| Project/Area Number |
21J10424
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Review Section |
Basic Section 53040:Nephrology-related
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
山崎 智貴 東京大学, 大学院医学系研究科, 特別研究員(PD)
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| Project Period (FY) |
2021-04-28 – 2023-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
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| Keywords | Dznep / HIF / TIMP2 / 慢性腎臓病 / エピジェネティクス / 尿細管細胞 / 低酸素 |
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| Outline of Research at the Start |
急性腎障害 が完全に改善した後に、慢性腎臓病 となり腎障害が進行し (AKI-to-CKD transition)、末期腎不全になる患者がいることが知られている。AKIによる障害がDNAメチル化やヒストン修飾などのDNAの配列によらないエピジェネティックな変化を起こし、細胞記憶としてCKDへ移行する要因になる可能性が考えられている。ヒストン修飾阻害薬であるDznepが腎線維化を抑制し、線維化因子であるTIMP2の発現を抑制することが先行研究で示されている。本研究では、Dznepが腎性線維化を抑制する機構をTIMP2のエピジェネティック制御を中心に解明していく。
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| Outline of Annual Research Achievements |
HIF1αの結合領域を、過去のchip-seqのデータから同定して、その領域をpGL3-promotorのベクターにクローニングにして、レポーターアッセイを行うこととした。低酸素刺激を加えると、emptyベクターに比べて、HIF1αをクローニングしたベクターをトランスフェクションした尿細管細胞にて、低酸素における発光量が増えた。この結果より、この領域によるHIFの結合が低酸素におけるTIMP2の発現に関与することが示唆された。次に、siRNAによってHIF1αの抑制をしてみることで、TIMP2の発現量がどうなるかについて実験を試みた。しかし、HIFの抑制化で低酸素刺激を加えると、尿細管細胞の培養がうまく行かなかったため、この実験は断念することとした。そして、今までの実験データを踏まえて、論文投稿することとした。改定を求められた部分である、ヒストンのWestern blotによる定量の再現や、低酸素刺激のポジティブコントロールやネガティブコントロール実験の追加などの修正をし、現在再投稿を目指している。
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| Research Progress Status |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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