シェーグレン症候群唾液腺におけるTLR7シグナル活性および機能解析
Project/Area Number |
20K17445
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Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
Basic Section 54020:Connective tissue disease and allergy-related
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Research Institution | Nagasaki University |
Principal Investigator |
清水 俊匡 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (40770467)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000)
Fiscal Year 2021: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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Keywords | シェーグレン症候群 / TLR7 / Toll-like receptor 7 / 唾液腺 |
Outline of Research at the Start |
シェーグレン症候群(SS)の小唾液腺中の導管および浸潤している形質細胞様樹状細胞中のTLR7およびⅠ型インターフェロン関連の下流シグナル活性を認めることを証明した。SS唾液腺炎におけるTLR7活性の関わりをより多角的に検討するため、小唾液腺組織における他の浸潤細胞のTLR7活性の検討、また唾液腺培養上皮細胞におけるTLR7活性、SSモデルマウスを用いたTLR7活性抑制治療効果等検討する。
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Outline of Annual Research Achievements |
シェーグレン症候群(SS)の唾液腺上皮細胞に対してToll-like receptor(TLR)7のリガンド刺激で、I型インターフェロン活性シグナルに加え、MHC class Iの発現 増強、またシェーグレン症候群の自己抗原の一つであるRo52の発現増強をウェスタンブロットで確認した。また免疫細胞染色でも唾液腺上皮細胞中で同様にこれらの発現増強を認めた。また実際のSS症例の唾液腺組織の導管上皮においても発現増強を認めた。抗原提示細胞に発現するMHC class Iを介して抗原ペプチドはT細胞等の免疫細胞に抗原提示され、免疫応答が活性化される。上記結果よりTLR7シグナル活性が自己抗原の発現増強を引き起こし、加えて抗原提示による免疫活性を引き起こすことを考慮し、検討をすすめた。 TLR7刺激で抗原提示をすすめるか確認するため、抗原ペプチドがMHC class Iと結合する際に必要なMHC classI peptide-loading complex(PLC)の形成を認めるかどうかを確認した。その結果、唾液腺上皮細胞において、TLR7刺激後にPLCの発現増強を認めた。SSの唾液腺上皮細胞においてTLR7刺激後においてSSにみられる自己抗体の一つである抗SS-A/Ro抗体の対応抗原であるRo52の発現増強を認めた。このRo52は唾液腺上皮細胞中MHC class Iで免疫沈降して得られた蛋白ライセート中でもTLR7刺激後発現増強していた。 唾液腺上皮細胞中のTLR7をCRISPR-Cas9などでノックアウトした場合これらのシグナルが抑制されるか解析をすすめている。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
新型コロナウィルス感染による診療制限の影響もあり、唾液腺検体数が減少しており、下流シグナル発現の検討が十分に行えておらず、遅れているため。
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Strategy for Future Research Activity |
収集できた唾液腺組織を用い、CRISPR-Cas9によりTLR7の発現を抑えた上でMHC class I、Ro52の挙動の確認を進めていく。
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Report
(3 results)
Research Products
(1 results)