薬毒物の毒性発現におけるマイクロRNAの変動解析とその安全性評価への応用

• Project/Area Number: 21659032
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Environmental pharmacy
• Research Institution: Showa University
• Principal Investigator: 吉田 武美 昭和大学, 薬学部, 教授 (90006354)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 貝崎 明日香 昭和大学, 薬学部, 助教 (70407443) ; 堀井 郁夫 昭和大学, 薬学部, 客員教授 (10527203)
• Project Period (FY): 2009 – 2010
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2010)
• Budget Amount: ¥2,900,000 (Direct Cost: ¥2,900,000); Fiscal Year 2010: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 2009: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
• Keywords: マイクロRNA / 肝毒性 / 精巣毒性 / 胎盤毒性 / 毒性発現機構

Research Abstract

本研究は、肝毒性、精巣毒性、胎盤毒性を有する薬毒物による各組織のマイクロRNA変動やその標的mRNA変動を解析し、毒性発現機構から安全性評価への応用を目的とするものである。肝毒性ではカニクイザルへのアセトアミノフェン静脈内投与後で変動したmiRNAをRT-PCRでの追加検証を行った結果、マイクロアレイで得られた変動との完全な整合性が確認できなかった。アカゲザルでの論文データ情報でカスタム作製し、使用したアレイの開示配列の信頼性、アカゲザルとカニクイザルの系統差の問題やカニクイザルの個体差などが出現など解決すべき問題点が出原し、今後の検討が必要である。エチレングリコールモノメチルエスエル投与後の精巣毒性では、病理変化の著明菜2000mpg投与群では,miR-760-5p, miR-188-5p, miR-134, miR-320は2～10倍の増加、及びmiR-92aとmiR-449a(精巣で最もい)発現は半減した。同時に、標的となるインヒビンBの変動の可能性、Bc12mRNA発現の上昇、ヒストン脱アセチル化酵素4の減少と5の上昇などが認められた(本研究内容はほぼ完成し、投稿原稿作成も終了し、投稿予定)。妊娠ラットへの6-メルカプトプリン誘発胎盤毒性では胎児四肢の発達障害、胎盤重量の減少傾向、マイクロRNA変動とカスパーゼー3抗体陽性細胞の迷路層での検出、血中へのマイクロRNAの放出などが明らかになった。各臓器毒性に伴うマイクロRNAの変動と標的mRNA変動の関連を一定程度示唆できることが可能となった。