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免疫グロブリン重鎖アミロイドーシスの簡便な診断法の開発とアミロイド形成機序の解明

Research Project

Project/Area Number 21K06884
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 49020:Human pathology-related
Research InstitutionShinshu University

Principal Investigator

矢崎 正英  信州大学, 学術研究院保健学系, 教授 (70372513)

Project Period (FY) 2021-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywordsアミロイドーシス / AHアミロイドーシス / 免疫グロブリン重鎖 / 重鎖フラグメント / 血清診断マーカー / フラグメント / 重鎖可変領域 / 診断抗体
Outline of Research at the Start

本研究では患者におけるアミロイド蛋白やM蛋白のアミノ酸配列を詳細に解析し、①AHアミロイド蛋白を認識する診断用抗体の開発に挑戦する ②その抗体を用いた免疫ブロット法で、患者血清中にアミロイド原性の遊離重鎖フラグメントを同定し、血清診断マーカーを開発する ③患者における重鎖の断片化機構を検討し、アミロイド線維形成機序を解明する。本研究により本症の診断が簡便に行えるようになり、また重鎖断片化機序の解析から、将来的に疾患特異的治療法の開発につなげたいと考えている。

Outline of Annual Research Achievements

本研究では患者におけるアミロイド蛋白やM蛋白のアミノ酸配列を詳細に解析し、①AHアミロイド蛋白を認識する診断用抗体の開発に挑戦する ②その抗体を用いた免疫ブロット法で、患者血清中にアミロイド原性の遊離重鎖フラグメントを同定し、血清診断マーカーを開発する ③患者における重鎖の断片化機構を検討し、アミロイド線維形成機序を解明する。本研究により本症の診断が簡便に行えるようになり、また重鎖断片化機序の解析から、将来的に疾患特異的治療法の開発につなげたいと考えている。令和3年度は、①について自験例3名のアミロイド蛋白の解析から、過去の免疫グロブリン重鎖配列のdata baseとも比較して、3種類のウサギ抗重鎖可変領域ポリクローナル抗体を作成し、患者と非患者群で免疫組織化学検索を行い、診断抗体としての有効性について検証した。②に関しては令和4-5年にかけて開発抗体を用いて、AHアミロイドーシス患者10名と非AHアミロイドーシス患者48名の血清検体について免疫ブロット解析を行った。AHアミロイドーシス患者では、10名中8名に、約11-15kDの重鎖フラグメントバンドが検出された。非AHアミロイドーシス患者での血清では、一部の患者で淡く陽性バンドが検出された。これらのバンドが非特異的反応か特異的反応か現在、二次元電気泳動法にて解析中である。③に関しては、これまでAHアミロイド蛋白のC末端側が確定できていなかったが、アミロイド蛋白を二次元電気泳動で展開し、そのスポットからLC-MS/MSで全配列を決定できるよう解析を開始した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

令和3年度に感度・特異度として90%以上の抗体を確立でき、令和4-5年度にはこの抗体を用いて免疫ブロット解析を行い、複数のAHアミロイドーシス患者群と非AHアミロイドーシス患者群の血清中の免疫グロブリン重鎖フラグメントの存在を比較検討することができた。アミロイド断片化機構の解明に、アミロイド蛋白の二次元電気泳動による解析を行っており、研究計画を1年間延長した。

Strategy for Future Research Activity

免疫ブロット解析を多数の患者・非患者群で施行し、血清中の重鎖可変領域断片の有無を確認し、断片の血清中の存在濃度を定量化できる系を確立する。非患者群で、淡い非特異的バンドが検出されやすく、現在、二次元電気泳動で患者群とのパターンの差異を検討中である。断片化の機序解明としては、アミロイド蛋白の全配列の決定と、血清M蛋白との比較で、C末端側の断片化部位の決定を検討し断片化機序を明らかにする。

Report

(3 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (42 results)

All 2023 2022 2021

All Journal Article (23 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 23 results,  Open Access: 4 results) Presentation (18 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results,  Invited: 3 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Transthyretin Variant Amyloidosis with a <i>TTR</i> A97D (p.A117D) Mutation Manifesting Remarkable Asymmetric Neuropathy2023

    • Author(s)
      Ikeda Kazuna、Yamamoto Daisuke、Usui Keiko、Takeuchi Hiroki、Oka Nobuyuki、Katoh Nagaaki、Yazaki Masahide、Kametani Fuyuki、Nishino Ichizo、Hisahara Shin
    • Journal Title

      Internal Medicine

      Volume: 62 Issue: 15 Pages: 2261-2266

    • DOI

      10.2169/internalmedicine.0798-22

    • ISSN
      0918-2918, 1349-7235
    • Year and Date
      2023-08-01
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  • [Journal Article] Light and heavy chain deposition disease with focal amyloid deposition diagnosed with mass spectrometry: a case report2023

    • Author(s)
      Shimamoto Yuki、Takahashi Naoki、Katoh Nagaaki、Matsui Yuki、Mochizuki Yusuke、Ito Masanori、Yazaki Masahide、Kametani Fuyuki、Kasuno Kenji、Sekijima Yoshiki、Naiki Hironobu、Iwano Masayuki
    • Journal Title

      BMC Nephrology

      Volume: 24 Issue: 1 Pages: 187-187

    • DOI

      10.1186/s12882-023-03207-0

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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Ocular findings in patients with acquired ATTRv amyloidosis following domino liver transplantation2023

    • Author(s)
      Kitahara Junya、Yoshinaga Tsuneaki、Kakihara Shinji、Hirano Takao、Imai Akira、Miyahara Teruyoshi、Yazaki Masahide、Sekijima Yoshiki、Murata Toshinori
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 18 Issue: 9 Pages: e0291716-e0291716

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0291716

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  • [Journal Article] Renal Function in Aged C57BL/6J Mice Is Impaired by Deposition of Age-Related Apolipoprotein A-II Amyloid Independent of Kidney Aging2023

    • Author(s)
      Li Ying、Dai Jian、Kametani Fuyuki、Yazaki Masahide、Ishigami Akihito、Mori Masayuki、Miyahara Hiroki、Higuchi Keiichi
    • Journal Title

      The American Journal of Pathology

      Volume: - Issue: 6 Pages: 725-739

    • DOI

      10.1016/j.ajpath.2023.03.002

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    • Author(s)
      Kishida Dai、Nakamura Akinori、Yazaki Masahide、Tsuchiya-Suzuki Ayako、Ichikawa Takanori、Shimojima Yasuhiro、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      Modern Rheumatology

      Volume: - Issue: 4 Pages: 784-790

    • DOI

      10.1093/mr/road084

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    • Author(s)
      Takahashi Yusuke、Kodaira Minori、Yamada Mitsunori、Uehara Kai、Ito Kiyoshi、Kaneko Tomoki、Ohashi Hiroki、Yazaki Masahide、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      BMC Neurology

      Volume: 23 Issue: 1

    • DOI

      10.1186/s12883-023-03180-z

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  • [Journal Article] Reversible Leukoencephalopathy in a Man with Childhood-onset Hyperornithinemia-Hyperammonemia-Homocitrullinuria Syndrome2022

    • Author(s)
      Hoshino Yumi、Kodaira Minori、Matsuno Atsuhiro、Kaneko Tomoki、Fukuyama Tetsuhiro、Takano Kyoko、Yazaki Masahide、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      Internal Medicine

      Volume: 61 Issue: 4 Pages: 553-557

    • DOI

      10.2169/internalmedicine.7843-21

    • NAID

      130008159952

    • ISSN
      0918-2918, 1349-7235
    • Year and Date
      2022-02-15
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  • [Journal Article] AH amyloid neuropathy: a novel clinical phenotype confirmed by histopathology and mass spectrometry2022

    • Author(s)
      Ohashi Nobuhiko、Katoh Nagaaki、Kasuga Kazuki、Yoshinaga Tsuneaki、Kametani Fuyuki、Yazaki Masahide、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: - Issue: 2 Pages: 1-2

    • DOI

      10.1080/13506129.2022.2049745

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  • [Journal Article] Macrophages in the reticuloendothelial system inhibit early induction stages of mouse apolipoprotein A-II amyloidosis2022

    • Author(s)
      Miyahara Hiroki、Dai Jian、Li Ying、Cui Xiaoran、Takeuchi Hibiki、Hachiya Naomi、Kametani Fuyuki、Yazaki Masahide、Mori Masayuki、Higuchi Keiichi
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: Epub ahead of print Issue: 2 Pages: 1-14

    • DOI

      10.1080/13506129.2022.2153667

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  • [Journal Article] Adult‐onset Type II Citrullinemia manifested as steatosis or steatohepatitis: a report of three Chinese cases2022

    • Author(s)
      Wang Min、Zhao Xin Yan、Wang Yu、Wang Xiao Ming、Yazaki Masahide、Saheki Takeyori、Jia Ji Dong、Zhang Chun Hua、Ou Xiao Juan、Wang Tai Ling
    • Journal Title

      Journal of Digestive Diseases

      Volume: - Issue: 4 Pages: 240-245

    • DOI

      10.1111/1751-2980.13096

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  • [Journal Article] A case of asymmetric insulin-derived localised amyloid deposition associated with long-acting insulin analog administration2022

    • Author(s)
      Hirai Keiji、Imamura Shigeki、Hirai Aizan、Umemoto Naoka、Oshiro Hisashi、Kametani Fuyuki、Katoh Nagaaki、Yazaki Masahide、Ookawara Susumu、Morishita Yoshiyuki
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: - Issue: 3 Pages: 1-3

    • DOI

      10.1080/13506129.2022.2047019

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    • Author(s)
      Ichimata Shojiro、Hata Yukiko、Katoh Nagaaki、Kametani Fuyuki、Yazaki Masahide、Sekijima Yoshiki、Nishida Naoki
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: - Issue: 2 Pages: 1-2

    • DOI

      10.1080/13506129.2021.2020754

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  • [Journal Article] CSF/plasma levels, transthyretin stabilisation and safety of multiple doses of tolcapone in subjects with hereditary ATTR amyloidosis2022

    • Author(s)
      Takahashi Yusuke、Ohashi Nobuhiko、Takasone Ken、Yoshinaga Tsuneaki、Yazaki Masahide、Roberts Michael、Glidden Paul F.、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: - Issue: 3 Pages: 1-7

    • DOI

      10.1080/13506129.2022.2056011

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  • [Journal Article] Distribution and progression of cerebral amyloid angiopathy in early-onset V30M (p.V50M) hereditary ATTR amyloidosis2022

    • Author(s)
      Takahashi Yusuke、Oguchi Kazuhiro、Mochizuki Yusuke、Takasone Ken、Ezawa Naoki、Matsushima Akira、Katoh Nagaaki、Yazaki Masahide、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: 30 Issue: 1 Pages: 109-118

    • DOI

      10.1080/13506129.2022.2128331

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  • [Journal Article] Saccharopinuria accompanied by hyperammonemia and hypercitrullinemia presented with elderly-onset epilepsy, progressive cognitive decline, and gait ataxia2021

    • Author(s)
      Norioka Ryohei、Tobisawa Shinsuke、Nishigori Ryusei、Kuhara Tomiko、Yazaki Masahide、Nagao Masayoshi、Ohura Toshihiro、Takai Yasuyuki、Funai Asuka、Miyamoto Kazuhito、Kawata Akihiro、Takahashi Kazushi
    • Journal Title

      Intractable & Rare Diseases Research

      Volume: 10 Issue: 2 Pages: 126-130

    • DOI

      10.5582/irdr.2021.01003

    • NAID

      130008047975

    • ISSN
      2186-361X, 2186-3644
    • Year and Date
      2021-05-31
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  • [Journal Article] Late-onset Hereditary ATTR Amyloidosis with a Novel p.P63S (P43S) <i>Transthyretin</i> Variant2021

    • Author(s)
      Aono Yuya、Hamatani Yasuhiro、Katoh Nagaaki、Nakagawa Mayuko、Nakamura Katsuya、Yazaki Masahide、Kametani Fuyuki、Iguchi Moritake、Murakami Ikuko、Ogawa Hisashi、Abe Mitsuru、Akao Masaharu、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      Internal Medicine

      Volume: 60 Issue: 4 Pages: 557-561

    • DOI

      10.2169/internalmedicine.5615-20

    • NAID

      130007986513

    • ISSN
      0918-2918, 1349-7235
    • Year and Date
      2021-02-15
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  • [Journal Article] Absolute quantitative analysis of cardiac amyloidosis using SPECT/CT with 99mTc-pyrophosphate2021

    • Author(s)
      Shin Yanagisawa、Yusuke Takahashi、Jun Sasaki、Ken Takasone、Koji Yoshie、Jun Koyama、Nagaaki Katohi、Masahide Yazaki、Koichiro Kuwahara、Yasunari Fujinaga、Yoshiki Sekijima
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: - Issue: 3 Pages: 1-2

    • DOI

      10.1080/13506129.2021.1903418

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  • [Journal Article] Food Preferences of Patients with Citrin Deficiency2021

    • Author(s)
      Okamoto Miki、Okano Yoshiyuki、Okano Mai、Yazaki Masahide、Inui Ayano、Ohura Toshihiro、Murayama Kei、Watanabe Yoriko、Tokuhara Daisuke、Takeshima Yasuhiro
    • Journal Title

      Nutrients

      Volume: 13 Issue: 9 Pages: 3123-3123

    • DOI

      10.3390/nu13093123

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  • [Journal Article] Localized intestinal AL amyloidosis detected as bright green using autofluorescence endoscopy2021

    • Author(s)
      Kuroha Masatake、Yoshinaga Tsuneaki、Yazaki Masahide、Fujishima Fumiyoshi、Handa Tomoyuki、Suzuki Kaoru、Hishinuma Kasumi、Masu Yutaro、Shimoyama Yusuke、Naito Takeo、Moroi Rintaro、Kanazawa Yoshitake、Shiga Hisashi、Kakuta Yoichi、Masamune Atsushi
    • Journal Title

      Clinical Journal of Gastroenterology

      Volume: 14 Issue: 3 Pages: 815-819

    • DOI

      10.1007/s12328-021-01378-7

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    • Author(s)
      Nakagawa Mayuko、Yazaki Masahide、Kametani Fuyuki、Katoh Nagaaki、Yoshinaga Tsuneaki、Higuchi Keiichi、Sekijima Yoshiki
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      Pathology International

      Volume: 71 Issue: 4 Pages: 245-254

    • DOI

      10.1111/pin.13081

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    • Author(s)
      Okano Yoshiyuki、Okamoto Miki、Yazaki Masahide、Inui Ayano、Ohura Toshihiro、Murayama Kei、Watanabe Yoriko、Tokuhara Daisuke、Takeshima Yasuhiro
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      Molecular Genetics and Metabolism

      Volume: 133 Issue: 1 Pages: 63-70

    • DOI

      10.1016/j.ymgme.2021.03.004

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      Sagawa Takaomi、Kogiso Tomomi、Ito Taito、Yasuda Hideo、Katoh Nagaaki、Yoshinaga Tsuneaki、Yazaki Masahide、Kato Takaaki、Omori Akiko、Kotera Yoshihito、Egawa Hiroto、Yamamoto Masakazu、Tokushige Katsutoshi
    • Journal Title

      Transplantation Proceedings

      Volume: 53 Issue: 4 Pages: 1327-1332

    • DOI

      10.1016/j.transproceed.2020.11.012

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      Ichimata Shojiro、Katoh Nagaaki、Abe Ryuta、Yoshinaga Tsuneaki、Kametani Fuyuki、Yazaki Masahide、Kusama Yukiko、Sano Kenji、Uehara Takeshi、Sekijima Yoshiki
    • Journal Title

      Amyloid

      Volume: 29 Issue: 1 Pages: 64-65

    • DOI

      10.1080/13506129.2021.1979513

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  • [Presentation] Siblings with a novel type of amyloid neuropathy, hereditary Abeta2M amyloid neuropathy: Report of the second family in the world2022

    • Author(s)
      Katoh N, Yoshinaga T, Yazaki M, Kusaba T, Yamano T, Miyagawa-Hayashino A, Sekijima Y
    • Organizer
      XVIII. International Symposium on Amyloidosis
    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Clinical characteristics of CTLN2 patients and therapeutic experiences.2022

    • Author(s)
      Yazaki M
    • Organizer
      International Conference on Ureagenesis Defects and Allied Conditions 2022. Novel models and treatment options
    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 十二指腸神経内分泌腫瘍(NET)に伴うAIAPP(アミリン)アミロイドーシス:免疫組織化学的検索と沈着アミロイド蛋白の生化学的特徴について2022

    • Author(s)
      判田勇介、田河響、望月祐介、山本和樹、加藤修明、亀谷富由樹、関島良樹、矢﨑正英
    • Organizer
      第9回日本アミロイドーシス学会学術集会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 新規神経内分泌腫瘍関連アミロイドーシスにおける組織沈着アミロイド蛋白の生化学的病態解析2022

    • Author(s)
      田河響、判田勇介、望月祐介、加藤修明、一萬田正二郎、亀谷富由樹、関島良樹、矢﨑正英
    • Organizer
      第9回日本アミロイドーシス学会学術集会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 遺伝性ATTRアミロイドーシス患者における難治性下痢に対するコレスチミドの有効性・安全性2022

    • Author(s)
      望月祐介、加藤修明、矢﨑正英、中川沙織、関島良樹
    • Organizer
      第9回日本アミロイドーシス学会学術集会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] ATTR型脳アミロイドアンギオパチーの臨床的特徴およびアミロイド沈着の分布と進展2022

    • Author(s)
      高橋佑介、小口和浩、望月祐介、高曽根健、江澤直樹、松嶋聡、加藤修明、矢﨑正英、関島良樹
    • Organizer
      第9回日本アミロイドーシス学会学術集会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] AHアミロイドーシスの簡便な診断法の確立―診断用抗免疫グロブリン重鎖抗体の開発への挑戦2021

    • Author(s)
      矢﨑正英、中川真優子、加藤修明、関島良樹、亀谷富由樹
    • Organizer
      第8回日本アミロイドーシス学会学術集会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 世界3家系目となる遺伝性Ab2Mアミロイドーシスの兄弟例2021

    • Author(s)
      加藤修明、吉長恒明、矢﨑正英、草場哲郎、山野哲弘、宮川文、関島良樹
    • Organizer
      第8回日本アミロイドーシス学会学術集会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 重鎖型アミロイドーシスの新たな診断法の確立―診断用抗免疫グロブリン重鎖抗体の開発2021

    • Author(s)
      矢﨑正英、中川真優子、加藤修明、関島良樹、亀谷富由樹
    • Organizer
      第50回日本心脈管作動物質学会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 肝移植後ATTRvアミロイドーシス患者におけるこれまでの治療経験と今後の展望2021

    • Author(s)
      矢﨑正英
    • Organizer
      第8回日本アミロイドーシス学会学術集会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Invited
  • [Book] 腎2022

    • Author(s)
      矢﨑正英(分担執筆)
    • Total Pages
      436
    • Publisher
      文光堂
    • ISBN
      9784830604881
    • Related Report
      2022 Research-status Report

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Published: 2021-04-28   Modified: 2024-12-25  

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