5-FU耐性株を用いた耐性関連遺伝子の同定および耐性克服の臨床応用

• Project/Area Number: 21591722
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Digestive surgery
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 奥村 直樹 Gifu University, 医学部附属病院, 助教 (80422715)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉田 和弘 岐阜大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50230727)
• Project Period (FY): 2009 – 2011
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2011)
• Budget Amount: ¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000); Fiscal Year 2011: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2010: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2009: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
• Keywords: 5FU / Oxaliplatin / FANCJ / synergistic effect / Paclitaxel / 耐性 / P-glycoprotein / OPRT / Verapamil

Research Abstract

5FUで1年間処理することによって樹立した胃癌細胞株MKN45/F2Rを、その親株MKN45と比較検討した。耐性株MKN45/F2Rは親株MKN45と比較し5FUに対しては48倍、Paxlitaxelに対しては600倍の耐性を呈し、5FUの耐性はOPRTの発現低下、Paclitaxel耐性はP-glycoproteinの発現増加によることが去年度までに明らかになった。今年度は、抗癌剤とFanconi貧血経路の関連について検討し、そこから5FUとoxaliplatinの相乗効果について新しい知見を得た。
Fanconi貧血経路とはDNA修復に関連する経路であるが、MKN45を5FUで処理すると、Fanconi貧血経路の因子の一つであるFANCJが減少する現象を認めた。FANCJの明らかになっている機能は、1.BRCA1と結合し、DNA二重鎖切断(DSB)の修復に関与する、2.MLHと結合しInterstrand cross-link(ICL)の修復に関与する、の二つであるが、5FUは間接的にDSBを生じると言われ、oxaliplatinはその細胞障害性の作用機序としてICLを生じる。よって、FANCJは5FUとoxaliplatinの相乗効果に関連することが予測された。実際、5FUでMKN45を処理するとDSBを生じそれに伴いBRCA1が誘導され、続いてFANCJが減少した。Oxaliplatinで処理した場合にはMLH1とFANCJの結合が増加することが明らかとなった。FANCJをsiRNAにてknock downするとoxaliplatinの感受性が上昇することから、5FU処理によりFANCJが減少することが、oxalipatinの感受性を上昇させ、相乗効果を呈する、という結論に至った。

Research Products

• [Presentation] 胃癌細胞における5FU耐性のメカニズムについて (2010)
  • Author(s): 森龍太郎
  • Organizer: バイオセラピィ学会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場
  • Year and Date: 2010-12-09
• [Presentation] 癌化学療法薬剤耐性メカニズムについて (2010)
  • Author(s): 森龍太郎
  • Organizer: 消化器癌発生学会
  • Place of Presentation: 軽井沢プリンスホテル
  • Year and Date: 2010-11-18
• [Presentation] 5FUの耐性メカニズムについて:耐性胃癌細胞株における検討 (2010)
  • Author(s): 森龍太郎
  • Organizer: 日本癌治療学会
  • Place of Presentation: 京都国際会議場
  • Year and Date: 2010-10-28
• [Presentation] P-glycoprotein plays a critical role in cross-resistance of 5-Fu and Paclitaxel (2010)
  • Author(s): Ryutaro MORI
  • Organizer: Asian Clinical Oncology Sosiety
  • Place of Presentation: 岐阜グランドホテル
  • Year and Date: 2010-08-25
• [Presentation] 癌化学療法薬剤耐性のメカニズムについて (2010)
  • Author(s): 森龍太郎
  • Organizer: 日本消化器外科学会
  • Place of Presentation: 海峡メッセ下関
  • Year and Date: 2010-07-14
• [Presentation] P-glycoprotein plays a critical role in cross-resistance of 5-Fu and Paclitaxel (2009)
  • Author(s): 森龍太郎, 長田真二, 高橋孝夫, 山口和也, 吉田和弘
  • Organizer: 日本癌学会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜
  • Year and Date: 2009-10-03