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Development of in vitro skin model with the ability of skin turnover by stem cell niche reconstituted by decellularization technique

Research Project

Project/Area Number 20K12660
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 90120:Biomaterials-related
Research InstitutionTokyo Metropolitan Industrial Technology Research Institute

Principal Investigator

Hoshiba Takashi  地方独立行政法人東京都立産業技術研究センター, 研究開発本部機能化学材料技術部バイオ技術グループ, 副主任研究員 (00469769)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywords細胞外マトリックス / 脱細胞化 / 皮膚モデル / 細胞老化 / 表皮幹細胞 / 角化細胞 / 幹細胞ニッチェ / 幹細胞
Outline of Research at the Start

市販のヒト皮膚由来の角化細胞を培養することにより、細胞直下に細胞外マトリックス(ECM)を形成させた後、細胞のみを特異的に除去することにより、細胞が形成したECMを脱細胞化ECM(dECM)として調製する。調製したdECMを用いることで角化細胞に含まれる表皮幹細胞の幹細胞性を維持することで、ヒト角化細胞を培養することで得られた3D皮膚モデルがターンオーバーすることで長期間維持できるようにする。

Outline of Final Research Achievements

Decellularized extracellular matrix (dECM) has been developed by the culture of keratinocytes and decellularization technique. The dECM which is prepared by keratinocytes with younger passage number can suppress cellular senescence induced by replicative (passage culture) and oxidative stresses. Also, the dECM allow the formation of an in vitro epidermis layer. However, the viable cells were not maintained on the dECM after the long culture. LRIG1 (an epidermal stem cell marker) expression was decreased in the keratinocytes cultured on the dECM, indicating that the dECM could not maintain epidermal stem cells and decreased viable cells.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

化粧品の開発において動物実験はほぼ禁止されている。したがって、動物試験の代替法が開発されているが、培養皮膚においては長期間維持できないため、皮膚の修復など、長期間の現象について評価することが困難であった。細胞老化を抑制することにより、試験の長期化および安定した試験結果の取得が見込まれるが、長期化については細胞老化の抑制に加え、表皮幹細胞の維持も重要であった。一方で培養基板の改良による培養皮膚の長期維持はあまり行われておらず、本研究において長期間維持できる培養皮膚を作製するための培養基板の必要要件を見出すことができた。

Report

(4 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2022 2021

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (4 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 2 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] A decellularized extracellular matrix derived from keratinocytes can suppress cellular senescence induced by replicative and oxidative stresses2022

    • Author(s)
      Takashi Hoshiba
    • Journal Title

      Biomaterials Science

      Volume: 10 Issue: 23 Pages: 6828-6835

    • DOI

      10.1039/d2bm00897a

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Decellularized Extracellular Matrix for Stem Cell Culture2021

    • Author(s)
      Hoshiba Takashi
    • Journal Title

      Engineering Materials for Stem Cell Regeneration

      Volume: 1 Pages: 429-454

    • DOI

      10.1007/978-981-16-4420-7_17

    • ISBN
      9789811644191, 9789811644207
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Journal Article] Cultured cell-derived decellularized extracellular matrix (cultured cell-derived dECM): Future applications and problems ? a mini review2021

    • Author(s)
      Hoshiba Takashi
    • Journal Title

      Current Opinion in Biomedical Engineering

      Volume: 17 Pages: 100256-100256

    • DOI

      10.1016/j.cobme.2020.100256

    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 角化細胞の細胞老化を抑制する脱細胞化細胞外マトリックス基板の作製2022

    • Author(s)
      干場隆志
    • Organizer
      第44回日本バイオマテリアル学会大会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 細胞老化を抑制する生体内環境を模倣した角化細胞用培養基板の作製2022

    • Author(s)
      干場隆志
    • Organizer
      第47回日本香粧品学会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] Stem Cell Differentiation on the Extracellular Matrix Formed by Cultured Stem Cells.2021

    • Author(s)
      Takashi Hoshiba
    • Organizer
      Materials Research Meeting 2021 (MRM2021)
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 幹細胞培養脱細胞化マトリックスによる幹細胞分化制御2021

    • Author(s)
      干場隆志
    • Organizer
      第36回日本整形外科学会基礎学術集会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Invited
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 角化細胞培養基板、角化細胞培養基板の製造方法、角化細胞の培養方法、培養表皮組織及び培養表皮組織の製造方法2022

    • Inventor(s)
      干場隆志
    • Industrial Property Rights Holder
      干場隆志
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2022-057554
    • Filing Date
      2022
    • Related Report
      2021 Research-status Report

URL: 

Published: 2020-04-28   Modified: 2024-01-30  

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