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Asymmetric differentiation of pigment cells and its regulation by retinoic acid signaling in Japanese flounder

Research Project

Project/Area Number 21K05779
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 40040:Aquatic life science-related
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

横井 勇人  東北大学, 農学研究科, 教授 (40569729)

Project Period (FY) 2021-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Keywordsヒラメ / 色素胞分化 / レチノイン酸 / 左右非対称性
Outline of Research at the Start

ヒラメやカレイ類では色素胞が有眼側のみで分化して左右非対称な体色を呈するが、その制御機構は不明な点が多い。近年の研究により、レチノイン酸(RA)処理により無眼側において異所的な色素胞分化が誘導されること、また逆にRA阻害剤を用いた実験で有眼側の色素胞分化が影響されることが示され、色素胞分化おけるRAの重要性が明らかになりつつある。本研究ではRAのシグナルを伝達する遺伝子の解析を通して、左右非対称な色素胞分化に至る分子メカニズムを明らかにし、ヒラメの体色に左右差が生じるメカニズムの解明を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

ヒラメは左右対称な仔魚として成長した後、有眼側のみで色素胞が分化して左右非対称な体色を呈するが、その分子メカニズムは不明な点が多い。レチノイン酸(RA)浸漬およびRA阻害剤の浸漬実験により、変態期の色素胞分化おけるRAの重要性が明らかにされた。本研究は、ヒラメの左右非対称な色素胞分化におけるRAシグナルの役割と、左右差が生じるメカニズムの解明を目指して研究を行なっている。
色素胞分化の評価にはgch2がマーカー遺伝子として使われてきたが、ヒラメでは5つのgch関連遺伝子が見つかった。脊椎動物に共通のgchパラログ1つ(gch1)と魚類に共通のパラログ1つ(gch2)に加え、ヒラメには3つのパラログがあることが示唆された。これらは異体類(flatfish)に特徴的なオーソログであることが示唆されたため、gchfl1、gchfl2および gchfl3と命名して解析を行なってきたが、これらの遺伝子の異体類特異性について疑義が生じた。DNAシーケンシング技術の飛躍的な進歩により、さまざまな生物のゲノム情報が利用可能になり、例えばEnsembl genome databaseにおいて85種の魚類のゲノム情報にアクセスでき、Genomicusではシンテニー情報を調べることができる。これらを利用して先述のgchfl遺伝子についてオーソロジーを詳しく調べたところ、ヒラメ及び近縁の異体類における遺伝子のタンデム重複により生じたと考えられるgchflが存在した一方で、脊椎動物のゲノム倍加または真骨魚類のゲノム倍加により生じた後に、メダカやゼブラフィッシュでは失われたことが示唆されたgchflも存在した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

メダカを実験モデルとしてゲノム編集による機能解析実験を計画しているが、ノックアウト実験およびGFPレポーターのノックイン実験に想定していたよりも長い時間を要している。まずは簡便なノックアウトから行い、ノックインも今年度中に完了したいと考えている。

Strategy for Future Research Activity

機能解析実験を行うため、メダカをモデルとしてノックアウト、およびノックイン系統を作出する。それぞれに複数のターゲットを検討して早急にゲノム編集個体を樹立する。これらにヒラメのgch遺伝子およびgchflを導入して機能的な差異を検討する。
また、先述のようにgchflには進化的な背景に不明瞭な部分があるため、進化系統学的に重要な生物のゲノム情報を解析してこれら遺伝子が生じた背景を明らかにしたい。

Report

(3 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (19 results)

All 2023 2022 2021 Other

All Int'l Joint Research (2 results) Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 1 results) Presentation (11 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 3 results) Book (1 results)

  • [Int'l Joint Research] 国立海洋研究所(スペイン)

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  • [Int'l Joint Research] トレント大学(イタリア)

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  • [Journal Article] Vitellogenin uptake activity in the intestinal ducts of intraovarian embryos in a viviparous teleost Xenotoca eiseni2023

    • Author(s)
      Nomura Jumpei, Yokoi Hayato, Hondo Eiichi, Iida Atsuo
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      Volume: 644 Pages: 79-84

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2023.01.009

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  • [Journal Article] Gene delivery available in molluscan cells by strong promoter discovered from bivalve-infectious virus2022

    • Author(s)
      Yoon Jeongwoong、Gu Wen-Bin、Konuma Mizuki、Kobayashi Mutsuko、Yokoi Hayato、Osada Makoto、Nagasawa Kazue
    • Journal Title

      Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America

      Volume: 119 Issue: 45 Pages: 209910119-209910119

    • DOI

      10.1073/pnas.2209910119

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  • [Journal Article] Endocytosis-mediated vitellogenin absorption and lipid metabolism in the hindgut-derived placenta of the viviparous teleost Xenotoca eiseni2022

    • Author(s)
      Iida Atsuo、Nomura Jumpei、Yoshida Junki、Suzuki Takayuki、Yokoi Hayato、Hondo Eiichi
    • Journal Title

      Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular and Cell Biology of Lipids

      Volume: 1867 Issue: 9 Pages: 159183-159183

    • DOI

      10.1016/j.bbalip.2022.159183

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  • [Journal Article] Visualization of Sox10‐positive chromatoblasts by GFP fluorescence in flounder larvae and juveniles using electroporation2021

    • Author(s)
      Miyake Minato、Sekine Michiharu、Suzuki Tohru、Yokoi Hayato
    • Journal Title

      Journal of Experimental Zoology Part B: Molecular and Developmental Evolution

      Volume: 336 Issue: 5 Pages: 393-403

    • DOI

      10.1002/jez.b.23045

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  • [Journal Article] Delivery of exogenous proteins into eggs by injection into the mother’s ovary (IMO) in zebrafish2021

    • Author(s)
      岩泉雅樹 横井勇人 鈴木徹
    • Journal Title

      Fish Physiology and Biochemistry

      Volume: - Issue: 4 Pages: 849-855

    • DOI

      10.1007/s10695-021-00945-6

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  • [Presentation] ヒラメの無眼側黒化変異体の原因遺伝子の探索2023

    • Author(s)
      横井勇人、安齋賢、田川正朋
    • Organizer
      日本水産学会春季大会
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  • [Presentation] ササウシノシタHeteromycteris japonica の参照ゲノム配列決定2023

    • Author(s)
      安齋賢、横井勇人、鈴木徹、宇治督
    • Organizer
      日本水産学会春季大会
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    • Author(s)
      Hayato Yokoi, Satoshi Ansai, Masatomo Tagawa
    • Organizer
      The 56th Annual Meeting of the Japanese Society of Developmental Biologists
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    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Flatfish metamorphosis: molecular basis underlying unique morphogenesis leading to asymmetric body plan2022

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      Hayato Yokoi, Qiran Chen, Tohru Suzuki
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    • Invited
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    • Author(s)
      安藤日向、関根通陽、岩泉雅樹、鈴木徹、横井勇人
    • Organizer
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  • [Presentation] 水産軟体動物細胞で機能するウイルスプロモーターの発見2022

    • Author(s)
      Jeongwoong YOON、Wen-Bin GU、小沼瑞、小林睦子、 横井勇人、尾定誠、長澤一衛
    • Organizer
      令和4年度日本水産学会秋季大会
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  • [Presentation] 海産軟体動物由来の初代細胞培養の樹立と二枚貝感染ウイルスプロモーターを用いた遺伝子導入系の確立2022

    • Author(s)
      Jeongwoong YOON、Wen-Bin GU、小沼瑞、小林睦子、横井勇人、尾定誠、長澤一衛
    • Organizer
      第46回日本比較内分泌学会大会及びシンポジウム
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  • [Presentation] Transcriptome approach to understand flatfish metamorphosis2022

    • Author(s)
      ○Hayato Yokoi
    • Organizer
      e-Asia sponsorship workshop: Development and Effective Utilization of Genetic Marker in Non-Experimental Fishes
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    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] ヒラメの色素胞分化に関与する 5 つの gch 遺伝子の比較解析2022

    • Author(s)
      ○木野創太、鈴木徹、横井勇人
    • Organizer
      日本水産学会春季大会
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  • [Presentation] Toward functional analysis in non-model organism, flounder2021

    • Author(s)
      Sekine M, Iwaizumi M, Miyake M, Suzuki T and ○Yokoi H
    • Organizer
      第54回 日本発生生物学会年会
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  • [Presentation] ヒラメの変態とその分子メカニズムを理解したい2021

    • Author(s)
      ○横井 勇人、鈴木 徹
    • Organizer
      日本ベントス学会・日本プランクトン学会合同大会
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    • Invited
  • [Book] 光が彩るヒラメ・カレイ類養殖「第8章 ヒラメにおける左右非対称な色素胞分化とレチノイン酸シグナルによる制御」2022

    • Author(s)
      横井勇人、鈴木徹(編:水澤寛太、中村修)
    • Total Pages
      200
    • Publisher
      恒星社厚生閣
    • ISBN
      9784769916871
    • Related Report
      2022 Research-status Report

URL: 

Published: 2021-04-28   Modified: 2024-12-25  

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