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分子から個体レベルまで総合的に内分泌攪乱物質を評価できるセンサーガエルの開発

Research Project

Project/Area Number 21710067
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Risk sciences of radiation/Chemicals
Research InstitutionEhime University

Principal Investigator

鈴木 賢一  愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, グローバルCOE助教 (90363043)

Project Period (FY) 2009 – 2010
Project Status Completed (Fiscal Year 2010)
Budget Amount *help
¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000)
Fiscal Year 2010: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2009: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Keywords内分泌撹乱物質 / 核内受容体 / アフリカツメガエル / トランスジェニック / 甲状腺ホルモン / 内分泌攪乱物質
Research Abstract

本研究課題の目的は、分子から個体レベルまで総合的に内分泌かく乱物質を評価するシステムの開発である。アフリカツメガエル左モデルとし、以下の研究成果を得た。
1)甲状腺ホルモン(TH)応答プロモーター制御下でルシフェラーゼ遺伝子を発現する遺伝子組換えガエルを樹立し、そのF1幼生を用いて、THに感受性の高い組織と器官をin vivoで評価した。その結果、嗅覚器官や視神経の感受性が高いことが明らかになり、THかく乱作用の新たな評価器官としての可能性を提示した。
2)蛍光タンパク質を融合した核内受容体の発現コンストラクトを用いて、内分泌かく乱作用の評価糸の開発を行った。その結果の1つとして、ツメガエルの芳香族炭化水素受容体(AhR)はリガンド非依存的に核内移行していることが明らかになった。
3)ビスフェノールAにより転写が抑制されるTH応答性ケラチン遺伝子に注目し、そのプロモーター制御下でGFPやDsRedを発現する遺伝子組換えガエルを樹立した。これらのF1幼生を用いて、THアンタゴニスト活性のin vivo評価が可能となった。
4)エストロジェン受容体、クルココルチコイド受容体及びAhRの標的遺伝子のプロモーターを用いたルシフェラーゼレポーターコンストラクト数種類を作製し、一部はツメガエル培養細胞を用いてin vivoでの評価を行い、さまさまなリガンドに応答することを確かめた。
本研究で得られたツールや知見は、両生類を用いた内分泌かく乱作用機構の解明に役立つものと期待される。

Report

(2 results)
  • 2010 Annual Research Report
  • 2009 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2010 2009 Other

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (2 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Characterization of a novel type I keratin gene and generation of transgenic lines with fluorescent reporter genes driven by its promoter/enhancer in Xenopus laevis2010

    • Author(s)
      Suzuki, et al
    • Journal Title

      Developmental Dynamics

      Volume: 239 Pages: 3172-3181

    • Related Report
      2010 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Spatiotemporal expression profile of no29/nucleophosmin3 in the intestine during Xenopus laevis metamorphosis

    • Author(s)
      Motoi, et al
    • Journal Title

      Cell Tissue Research

      Volume: (印刷中)

    • Related Report
      2010 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Identification and characterization of cytochrome P450 and xenobiotics receptor genes in amphibians, Xenopus laevis and Xenopus tropicalis2009

    • Author(s)
      Suzuki, K., Iwata, H.
    • Organizer
      International Symposium on Environmental Specimen Bank, Exploring Possibility of Setting-up ESBs in Developing Countries
    • Place of Presentation
      Matsuyama, Japan
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] Identification and expression profile of CYP1-4 genes in Xenopus laevis2009

    • Author(s)
      Suzuki, K., Iwata, H.
    • Organizer
      第12回日本内分泌撹乱化学物質学会
    • Place of Presentation
      東京、日本
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Book] バイオサイエンスとインダストリー高輝度ルシフェラーゼの開発と応用2010

    • Author(s)
      野田健一・鈴木賢一・黒田章夫
    • Total Pages
      3
    • Publisher
      財団法人バイオインダストリー協会
    • Related Report
      2009 Annual Research Report

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Published: 2009-04-01   Modified: 2016-04-21  

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