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High pressure study on a living cell using total reflection spectroscopy

Research Project

Project/Area Number 20K15225
Research Category

Grant-in-Aid for Early-Career Scientists

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Basic Section 32010:Fundamental physical chemistry-related
Research InstitutionKobe Gakuin University

Principal Investigator

Kuroi Kunisato  神戸学院大学, 薬学部, 助教 (70757757)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2022: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2020: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
Keywords高圧 / 分光 / 細胞膜 / ダイアモンドアンビルセル / 生細胞膜 / 顕微測定 / 全反射分光法
Outline of Research at the Start

細胞膜である脂質膜は、高い流動性を持つことで生理機能を発揮する。一方、数百気圧を超える深海下には多数の生物が存在し、その細胞膜は高圧力に曝されている。脂質膜は圧力により流動性の低い相へと相転移を起こすが、深海生物の細胞膜は圧力下でどのように流動性を保ち機能しているのだろうか?本研究では、高圧下で全反射蛍光・ラマン顕微観察が可能な高圧光学セルの開発を行い、細胞膜中の1分子蛍光観察、およびラマン分光による細胞膜の直接観測を行う。本研究を通して、生細胞膜の圧力応答の、その場観測が可能な系を構築し、深海生物の細胞膜が有する生存戦略を明らかにしたい。

Outline of Final Research Achievements

In order to elucidate the survival mechanism of deep-sea organisms, in-situ measurements of the behavior of single cell under high-pressure will provide a useful clues. In this study, we developed a high-pressure optical cell applicable to total-reflection microscopic raman or fluorescence spectroscopies. As a preliminary experiments, using liposomes which is often used as a model for cell membrabe, we showed that pressure effects on vibrational spectrum of lipid bilayers can actually provide information on its phase transition by pressure. Furthermore, we succeeded in culturing cells on a high-pressure cell and in observing them under high-pressure.The morphology of cells seemed not to be altered by pressure. Although we couldn't complete the project during the funding period, we established the basis for further in-situ high-pressure measurements.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

深海生物の高圧下での生存戦略を化学の視点から明らかにすることで、極限環境にも適用可能な有用な酵素や微生物などの開発につながることが期待される。そのために、本研究は生細胞の圧力挙動を明らかにすることを目指し、圧力下での測定1細胞の測定が可能な特殊高圧セルの開発と高圧セルを用いた予備的実験を行った。本研究成果は、極限環境生物を理解する上で必要となる生細胞の圧力下その場測定の基礎になると考えられる、

Report

(4 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2023 2022 2021 2020

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 2 results) Presentation (8 results)

  • [Journal Article] FTIR study of the surface-ligand exchange reaction with glutathione on biocompatible rod-shaped CdSe/CdS semiconductor nanocrystals2022

    • Author(s)
      Kuroi Kunisato、Yamada Masaki、Kawamura Ibuki、Jung Minkyo、Pack Chan-Gi、Fujii Fumihiko
    • Journal Title

      Physical Chemistry Chemical Physics

      Volume: 24 Issue: 21 Pages: 13356-13364

    • DOI

      10.1039/d2cp00574c

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Observation of liquid?liquid phase separation of ataxin-3 and quantitative evaluation of its concentration in a single droplet using Raman microscopy2021

    • Author(s)
      Murakami Kazuki、Kajimoto Shinji、Shibata Daiki、Kuroi Kunisato、Fujii Fumihiko、Nakabayashi Takakazu
    • Journal Title

      Chemical Science

      Volume: 12 Issue: 21 Pages: 7411-7418

    • DOI

      10.1039/d0sc06095j

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Pro-Oxidant Activity of an ALS-Linked SOD1 Mutant in Zn-Deficient Form2020

    • Author(s)
      Chise Nagao, Kunisato Kuroi, Taiyu Wakabayashi, Takakazu Nakabayashi
    • Journal Title

      Molecules

      Volume: 25 Issue: 16 Pages: 3600-3600

    • DOI

      10.3390/molecules25163600

    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] サイズ別の球状・棒状ナノマテリアルの合成とタンパク質コロナ形成における ナノマテリアルの形状効果の検討2023

    • Author(s)
      新有留茜, 黒目恵里奈, 黒井邦巧, 藤井文彦
    • Organizer
      日本薬学会第 143年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] タンパク質コロナ形成におけるナノマテリアルの形状効果とその熱力学的考察2023

    • Author(s)
      金澤勇太, 三宮正大, 黒井邦巧, 藤井文彦
    • Organizer
      日本薬学会第 143年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 棒状半導体ナノ結晶を用いたナノマテリアルの形状依存的な細胞内取り込み評価2022

    • Author(s)
      所谷礼梨,瓦谷梨紗,黒井邦巧,藤井文彦
    • Organizer
      日本薬学会第 142年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 棒状半導体ナノ結晶表面におけるタンパク質コロナ形成の研究2022

    • Author(s)
      黒目恵里奈, 三宮正大, 黒井邦巧, 藤井文彦
    • Organizer
      日本薬学会第 142年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 赤外分光法による親水性半導体ナノ結晶表面の配位子の分析2022

    • Author(s)
      川村芽, 山田雅輝, 黒井邦巧, 藤井文彦
    • Organizer
      日本薬学会第 142年会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 棒状半導体ナノ結晶表面におけるタンパク質コロナ形成の研究2022

    • Author(s)
      黒目恵里奈、三宮正大、黒井邦巧、藤井文彦
    • Organizer
      日本薬学会第142年会
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      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 棒状半導体ナノ結晶を用いたナノマテリアルの形状依存的な細胞内取り込み評価2022

    • Author(s)
      所谷礼梨,瓦谷梨紗,黒井邦巧,藤井文彦
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      日本薬学会第142年会
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    • Author(s)
      川村芽、山田雅輝、黒井邦巧、藤井文彦
    • Organizer
      日本薬学会第142年会
    • Related Report
      2021 Research-status Report

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Published: 2020-04-28   Modified: 2024-01-30  

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