Source-sink switching mechanism in insect galls
Project/Area Number |
21K06234
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 44030:Plant molecular biology and physiology-related
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Research Institution | Kyoto Prefectural University |
Principal Investigator |
武田 征士 京都府立大学, 生命環境科学研究科, 准教授 (90508053)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2021: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
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Keywords | ヨモギ / 虫こぶ / 葉 / 茎 / 維管束パターン / マイクロCTスキャン / AiAGAMOUS / 維管束 / オオヨモギ / MADS |
Outline of Research at the Start |
虫こぶは,虫こぶ形成昆虫がホスト植物に作る,食糧と住まいを兼ねた特殊な組織・器官である.トランスクリプトーム解析から,虫こぶでは光合成をする葉などのソース器官から,花や実の性質をもつシンク器官への転換が起こっていることが示唆されてきた.昆虫によって引き出される,植物の潜在的な器官形成機構を理解するために,虫こぶ形態形成の主要因子だと考えられるMADS遺伝子の機能と発現制御機構,および虫こぶとホスト植物組織を連絡する維管束パターンの確立機構を明らかにする.研究材料は,入手が容易であり,近縁種のゲノム情報や培養手法が利用可能な,草本ホスト植物であるキク科・オオヨモギの虫こぶを用いる.
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Outline of Annual Research Achievements |
令和4年度は、①ヨモギ虫こぶ内での時空間的な遺伝子発現パターンの把握、②虫こぶで高発現するMADS遺伝子(AiAGAMOUS/AiAG)の相互作用因子探索、③マイクロCTスキャンによる虫こぶ形成の詳細な形成機構の解明を試みた。①については、AiAGをクローニングしたベクターからRNAプローブを作成し、虫こぶサンプルについてin situ hybridizationを行ったが、クリアなシグナルは得られなかった。コントロール実験より、手法に間違いが無いことから、虫こぶという特殊なサンプルではin situ hybridizationのシグナルが得にくい可能性が考えられた。切片組織観察から、虫こぶ内細胞が予想に反して高度に液胞化していることが分かり、これが原因のひとつと考えられる。②については、Yeast Two Hybridスクリーニングにむけて、虫こぶ発現遺伝子のライブラリーの作成を何度も試みたが、酵母菌株の生育不良により、ライブラリー作成には至ることができなかった。③については、4種類のヨモギ虫こぶ(葉2種類、茎2種類)のイメージング結果を詳細に観察し、虫こぶ中にある虫室と維管束のつながりに一定パターンがあることが分かった。すなわち、葉にできる2種類(エボシ、ケタマ)では、ホスト植物と虫室の間に細い維管束が新たに形成されているが、茎にできる2種類(クキワタ、クキコブ)では、ホスト植物の維管束上に直接虫室があるようなパターンであった。作られる組織によって、維管束形成やホスト維管束の使い方が異なっていることが示唆され、同じホスト植物での虫こぶ形態の多様性を生みだすメカニズムのひとつとなっていると考えられる。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今までブラックボックスであった、虫こぶとホスト植物の維管束のつながりが明らかになったことで、当初目的を果たしたと言える。さらに、昨年度は難しかったエボシ・クキワタについても、染色法などの工夫により明瞭になり、2年目としては計画以上に進めることができた。一方で、発現解析は組織の構造上の難しさ、相互作用因子探索は酵母菌株あるいは技術的な問題により良い結果が得られておらず、3年目の課題として進める。以上の事から、全体としてはおおむね順調に進展していると判断した。
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Strategy for Future Research Activity |
MADS遺伝子のin situ hybridizationについては、組織の構造上困難であることが分かったため、プロモーター:レポーターアッセイに切り替えて検証する。虫こぶで発現する転写因子の過剰発現株作成を進めており、表現型解析を進める。相互作用因子探索についてはライブラリー構築手法を変更、すなわちMatingから直接導入に切り替えて進める。ヨモギ虫こぶの構造解析、RNA-seqデータについてまとめ、論文投稿する。
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Report
(2 results)
Research Products
(2 results)