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Analysis of spatio-temporal distribution of drug resistance genes in river water with single-cell genome sequencing

Research Project

Project/Area Number 20K19980
Research Category

Grant-in-Aid for Early-Career Scientists

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Basic Section 63040:Environmental impact assessment-related
Research InstitutionWaseda University (2021)
National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (2020)

Principal Investigator

nishikawa yohei  早稲田大学, ナノ・ライフ創新研究機構, 次席研究員(研究院講師) (90867277)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2022-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2020: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Keywordsシングルセル / 全ゲノム解析 / 薬剤耐性遺伝子 / 環境微生物 / マイクロ流体デバイス
Outline of Research at the Start

本研究では、単一細胞(シングルセル)全ゲノム解析という独自の技術を薬剤耐性遺伝子の解析に取り入れることにより、河川に生息する薬剤耐性菌の全ゲノム情報をシングルセルレベルで網羅的に取得し、「どの細菌が」「どのような機序で」「どの程度の割合で」薬剤耐性遺伝子を獲得しているのか、時間的・地理的な視点を含めて明らかにすることを目的とする。

Outline of Final Research Achievements

River water was sampled twice from seven sites in the Tama River, and metagenomic and single-cell genomic analyses were conducted. The former analysis revealed that the bacterial composition changed from upstream to downstream of the Tama River, and revealed the distribution of Antibiotic Resistance Genes (ARGs) at each sampling site. In the latter analysis, we obtained 3,345 single amplified genomes (SAGs) across 26 phyla and 329 genera, which enabled the detection of ARGs from novel and uncultured bacterial strains by linking "ARG types" and "bacterial phylogeny”. We also identified 19 ARGs that are commonly detected among different bacterial lineages, and evaluated that the possibility of plasmid-based horizontal gene transfer by referring to the database.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

本研究により、河川水中のARGの分布・伝播の評価において、1細胞レベルでのゲノム解析が有用であることが示唆された。個々の細胞のゲノム情報を詳細に解析することにより、メタゲノム由来の配列からは検出が難しいARGが検出可能であることが明らかとなった。また本技術では、ARG保有細菌の割合評価や、多種類のARGを保有する細菌系統の同定に応用が可能であり、対象地点の環境パラメータを合わせて取得することで、環境のリスク評価にも適用できると考えられる。さらに今後は、1細胞ゲノム解析技術とロングリードシーケンサ等の技術を組み合わせることにより、より詳細なARGの伝播解析が可能になると考えられる。

Report

(3 results)
  • 2021 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2020 Research-status Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2021 2020

All Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 2 results) Book (1 results)

  • [Presentation] 多摩川に存在する薬剤耐性菌のゲノム情報をシングルセルレベルで解析する2021

    • Author(s)
      西川洋平, 小川雅人, 塚田祐子, 井手圭吾, 細川正人, 竹山春子
    • Organizer
      第55回日本水環境学会年会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report 2020 Research-status Report
  • [Presentation] 水圏環境の細菌・ファージの動態解明に向けたシングルゲノム解析2021

    • Author(s)
      西川洋平
    • Organizer
      第21回マリンバイオテクノロジー学会大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 河川水中の細菌・ウイルスを対象とした1細胞・1粒子レベルでのゲノム解析2021

    • Author(s)
      西川 洋平, 我妻 竜太, 塚田 祐子, 井手 圭吾, 小川 雅人, 細川 正人, 竹山 春子
    • Organizer
      日本水処理生物学会第57回(神奈川)大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] Microfluidic droplet-based single-cell genomics in aquatic and marine environments for revealing microbial and phage diversity.2021

    • Author(s)
      Yohei Nishikawa, Masato Kogawa, Masahito Hosokawa, Keigo Ide, Ryota Wagatsuma, Yuko Tsukada, Haruko Takeyama
    • Organizer
      2021 AFOB virtual conference
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Microfluidic droplet-based single-cell genome sequencing reveals biological diversities of environmental microbiome in the surrounding area of the Red Sea2021

    • Author(s)
      Yohei Nishikawa, Masato Kogawa, Masahito Hosokawa, Kai Takahashi, Keigo Ide, Kei Yura, Hayedeh Behzad, Takashi Gojobori, Haruko Takeyama
    • Organizer
      The 2020 International Chemical Congress of Pacific Basin Societies (Pacifichem 2020)
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 1細胞・1粒子レベルのゲノム情報から読み解く、環境細菌とファージの相互作用2021

    • Author(s)
      西川洋平
    • Organizer
      バイオインフォマティクス相談部会 第五回講演会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] ファージ-細菌間の相互作用解析に向けたシングルゲノム解析技術の開発2021

    • Author(s)
      我妻竜太, 西川洋平, 塚田祐子, 井手圭吾, 千々岩樹佳, 竹山春子
    • Organizer
      第9回日本生物工学会東日本支部コロキウム
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Presentation] 紅海周辺の多様な環境微生物を対象とした大規模かつ高精度なシングルセルゲノム解析2020

    • Author(s)
      西川洋平, 小川雅人, 細川正人, 峯田克彦, 高橋海, 坂梨千佳子, 由良敬, 井手圭吾, ベザドハイジ, 五條堀孝, 竹山春子
    • Organizer
      第43回日本分子生物学会年会
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Book] シングルセル解析の新たな可能性(新規生理活性物質生産菌のハイスループットスクリーニングプラットフォーム構築の項)2021

    • Author(s)
      西川洋平, 堀井俊平, 竹山春子
    • Total Pages
      104
    • Publisher
      北隆館
    • Related Report
      2021 Annual Research Report

URL: 

Published: 2020-04-28   Modified: 2023-01-30  

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