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口腔細菌のバイオフィルム形成因子の発現は唾液タンパク質によって制御されるか?

Research Project

Project/Area Number 21659488
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Social dentistry
Research InstitutionKagoshima University

Principal Investigator

於保 孝彦  鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 教授 (50160940)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山口 泰平  鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 准教授 (80230358)
長田 恵美  鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 助教 (00304816)
Project Period (FY) 2009 – 2010
Project Status Completed (Fiscal Year 2010)
Budget Amount *help
¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000)
Fiscal Year 2010: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 2009: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywords歯学 / 微生物 / 唾液 / 歯垢
Research Abstract

本研究の目的は口腔疾患のみならず様々な全身疾患を誘発することが知られている口腔バイオフィルムの形成に際して、唾液タンパク質がどのように関わるかを調べるものである。
本年度はStreptococcus mutansの口腔バイオフィルム形成因子の遺伝子発現に及ぼす唾液の影響を調べた。S.mutans Xcを培養してリン酸緩衝液(PBS)で洗浄した後、ヒト安静時唾液を遠心分離して得られた上清中に懸濁し、37℃で1時間培養した。菌体を回収した後RNAを抽出し、バイオフィルム形成因子である菌体表層タンパク質抗原(PAc)およびグルカン合成酵素(GTF)の遺伝子発現をリアルタイムPCR法で調べた。その結果、唾液と反応させた菌体のPAc遺伝子発現は、対照(PBS処理)と比較して2.0倍に上昇し、一方GTF遺伝子発現は、0.1倍に低下した。菌体と唾液との反応時間を変化させた場合、顕著な差は認められなかった。また他のS.mutans株(MT8148、UA159)を用いたところ、発現の程度に差はあるもののPAc遺伝子発現の上昇、GTF遺伝子発現の低下が同様に認められた。次にS.mutansのPAcとGTFのタンパク発現レベルを経時的に調べたところ、PAcの発現はほぼ一定であるのに対して、GTFの発現は時間とともに低下した。
以上の結果からPAcは唾液タンパク質と反応する因子であるため、唾液の存在によりその遺伝子発現が上昇する何らかの作用が働くこと、GTFはグルコースの存在下に活性が発現される酵素であるため唾液は影響を及ぼさないことが推測された。PAc遺伝子発現の上昇をもたらす唾液中のタンパク質を同定するため、唾液の分画を行い菌体への作用を確認中であるが、このタンパク質の機能領域を決定することにより口腔バイオフィルムの形成抑制が可能である。

Report

(2 results)
  • 2010 Annual Research Report
  • 2009 Annual Research Report
  • Research Products

    (3 results)

All 2011 2009

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Adherence of oral opportunistic bacteria to endotracheal tubes and cuffs.2011

    • Author(s)
      de Toledo A., et al.
    • Journal Title

      J.Dent.Health

      Volume: 61 Pages: 57-64

    • Related Report
      2010 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Gene cloning and characterization of Streptococcus intermedius fimbriae involved in saliva-mediated aggregation and adherence2009

    • Author(s)
      Yamaguchi T., et al.
    • Journal Title

      Res.Microbiol. 160

      Pages: 809-816

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 口腔レンサ球菌のカルシウム依存性唾液凝集反応の解析2009

    • Author(s)
      山口泰平, 於保孝彦
    • Organizer
      第58回日本口腔衛生学会総会
    • Place of Presentation
      長良川国際会議場(岐阜)
    • Year and Date
      2009-10-11
    • Related Report
      2009 Annual Research Report

URL: 

Published: 2009-04-01   Modified: 2016-04-21  

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