Development of a platform for a novel proteome analysis in a living cell utilizing proteoinjection

• Project/Area Number: 21860027
• Research Category: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Biofunction/Bioprocess
• Research Institution: Tokyo University of Agriculture and Technology
• Principal Investigator: FUNABASHI Hisakage Tokyo University of Agriculture and Technology, 大学院・工学研究院, 助教 (60552429)
• Project Period (FY): 2009 – 2010
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2010)
• Budget Amount: ¥2,743,000 (Direct Cost: ¥2,110,000、Indirect Cost: ¥633,000); Fiscal Year 2010: ¥1,274,000 (Direct Cost: ¥980,000、Indirect Cost: ¥294,000); Fiscal Year 2009: ¥1,469,000 (Direct Cost: ¥1,130,000、Indirect Cost: ¥339,000)
• Keywords: バイオテクノロジー / プロテオーム解析 / フェムトインジェクション / 単一細胞解析 / 細胞内機能解析

Research Abstract

We have established basic technology for a novel proteome analysis in which the functional rolls of proteins in a living cell are evaluated by the analysis of cellular response induced by the direct introduction of the proteins into a cell (proteoinjection). We have successfully developed a technology which enables us to introduce proteins with functions into a single-target-living ES cell. Moreover, it has been found that the simple insertion of a transcriptional factor specific sequence into a probe DNA enhances the efficiency of the expression of a reporter in a living ES cell. Therefore it has been suggested a new method to evaluate the functional rolls of transcriptional factors inside living ES cells depending on the enhancement of the probe expression efficiency.

Research Products

• [Journal Article] Sox2 regulatory region 2 sequence works as a DNA nuclear targeting sequence enhancing the efficiency of an exogenous gene expression in ES cells (2010)
  • Author(s): H.Funabashi, M.Takatsu, M.Saito, H.Matsuoka
  • Journal Title: Biochem.Biophys.Res.Commun. 400(4) Pages: 554-558
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] フェムトインジェクションによる単-ES細胞操作 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Journal Title: Electrochemistry 78(10) Pages: 7-11
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] インジェクションを利用した単-生細胞機能解析 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Journal Title: Chemical Sensors 26(3) Pages: 120-126
• [Journal Article] Sox2 regulatory region 2 sequence works as a DNA nuclear targeting sequence enhancing the efficiency of an exogenous gene expression in ES cells (2010)
  • Author(s): Hisakage Funabashi, Makoto Takatsu, Mikako Saito, Hideaki Matsuoka
  • Journal Title: Biochem.Biophys.Res.Commun. Volume: 400(4) Pages: 554-558
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] フェムトインジェクションによる単一ES細胞操作 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Journal Title: Electrochemistry Volume: 78(10) Pages: 7-11
  • NAID: 10026969914
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] インジェクションを利用した単一生細胞機能解析 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Journal Title: Chemical Sensors Volume: 26(3) Pages: 120-126
  • NAID: 40017357303
• [Presentation] Dynamic analysis of molecular beacons and functional proteins introduced into target-single ES cells by femtoinjection (2011)
  • Author(s): 小池秀樹, 杉元侑樹, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: The 5th International Workshop on Approaches to Single-Cell Analysis
  • Place of Presentation: Tokyo, Japan
• [Presentation] Dummy DNA injection for controlling a specific transcription in a target-single ES cell (2011)
  • Author(s): 大浦誠太郎, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: The 5th International Workshop on Approaches to Single-Cell Analysis
  • Place of Presentation: Tokyo, Japan "Young Scientists Poster Award"
• [Presentation] ダミーDNA導入による標的単-ES細胞の転写調節 (2011)
  • Author(s): 大浦誠太郎, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 電気化学会第78回大会
  • Place of Presentation: 横浜国立大学
• [Presentation] 単一ES細胞内の標的mRNA挙動解析のためのMolecular Beacon法の検討 (2011)
  • Author(s): 小池秀樹, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 電気化学会第78回大会
  • Place of Presentation: 横浜国立大学
• [Presentation] 標的ES細胞内の転写因子バランスコントロール法開発 (2011)
  • Author(s): 舟橋久景, 杉元侑樹, 小池秀樹, 大浦誠太郎, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 日本化学会第91春季年会
  • Place of Presentation: 神奈川大学横浜キャンパス
• [Presentation] Dummy DNA injection for controlling a specific transcription in a target-single ES cell (2011)
  • Author(s): Seitaro Oura, Hisakage Funabashi, Mikako Saito, Hideaki Matsuoka
  • Organizer: The 5th International Workshop on Approaches to Single-Cell Analysis
  • Place of Presentation: Tokyo, Japan
• [Presentation] ダミーDNA導入による標的単-ES細胞の転写調節 (2011)
  • Author(s): 大浦誠太郎, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 電気化学会 第78回大会
  • Place of Presentation: 横浜国立大学,東日本大震災のため実際の大会は中止したが、3月29日の講演要旨集の発行をもって本大会での発表は成立したものとして扱う
• [Presentation] 単一ES細胞内の標的mRNA挙動解析のためのMolecular Beacon法の検討 (2011)
  • Author(s): 小池秀樹, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 電気化学会 第78回大会
  • Place of Presentation: 横浜国立大学,東日本大震災のため実際の大会は中止したが、3月29日の講演要旨集の発行をもって本大会での発表は成立したものとして扱う
• [Presentation] 標的ES細胞内の転写因子バランスコントロール法開発 (2011)
  • Author(s): 舟橋久景, 杉元侑樹, 小池秀樹, 大浦誠太郎, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 日本化学会 第91春季年会
  • Place of Presentation: 神奈川大学横浜キャンパス,東日本大震災のため実際の大会は中止したが、第91春季年会は紙上およびWeb上で開催し、本年会での発表が成立したものとして扱う
• [Presentation] ES細胞内タンパク質のダイナミクスを利用した高効率遺伝子発現 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 電気化学会 第77回大会
  • Place of Presentation: 富山大学五福キャンパス(富山)
  • Year and Date: 2010-03-30
• [Presentation] ES細胞内遺伝子発現バランス測定法の開発 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 佐谷航, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 日本化学会 第90春季年会
  • Place of Presentation: 近畿大学本部キャンパス(大阪)
  • Year and Date: 2010-03-29
• [Presentation] Dynamic analysis of gene expression balance in target single-ES cells towards a more clear-cut indicator of differentiation (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: Pacifichem 2010
  • Place of Presentation: Honolulu, USA
• [Presentation] Oct3/4発現制御による標的ES細胞の分化誘導法開発 (2010)
  • Author(s): 佐谷航, 舟橋久景, 大浦誠太郎, 小池秀樹, 杉元侑樹, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 2010年電気化学秋季大会
  • Place of Presentation: 神奈川工科大学, 厚木
• [Presentation] 標的単一細胞内の経時的遺伝子発現の解析 (2010)
  • Author(s): 高津信, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 第57回日本実験動物学会総会
  • Place of Presentation: 京都テルサ
• [Presentation] ES細胞内タンパク質のダイナミクスを利用した高効率遺伝子発現 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 電気化学会第77回大会
  • Place of Presentation: 富山大学五福キャンパス
• [Presentation] ES細胞内遺伝子発現バランス測定法の開発 (2010)
  • Author(s): 舟橋久景, 佐谷航, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 日本化学会第90春季年会
  • Place of Presentation: 近畿大学本部キャンパス
• [Presentation] Oct3/4発現制御による標的ES細胞の分化誘導法開発 (2010)
  • Author(s): 佐谷航, 舟橋久景, 大浦誠太郎, 小池秀樹, 杉元侑樹, 高津信, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 2010年電気化学秋季大会
  • Place of Presentation: 神奈川工科大学,厚木
• [Presentation] 標的単一細胞内の経時的遺伝子発現の解析 (2010)
  • Author(s): 高津信, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 第57回日本実験動物学会総会
  • Place of Presentation: 京都テルサ,京都
• [Presentation] フェムトインジェクションによるマウスES細胞への遺伝子導入解析 (2009)
  • Author(s): 斉藤美佳子, 高津信, 舟橋久景, 松岡英明
  • Organizer: 電気通信大学・東京農工大学第6回合同シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京農工大学小金井キャンパス
  • Year and Date: 2009-12-05
• [Presentation] フェムトインジェクションによるマウスES細胞への遺伝子導入解析 (2009)
  • Author(s): 斉藤美佳子, 高津信, 舟橋久景, 松岡英明
  • Organizer: 電気通信大学・東京農工大学第6回合同シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京農工大学小金井キャンパス(東京)
  • Year and Date: 2009-12-05
• [Presentation] Semi-quantitative expression of target genes in mouse ES single-cells by femto-injection (2009)
  • Author(s): Mikako Saito, Makoto Takatsu, Tsukasa Kaeriyama, Hisakage Funabashi, Hideaki Matsuoka
  • Organizer: The sixth annual meeting of The Asia Reproductive Biotechnology Society
  • Place of Presentation: Siem Reap, Cambodia
  • Year and Date: 2009-11-16
• [Presentation] フェムトインジェクションによる導入分子の細胞内挙動のリアルタイム解析 (2009)
  • Author(s): 高津信, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 2009年電気化学秋季大会
  • Place of Presentation: 東京農工大学小金井キャンパス(東京)
  • Year and Date: 2009-09-10
• [Presentation] フェムトインジェクションによる導入分子の細胞内挙動のリアルタイム解析 (2009)
  • Author(s): 高津信, 舟橋久景, 斉藤美佳子, 松岡英明
  • Organizer: 2009年電気化学秋季大会
  • Place of Presentation: 東京農工大学小金井キャンパス
• [Remarks] ホームページ等