザウイルスやRSウイルスのミニゲノムアッセイを用いて、セシウムがウイルスの複製に及ぼす影響を検討する。また最終年度は、これまでの研究をまとめて学会・論文報告を行う予定である。
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