| Project/Area Number |
21K06325
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 45030:Biodiversity and systematics-related
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| Research Institution | Fujita Health University |
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Principal Investigator |
塚本 健太郎 藤田医科大学, オープンファシリティセンター, 講師 (00582818)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
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| Keywords | 種を超えた多型 / プロテアソーム / 対立遺伝子 / 免疫プロテアソーム / プロテアソームサブユニット / 二型性 |
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| Outline of Research at the Start |
遺伝的多型には、複数の生物種にまたがって存在する「種を超えた多型 (TSP)」が知られている。硬骨魚類では、免疫プロテアソームサブユニット遺伝子PSMB8がTSPを示すことが明らかになっている。本研究では、PSMB8遺伝子について、脊椎動物の野生個体を用いた多型解析とその多型により生み出されるタンパク質の機能を解析することにより、TSPの進化の仕組みを解明することを目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
哺乳類の免疫プロテアソームを構成するサブユニットのうち、プロテアーゼ活性を有するサブユニットとしてPSMB8, PSMB9, PSMB10の3種類が存在する。硬骨魚類ではさらにPSMB9-like遺伝子とPSMB10-like遺伝子が存在し、アミノ酸配列からプロテアーゼ活性を有するサブユニットをコードすることが示唆されている。そこで、硬骨魚類ニホンメダカの培養細胞において、PSMB9-likeとPSMB10-likeが免疫プロテアソームのサブユニットとして取り込まれているかを検証した。本年度は、PSMB9-like遺伝子とPSMB10-like遺伝子のそれぞれを強制発現する安定細胞株の作成を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本年度では、PSMB9-like遺伝子とPSMB10-like遺伝子のそれぞれを強制発現する安定細胞株から免疫プロテアソームを精製し、PSMB9-likeとPSMB10-likeがサブユニットとして取り込まれているかウエスタンブロットで確認する予定であった。安定細胞株の作成に時間を要したために遅れが生じた。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度、まずウエスタンブロットによりPSMB9-likeとPSMB10-likeがサブユニットとして免疫プロテアソームに取り込まれているかを確認する。さらにニホンメダカの培養細胞から組換えIFN-γにより誘導されたPSMB8を含む免疫プロテアソームを精製し、多種の合成ペプチド基質を用いてPSMB8の二型間の切断特異性を比較する。
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