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Research Project

Project/Area Number 21J15218
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Review Section Basic Section 43040:Biophysics-related
Research InstitutionOsaka Metropolitan University (2022)
Osaka City University (2021)

Principal Investigator

笹嶋 雄也  大阪公立大学, 大学院理学研究科, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2021-04-28 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2022: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2021: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
KeywordsCryo-ET / Subtomogram averaging / JCVI-syn3B / Actin / Cytoskeleton / Swimming / クライオ電子顕微鏡法 / 細胞骨格 / ヌクレオシダーゼ / スピロプラズマ
Outline of Research at the Start

植物や節足動物の寄生性細菌である“らせん”のかたちをしたスピロプラズマは、他の生物には見られないユニークな運動をする。すなわち、細胞のらせんを、右巻き左巻きと交互に切り替えて、“ねじれ”を先端から後方に伝播させて遊泳する。本研究では近年急速に発展を遂げる単粒子クライオ電子顕微鏡法および、電子線トモグラフィを活用することで、スピロプラズマ遊泳メカニズムを原子レベルで明らかにする。

Outline of Annual Research Achievements

らせんを反転して遊泳するスピロプラズマの遊泳メカニズムを明らかにするため、独自の遊泳装置リボンに 注目した。そこで、合成細菌jcvi-syn3B を用いたスピロプラズマ遊泳の再構成系に着目し、syn3B 細胞内 のリボン構造をクライオ電子線トモグラフィーを用いて構造解析した。バクテリアアクチンであるMreB4 と5を同時に、またスピロプラズマ特異的なフィブリルタンパク質を発現させたそれぞれのsyn3B 株と、 野生型であるスピロプラズマのリボン構造を比較することで、リボンの中央部分にMreB がその両サイドに フィブリルフィラメントがそれぞれ配向することを明らかにした。また、フィブリルフィラメントのin situ 構造を明らかにするためにサブトモグラム平均を行なったところ、フィブリルフィラメントは正電荷を 帯びた面が細胞膜と、また隣り合うフィラメント間では互いに分子表面電荷を打ち消すように、それぞれ相 互作用をすることを明らかにした。本研究により、遊泳装置の構成を分子レベルで明らかにしたことは、ス ピロプラズマ遊泳のさらなる理解に寄与すると考えられる。

Research Progress Status

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • Research Products

    (12 results)

All 2022 2021

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 3 results) Presentation (7 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Isolation and structure of the fibril protein, a major component of the internal ribbon for Spiroplasma swimming2022

    • Author(s)
      Sasajima Y, Kato K, Miyata T, Kawamoto A, Namba K and Miyata M
    • Journal Title

      Frontiers in Microbiology

      Volume: 13 Pages: 1004601-1004601

    • DOI

      10.3389/fmicb.2022.1004601

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Reconstitution of a minimal motility system based on Spiroplasma swimming by two bacterial actins in a synthetic minimal bacterium2022

    • Author(s)
      Kiyama H, Kakizawa S, Sasajima Y, Tahara YO and Miyata M
    • Journal Title

      Science Advances

      Volume: 8 Issue: 48 Pages: eabo7490

    • DOI

      10.1126/sciadv.abo7490

    • URL

      https://ocu-omu.repo.nii.ac.jp/records/2020471

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] ATP-dependent polymerisation dynamics of bacterial actin proteins involved in Spiroplasma swimming2022

    • Author(s)
      Takahashi D, Fujiwara I, Sasajima Y, Narita A, Imada K and Miyata M
    • Journal Title

      Open Biology

      Volume: 26 Issue: 10 Pages: 220083-220083

    • DOI

      10.1098/rsob.220083

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Prospects for the mechanism of Spiroplasma swimming2021

    • Author(s)
      Sasajima Y and Miyata M
    • Journal Title

      Frontiers in Microbiology

      Volume: -

    • DOI

      10.3389/fmicb.2021.706426

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Elucidation of fibril helix structure responsible for swimming in Spiroplasma using electron microscopy2021

    • Author(s)
      Sasajima Y, Kato K, Miyata T, Namba K and Miyata M
    • Journal Title

      bioRxiv

      Volume: -

    • DOI

      10.1101/2021.02.24.432793

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 電子線クライオトモグラフィーで可視化したスピロプラズマの細胞骨格リボン2022

    • Author(s)
      Yuya Sasajima, Takayuki Kato, Tomoko Miyata, Akihiro Kawamoto, Fumiaki Makino, Keiichi Namba, Makoto Miyata
    • Organizer
      第60回日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] クライオ電子顕微鏡法によるスピロプラズマ細胞骨格リボンの構造解析2022

    • Author(s)
      Yuya Sasajima, Takayuki Kato, Tomoko Miyata, Akihiro Kawamoto, Fumiaki Makino, Keiichi Namba, Makoto Miyata
    • Organizer
      第22回日本蛋白質科学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 電子線クライオトモグラフィで可視化したスピロプラズマの細胞骨格リボン2022

    • Author(s)
      Yuya Sasajima, Takayuki Kato, Tomoko Miyata, Akihiro Kawamoto, Fumiaki Makino, Keiichi Namba, Makoto Miyata
    • Organizer
      第49回日本マイコプラズマ学会学術集会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] スピロプラズマのらせん反転運動機構2021

    • Author(s)
      笹嶋 雄也,加藤 貴之,宮田 知子,難波 啓一,宮田 真人
    • Organizer
      日本マイコプラズマ学会第48回学術集会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] クライオ EMで明らかにしたスピロプラズマ遊泳に関与するらせん状細胞骨格フィブリルの構造2021

    • Author(s)
      笹嶋 雄也,加藤 貴之,宮田 知子,難波 啓一,宮田 真人
    • Organizer
      第94回日本細菌学会総会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] Mechanism of Spiroplasma swimming suggested by CryoEM structure of fibril2021

    • Author(s)
      Yuya Sasajima, Takayuki Kato, Tomoko Miyata, Keiichi Namba, Makoto Miyata
    • Organizer
      XXIII Biennial Congress of the International Organization for Mycoplasmology - IOM
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Mechanism of Spiroplasma swimming suggested by Cryo-EM structure of the fibril2021

    • Author(s)
      Yuya Sasajima, Takayuki Kato, Tomoko Miyata, Keiichi Namba, Makoto Miyata
    • Organizer
      BLAST XVI
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2021-05-27   Modified: 2024-03-26  

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