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Novel wide-field and deep optical imaging of neural circuits in mouse brain utilizing fluoropolymer nanosheet

Research Project

Project/Area Number 21J14773
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Review Section Basic Section 46010:Neuroscience-general-related
Research InstitutionCenter for Novel Science Initatives, National Institutes of Natural Sciences (2022)
The Graduate University for Advanced Studies (2021)

Principal Investigator

高橋 泰伽  大学共同利用機関法人自然科学研究機構(新分野創成センター、アストロバイオロジーセンター、生命創成探究, 生命創成探究センター, 特別研究員(PD)

Project Period (FY) 2021-04-28 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2022: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2021: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
KeywordsIn vivo 2光子顕微鏡法 / ナノシート / ナノマテリアル / オープンスカル法 / 脳神経科学 / 二光子顕微鏡 / In vivo イメージング
Outline of Research at the Start

脳の作動原理や精神疾患の機序を解明する上では、細胞一つの活動だけではなく、ネットワーク全体の同期的な活動を計測する必要がある。しかし、マウス生体脳内の神経細胞の観察に用いられるin vivo二光子顕微鏡法は、脳表層の狭い領域を高精細に光イメージングするには適しているが、脳深部かつ広範囲での観察は困難であった。
本研究では(1)ナノシートを用いた頭蓋骨代替手法の改良、(2)脳広範囲に蛍光プローブを導入する新規手法の開発、(3)脳深部観察に適した高出力の長波長レーザー光源の導入を統合的に進める。これにより、長期間にわたって脳深部かつ広範囲において単一神経細胞の光イメージングできる手法の確立を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

脳の作動原理や精神疾患の機序を解明する上では、細胞一つの活動だけではなく、ネットワーク全体の同期的な活動を計測する必要がある。しかし、マウス生体脳内の単一神経細胞の観察に用いられるin vivo二光子顕微鏡法は、脳表層の狭い領域を高精細に光イメージングするには適しているが、脳深部かつ広範囲での観察は困難であった。この原因の一つは、マウス生体脳の神経細胞を高解像度で観察するにあたって使用される、頭蓋骨の一部を除去してカバーガラスで置換して観察窓を作成する手術(オープンスカル法)にあった。
本研究では、新規光学素材とナノ材料の高分子超薄膜 (ナノシート)を併用したオープンスカル法の改良を実施し、昨年度までに覚醒マウス観察時の視野ブレと長期観察を実現する新規手法の骨子を確立した。本年度は、ナノシートと併用する新規光学素材の実用性の検証として、新規手法を用いて作成した観察窓の生体組織への影響を免疫染色法を用いて評価した。その結果、ナノシートを用いることで炎症の度合いが低いことを確認した。また、より広視野での観察の実現に向けて大脳皮質以外の領域に新規手法を用いることにも成功した。一方、深部イメ―ジングへの応用として、光学収差を低減する技術と併用することにより、脳深部領域における観察像をより高いSignal-Background 比で取得することに成功した。これらの成果については、現在原著論文を投稿中である。

Research Progress Status

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • Research Products

    (14 results)

All 2023 2022 2021

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 4 results) Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results)

  • [Journal Article] 3D imaging techniques2022

    • Author(s)
      Fumoto Shintaro、Takahashi Taiga
    • Journal Title

      Drug Delivery System

      Volume: 37 Issue: 5 Pages: 444-447

    • DOI

      10.2745/dds.37.444

    • ISSN
      0913-5006, 1881-2732
    • Year and Date
      2022-11-25
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Open Access
  • [Journal Article] Advanced observation of brain and nerve cells using two-photon microscopy with novel techniques2022

    • Author(s)
      Ishii Hirokazu、Takahashi Taiga、Yamaguchi Kazushi、Nemoto Tomomi
    • Journal Title

      Microscopy

      Volume: 72 Issue: 2 Pages: 144-150

    • DOI

      10.1093/jmicro/dfac047

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 新規的な技術を用いた二光子顕微鏡による生体イメージングの展開2022

    • Author(s)
      根本知己 大友康平 山口和志 高橋泰伽
    • Journal Title

      レーザー研究

      Volume: 50(2) Pages: 68-71

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Journal Article] Protocol for constructing an extensive cranial window utilizing a PEO-CYTOP nanosheet for in vivo wide-field imaging of the mouse brain2021

    • Author(s)
      Takahashi Taiga、Zhang Hong、Otomo Kohei、Okamura Yosuke、Nemoto Tomomi
    • Journal Title

      STAR Protocols

      Volume: 2 Issue: 2 Pages: 100542-100542

    • DOI

      10.1016/j.xpro.2021.100542

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Focusing new light on brain functions: multiphoton microscopy for deep and super-resolution imaging2021

    • Author(s)
      Ishii Hirokazu、Otomo Kohei、Takahashi Taiga、Yamaguchi Kazushi、Nemoto Tomomi
    • Journal Title

      Neuroscience Research

      Volume: - Pages: 00245-5

    • DOI

      10.1016/j.neures.2021.11.011

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 生命多光子顕微鏡による深部高解像・超解像イメージング2021

    • Author(s)
      大友康平 髙橋泰伽 山口和志 石井宏和 根本知己
    • Journal Title

      光学

      Volume: 50巻4号 Pages: 141-146

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 高分子超薄膜を活用したマウス脳の広視野in vivo二光子イメージング法の開発2023

    • Author(s)
      高橋泰伽、張宏、揚妻正和、鍋倉淳一、大友康平、岡村陽介、根本知己
    • Organizer
      第100回生理学会大会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 高分子超薄膜を活用したマウス脳の長期的な広視野in vivo二光子イメージング2022

    • Author(s)
      高橋泰伽、張宏、揚妻正和、鍋倉淳一、大友康平、岡村陽介、根本知己
    • Organizer
      第31回日本バイオイメージング学会学術集会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] In vivo wide-field imaging of the mouse brain throughnovel cranial window utilizing PEO-CYTOP nanosheet2022

    • Author(s)
      Taiga Takahashi, Hong Zhang, Masakazu Agetsuma, Junichi Nabekura, Kohei Otomo, Yosuke Okamura, Tomomi Nemoto
    • Organizer
      15th International Symposium on Nanomedicine
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] In vivo cortex-wide imaging of living mouse brain utilizing novel fluoropolymer nanosheet2022

    • Author(s)
      Taiga Takahashi
    • Organizer
      Joint symposium of McGill University (McGill) - National Institute for Physiological Sciences (NIPS) “Recent Advances in Neuroscience”
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 高分子超薄膜を用いたマウス脳深部の広視野in vivo二光子イメージング2022

    • Author(s)
      高橋泰伽 張宏 川上良介 鎗野目健二 揚妻正和 鍋倉淳一 大友康平 岡村陽介 根本知己
    • Organizer
      2021年度 日本分光学会細胞分光部会研究会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] Improving two-photon microscopy by utilizing novel materials and laser optics2021

    • Author(s)
      Tomomi Nemoto Kohei Otomo Taiga Takahashi Kazushi Yamaguchi
    • Organizer
      The 8th Japan-China Symposium on Nanomedicine
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Novel fluoropolymer nanosheets “PEO-CYTOP” for in vivo deep and wide-field imaging of the mouse brain2021

    • Author(s)
      Taiga Takahashi Hong Zhang Ryosuke Kawakami Kenji Yarinome Masakazu Agetsuma Junichi Nabekura Kohei Otomo Yosuke Okamura Tomomi Nemoto
    • Organizer
      The 8th Japan-China Symposium on Nanomedicine
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Adaptive optics and super-resolution on two-photon microscopy2021

    • Author(s)
      Tomomi Nemoto Kohei Otomo Hirokazu Ishii Taiga Takahashi Motosuke Tsutsumi Kazushi Yamaguchi
    • Organizer
      the 14th International Symposium of Nanomedicine (ISNM2021)
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2021-05-27   Modified: 2024-03-26  

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