低親和性細胞表面レセプターに対するリガンド分子の新規同定法の開発

• Project/Area Number: 21657029
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Structural biochemistry
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 荒瀬 尚 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (10261900)
• Project Period (FY): 2009
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2009)
• Budget Amount: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000); Fiscal Year 2009: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
• Keywords: 分子間相互作用 / 受容体 / リガンド / 免疫

Research Abstract

細胞間コミュニケーションに関与する細胞表面分子には、免疫細胞の発現する分子を含めて、依然としてどのような分子と会合するかが明らかでないものが多い。その原因として、リガンドとの相互作用の親和性が低く相互作用を検出できない場合や、検出できたとしても、リガンド分子を同定できないことが挙げられる。従って、それらのレセプター分子の機能を明らかにするためには、新たな検出方法、およびその同定法を開発することが必要である。また、細胞表面に存在する分子がどのような分子と相互作用するかを解明することは、免疫学に限らず、発生、神経学等、様々な生物学の分野で重要である。そこで、本研究では、細胞表面における低親和性の相互作用の高感度検出法およびその認識分子の同定方法の開発を目指した。その結果、Fc融合蛋白のC末にIgAの配列を添加することによる12量体Fc融合タンパク以外のFc融合タンパクの多量体化法として、2次抗体を用いた多量体化法がもっとも簡易で感度が良いことが判明した。また、アフィニティーの弱いリガンドの同定方法としてラベルトランスファーや新たに紫外線による活性基(photo probe)をもったアミノ酸によるin vivoでのレセプター分子の修飾がリガンド分子の同定に有用であることが示唆された。実際これらの手法を用いて、PILRの新たなリガンド分子を血清中から同定することに成功した。今後は、これらの手法を用いて、生体分子がどのような分子を認識するかを明らかにして、生体分子の機能解明を行う予定である。

Research Products

• [Journal Article] Myelin-associated glycoprotein mediates membrane fusion and entry of neurotropic herpesviruses. (2010)
  • Author(s): Suenaga, T., Satoh, T., Somboonthum, P., Kawaguchi, Y., Mori, Y., Arase, H.
  • Journal Title: Proc.Natl.Acad.Sci.USA Volume: 107 Pages: 866-871
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Binding and uptake of H-ferritin are mediated by human transferrin receptor-1. (2010)
  • Author(s): Li, L., Fang, C.J., Ryan, J.C., Niemi, E.C., Lebron, J.A., Bjorkman, P.J., Arase, H., Torti, F.M., Torti, S.V., Nakamura, M.C., Seaman, W.E.
  • Journal Title: Proc.Natl.Acad.Sci.USA Volume: 107 Pages: 3505-3510
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Binding of herpes simplex virus glycoprotein B (gB) to PILRα depends on specific sialylated O-linked glycans on gB (2009)
  • Author(s): Wang, J., Fan, F., Satoh, T., Arii, J., Lanier, L.L., Spear, P.G., Kawaguchi, Y., Arase, H.
  • Journal Title: J.Virol. Volume: 83 Pages: 13042-13045
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The study of regulatory T cells and NKT cells in Japan : a historical perspective. (2009)
  • Author(s): Arase, H., Seino, K.I.
  • Journal Title: Int.Immunol Volume: 21 Pages: 1101-1103
  • NAID: 10027389540
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Entry of herpes simplex virus 1 and other alphaherpesviruses via the paired immunoglobulin-like type 2 receptor α. (2009)
  • Author(s): Arii, J., Uema, M., Morimoto, T., Sagara, H., Akashi, H., Ono, E., Arase, H., Kawaguchi, Y.
  • Journal Title: J.Virol. Volume: 83 Pages: 4520-4527
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Differential effects on cell fusion activity of mutations in herpes simplex virus 1 glycoprotein B (gB) dependent on whether a gD receptor or a gB receptor is overexpressed. (2009)
  • Author(s): Fan, Q., Lin, E., Satoh, T., Arase, H., Spear, P.G.
  • Journal Title: J.Virol. Volume: 83 Pages: 7384-7390
  • Peer Reviewed
• [Presentation] ペア型レセプターを介したヘルペスウィルス感染制御機構 (2010)
  • Author(s): 荒瀬尚
  • Organizer: 日本食品免疫学会次世代シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京(招待講演)
  • Year and Date: 2010-01-18
• [Presentation] Regulation of herpesvirus infection by paired receptors (2009)
  • Author(s): Hisashi Arase
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪市(招待講演)
  • Year and Date: 2009-12-02
• [Presentation] Immune Evasion of Varicella-Zoster Virus (VZV) via Siglec-7 (2009)
  • Author(s): Tadahiro Suenaga, Fuminori Arisawa, Hisashi Arase
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪市
  • Year and Date: 2009-12-02
• [Presentation] PILR-L2 is a novel PILRα ligand expressed in the brain (2009)
  • Author(s): 木檜周、白鳥行大、王静、荒瀬尚、
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪市
  • Year and Date: 2009-12-02
• [Presentation] 水痘帯状庖疹ウィルス(VZV)の新規エントリーレセプター (2009)
  • Author(s): 末永忠広、有澤史倫、佐藤毅史、Pranee Somboonthum、森康子、荒瀬尚
  • Organizer: 第57回日本ウィルス学会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2009-10-26
• [Presentation] Hemopexinによる新たなインフルエンザ感染防御機構 (2009)
  • Author(s): 木檜周、大道寺智、上田真世、中屋隆明、荒瀬尚
  • Organizer: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2009-10-26
• [Presentation] Paired Immunoglobulin (Ig) Like type 2 Receptor(PILR)αによるGlycoprotein B(gB)認識機構の解明 (2009)
  • Author(s): 山口宗親、黒木喜美子、田畑栄一、真板宣夫、梶川瑞穂、尾瀬農之、中村聖子、王静、佐藤毅、荒瀬尚、前仲勝実
  • Organizer: 第57回日本ウイルス学会・学術集会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2009-10-26
• [Presentation] A Varicells-Zoster Virus entry receptor that mediates membrane fusion and infection. (2009)
  • Author(s): Tadahiro Suenaga, Takeshi Satoh, Pranee Somboonthum, Yasuko Mori, Hisashi Arase.
  • Organizer: 14th International Conference on Immunobiology and Prophylaxis of Human Herpesvirus.
  • Place of Presentation: Kobe
  • Year and Date: 2009-10-06
• [Presentation] Regulation of herpesvirus infection by paired receptors (2009)
  • Author(s): Hisashi Arase
  • Organizer: The Viruses and Cells Gordon Conference
  • Place of Presentation: Lucca (Barga), Italy(招待講演)
  • Year and Date: 2009-06-09
• [Presentation] Molecular basis for recognition of Paired Immunoglobulin Like type2 Receptor (PILR) α to glycoprotein B (gB) of herpes simplex virus-1 (HSV-1) (2009)
  • Author(s): YAMAGUCHI Munechika, KUROKI Kimiko, TABATA Shigekazu, MAITA Nobuo, OSE Toyoyuki, KAJIKAWA Mizuho, NAKAMURA Seiko, WANG Jing, SATOH Takeshi, ARASE Hisashi, MAENAKA Katsumi
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪市
• [Remarks]
  • URL: http://immchem.biken.osaka-u.ac.jp/