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細胞内小器官トランスポータの新しい機能解析法の開発

Research Project

Project/Area Number 21659019
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Biological pharmacy
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

金子 周司  京都大学, 薬学研究科, 教授 (60177516)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 中川 貴之  京都大学, 薬学研究科, 准教授 (30303845)
白川 久志  京都大学, 薬学研究科, 助教 (50402798)
Project Period (FY) 2009 – 2010
Project Status Completed (Fiscal Year 2010)
Budget Amount *help
¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Fiscal Year 2010: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2009: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Keywordssolid-supported membrane / シナプス小胞 / ミトコンドリア / トランスポータ / 小胞体
Research Abstract

アルカンチオール自己組織化単分子層(self-assembled monolayer ; SAM)は、バイオ素子やセンシング素子への応用を目指して盛んに研究されている。そこでSAM上に生体膜脂質をコーティングし,さらにその上へ生化学的に調製した細胞膜断片を付着させた固相化細胞膜(solid-supported membrane ; SSM)を調製し、Surfer Oneシステムを用いることで、トランスポータ電流応答の記録を行った。今年度はラット脳より調製したシナプトソーム画分を用いて、シナプス小胞上のvATPase由来の電流応答をATPによってEC50値140μMで惹起させることに成功した。この応答は、bafilomycin A1やマグネシウムイオンによって阻害されたことから既報と一致する結果であることが確認された。現在までのところ、GABA輸送体VGAT、グルタミン酸輸送体VGLUTの応答には予備的な結果を除き成功していないため、これらの測定は今後の検討課題である。以上の結果からSSMを用いるトランスポータの電流応答測定はリガンドスクリーニングに有用であるだけでなく、輸送の駆動力やストイキオメトリの研究にも有用であることが示された。また、細胞内小器官に存在する起電性トランスポータやイオンチャネルの応答を測定することも可能であることがわかった。今後はさらに測定可能なトランスポータのレパートリーを増やす応用研究が必要になると考えられる。

Report

(2 results)
  • 2010 Annual Research Report
  • 2009 Annual Research Report
  • Research Products

    (2 results)

All 2011 2010

All Presentation (2 results)

  • [Presentation] An automated electrophysiological system for the measurement of transporter/channel activities2011

    • Author(s)
      Shuji Kaneko
    • Organizer
      第84回日本薬理学会年会シンポジウム
    • Place of Presentation
      (誌上開催)
    • Year and Date
      2011-03-24
    • Related Report
      2010 Annual Research Report
  • [Presentation] An automated electrophysiological system for the measurement of transporter activities2010

    • Author(s)
      Shuji Kaneko
    • Organizer
      第87回日本生理学会年会シンポジウム
    • Place of Presentation
      盛岡市民文化ホール(岩手県)
    • Year and Date
      2010-05-19
    • Related Report
      2010 Annual Research Report

URL: 

Published: 2009-04-01   Modified: 2016-04-21  

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