染色体遺伝子へ影響を与えない全く新しい遺伝子操作マウス創出技術の確立
| Project/Area Number |
21659097
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Experimental pathology
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| Research Institution | Kyushu University (2010)
Chiba University (2009) |
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Principal Investigator |
米満 吉和 九州大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (40315065)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
野村 政壽 九州大学, 大学院・医学研究院, 講師 (30315080)
吉田 久美 九州大学, 大学院・薬学研究院, 助教 (80553271)
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| Project Period (FY) |
2009 – 2010
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2010)
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| Budget Amount *help |
¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000)
Fiscal Year 2010: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2009: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
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| Keywords | センダイウイルスベクター / 遺伝子操作マウス / RNAヘリカーゼ |
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| Research Abstract |
本年度は、rSeVを用いた遺伝子操作マウス構築を主として検討した。
1)使用するベクターシステムの最適化
以下の3種のベクターに対し、rSeVを用いた遺伝子操作マウスの構築を試みた。
(1)ts-rSeV/dF(温度感受性変異挿入+F遺伝子欠損型ベクター:ベクター構築時に32℃にてM/HN遺伝子が発現し、体温に近い37℃にてM/HN遺伝子発現が著減する)
(2)rSeV/dFdMdHN(ウイルス膜を構成する膜蛋白遺伝子全てを欠損する)
(3)薬剤耐性遺伝子によるマウス構築効率の最適化
薬剤耐性遺伝子(neomycin^r、puromycin N-acetyltransferase (Pac))を持つベクター(ts-rSeV/dFneo、rSeV/dFdMdHNneo、ts-rSeV/dFpac、rSeV/dFdMdHNpac)。
いずれにおいてES細胞への高効率遺伝子導入、遺伝子発現細胞の多能性について維持されていることを確認した。
2)RNAヘリカーゼノックダウンベクターの構築
これまでの検討ではRIG-Iのdominant-negative変異体(RIG-IC)をrSeVにて発現させることにより個体発生まで至ることを見出した。このRIG-ICの必要性について、特に長期生存時における表現型の修飾について検討を進めた。
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Report
(2 results)
Research Products
(70 results)
