Project/Area Number |
20K18670
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Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
Basic Section 57060:Surgical dentistry-related
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Research Institution | Hiroshima University |
Principal Investigator |
大林 史誠 広島大学, 病院(歯), 歯科診療医 (20806096)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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Keywords | PTEN / PTENδ / iPSC / Cowden症候群 / iPS細胞 / 癌幹細胞 |
Outline of Research at the Start |
家族性腫瘍症候群であるCowden症候群患者の末梢血単核球を分離、ウィルスベクターにて初期化し、疾患特異的人工多能性幹細胞(iPS細胞)を作成する。Cowden遺伝子の原因遺伝子であるPTEN遺伝子の遺伝子修復をiPSCで行い、修復前後での細胞特性を解析する。 また、口腔癌細胞株の培養上清を用いて、iPS細胞を腫瘍幹細胞に分化誘導させ、PTEN遺伝子の発現とAKTシグナル伝達経路を中心に腫瘍の発生メカニズムとを探る
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Outline of Annual Research Achievements |
本研究はPTENを責任遺伝子とするCowden症候群患者より採取した末梢血単核球から初期化4因子を導入し、疾患特異的人工多能性幹細胞を作成した。健常人由来 のサンプルと比較すると、各種分化能や未分化性に関する性状は大きな差は認められなかった。またマウス皮下に細胞注入し形成したテラトーマの解析を行ったが、Vivoでも差を認めなかった。 しかし、患者末梢血単核球と疾患由来人工多能性幹細胞は健常人と比較し、PTEN遺伝子の発現は核酸レベル及びタンパクレベルで両方とも半減しており、さらにAKTの活性化の上昇傾向を確認できた。以上よりPI3K/AKT経路の活性上昇の可能性が示唆された。またPTENのアイソフォームであるPTENδに異常があることが見いだされ、本疾患の原因となりうる可能性があることが示唆された。無血清培養条件では浮遊培養での増殖は弱く、3次元培養条件を検討している
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
コロナ関連での試薬の到着の遅れなどで条件検討が思うように進んでいない
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Strategy for Future Research Activity |
PTENisoformの発現比較の検討を行っていく。培養条件の検討とオルガノイドの作成についても並行して進める予定である。
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