| Project/Area Number |
20K09133
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 55030:Cardiovascular surgery-related
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| Research Institution | Tokyo Medical University |
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Principal Investigator |
福田 尚司 東京医科大学, 医学部, 教授 (70362069)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
落谷 孝広 東京医科大学, 医学部, 教授 (60192530)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2021)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | エクソソーム / 血管新生 / 間葉系細胞 / 再生医療 / 重症下肢虚血 / マイクロRNA / 間葉系幹細胞 |
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| Outline of Research at the Start |
完全自家血管新生療法における治療効果を改善すべく、間葉系幹細胞培養において分泌される因子の中で、細胞増殖に影響を与えると考えられるマイクロRNAに関し種類の同定や定量だけでなく、その効果についても検討することを目的とする。
次ステップとして、前述の同定された、間葉系幹細胞増殖に促進的に働くマイクロRNAを用いた培養法を知財化し、私たちが実施中の「自己骨髄由来培養間葉系細胞移植による末梢動脈疾患に対する血管新生治療」に関し、企業との共同治験の実現を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
【実験条件の確立】①間葉系細胞培養上清回収の条件確立、②エクソソーム測定に適した間葉系細胞培養培地の決定、③培養上清からエクソソーム精製の至適条件確立、④精製されたエクソソームからRNA抽出条件の確立、⑤マトリジェルを用いたHUVEC培養条件の確立
【実験方法の確立】①精製した培養上清中の粒子数測定の妥当性確認、②同上上清中のエクソソーム数測定の妥当性確認、③血管新生関連マイクロRNAに関するRNA抽出および定量的PCRの妥当性確認、④マトリジェルを用いたHUVEC培養の妥当性の確認
【対象】若年者および老年者の間葉系細胞培養上清
【結果】上清中の粒子数、エクソソーム数の確認により、血管新生関連マイクロRNA（miR-9、miR-105、miR-126、miR-135、miR-210）の有無について明らかにした。
また、同マイクロRNAに関し、世代による差についての定量結果を得た。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
初年度は、養上清中に含まれるエクソソームの量が、想定していたより少なく、定量評価するためには大量の上清を要したため予定より遅れてしまったが、令和3年度は前年度の結果がうまく利用できたため、遅れを取り戻すことができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
同定されたエクソソームを用い、in-vitroで血管新生への影響を検証する。
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