Reveling the intra-cellular replication machinery of Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus by using live-cell imaging.
Project/Area Number |
21K07059
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 49060:Virology-related
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Research Institution | Nagasaki University |
Principal Investigator |
高松 由基 長崎大学, 熱帯医学研究所, 准教授 (00750407)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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Keywords | SFTSV / RNP形成 / RNP輸送 / NPモチーフ / 転写・複製 / ウイルス様粒子 / 細胞内動態 / ウイルス粒子形成 / ライブセルイメージング / 重症熱性血小板減少症候群 / RNP / リバースジェネティクス / live-cell imaging / intra-cellular dynamics / replication |
Outline of Research at the Start |
ライブセルイメージング技術は病原体の細胞内複製機構を理解するために非常に有用である。本研究では本邦で重要な高病原性ウイルスであるSFTSVの複製機構を、ライブセルイメージングで解明する。SFTSVの細胞内動態はほとんどわかっておらず、移動に関わる宿主因子も不明である。病原体の細胞内動態を解明することは、侵入経路・輸送経路や介在タンパク質、出芽制御因子を介した治療法を開発するための基盤となることが期待される。 本研究では、SFTSVのライブイメージングシステムを構築し、SFTSVの細胞内動態について、宿主因子を含めて解明することで、新たな作用機序の治療薬開発に貢献することを目指す。
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Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、五つの到達目標を定めて、「SFTSVの細胞内複製機構を制御する新しい治療薬開発の基盤を構築する」ことを目指した。本研究では細胞内動態を評価するライブセルイメージングシステム、転写・複製を評価するミニゲノムアッセイ系、ウイルス粒子形成・出芽を評価するウイルス様粒子系を構築することで、ウイルスの分子機能解析を行う基盤を整えた。またリボヌクレオプロテイン複合体(RNP)のコアを形成するヌクレオプロテイン(NP)については、機能的ドメインの報告は限られており、RNPの形成及び他のウイルスタンパク質との相互作用に関わる領域は同定されていなかった。そこでNP変異体を構築し、各種アッセイ系で変異体の機能解析を行った。 三年間のプロジェクトで、本年は最終年であった。初年度に到達目標1:感染細胞におけるRNPおよびウイルス粒子の細胞内動態をライブセルイメージング顕微鏡で明らかにする、および到達目標2: RNPやウイルス粒子の細胞内輸送における分子機構を明らかにするための非感染性のライブセルイメージングシステムを構築する、を達成した。これにより、SFTSV感染細胞におけるウイルス粒子の動きを制御するタンパク質が表面抗原タンパク質GPであり、NPはGPと共輸送されることがわかった。2年目は、NPタンパク質のペプチドモチーフに着目し、転写・複製を制御するアミノ酸領域を同定した。さらに同定したNPペプチドモチーフについて、相互作用する宿主因子の機能解析を進めた(到達目標4:ウイルスRNP形成および輸送を介在する宿主細胞因子を同定する)。3年目は、到達目標3 :リバースジェネティクスを用いて組換えウイルスを構築する、および、到達目標5:RNPおよびRNP様構造を精製し微細構造解析を行う、を進めた。以上を通して、ウイルスの複製機構を解明し特異的な治療薬を開発するための基盤を構築した。
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Report
(3 results)
Research Products
(52 results)
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[Journal Article] Role of pre-existing immunity in driving the dengue virus serotype 2 genotype shift in the Philippines: A retrospective analysis of serological data2024
Author(s)
Balingit JC, Dimamay MPS, Suzuki R, Matsuda M, Xayavong D, Ngwe Tun MM, Matias RR, Natividad FF, Moi ML, Takamatsu Y, Culleton R, Buerano CC, Morita K.
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Journal Title
Int J Infect Dis.
Volume: 139
Pages: 59-68
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Clinical factors associated with SFTS diagnosis and severity in cats2024
Author(s)
Hiromu Osako, Qiang Xu, Takeshi Nabeshima, Jean Claude Balingit, Khine Mya Nwe, Fuxun Yu, Shingo Inoue, Daisuke Hayasaka, Mya Myat Ngwe Tun, Kouichi Morita, Yuki Takamatsu
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Journal Title
bioRxiv
Volume: March 12, 2024
Pages: 1-51
DOI
Related Report
Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] A Novel, Comprehensive A129 Mouse Model for Investigating Dengue Vaccines and Evaluating Pathogenesis2023
Author(s)
Ngwe Tun MM, Nwe KM, Balingit JC, Takamatsu Y, Inoue S, Pandey BD, Urano T, Kohara M, Tsukiyama-Kohara K, Morita K
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Journal Title
Vaccines (Basel)
Volume: 11(12):1857
Issue: 12
Pages: 59-68
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Serological and Molecular Epidemiology of Chikungunya Virus Infection in Vietnam, 2017-20192023
Author(s)
Nguyen TV, Ngwe Tun MM, Cao MT, Dao HM, Luong CQ, Huynh TKL, Nguyen TTT, Hoang TND, Morita K, Le TQM, Pham QD, Takamatsu Y, Hasebe F.
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Journal Title
Viruses
Volume: 15(10):2065
Issue: 10
Pages: 1-19
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Clinical, Virological, and Immunological Features in Cosmopolitan Genotype DENV-2-Infected Patients during a Large Dengue Outbreak in Sri Lanka in 20172023
Author(s)
Nwe KM, Ngwe Tun MM, Muthugala R, Nabeshima T, Balingit JC, Rajamanthri L, Jayawardana D, Attanayake S, Inoue S, Takamatsu Y, Urano T, Morita K.
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Journal Title
Am J Trop Med Hyg.
Volume: 109(4)
Issue: 4
Pages: 917-925
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Burden of Chikungunya Virus Infection during an Outbreak in Myanmar2023
Author(s)
Ngwe Tun MM, Kyaw AK, Nwe KM, Myaing SS, Win YT, Inoue S, Takamatsu Y, Urano T, Thu HM, Hmone SW, Thant KZ, Morita K
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Journal Title
Viruses
Volume: 15(8):1734
Issue: 8
Pages: 1-11
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Coinfection and circulation of chikungunya virus and dengue virus in pediatric patients in Myanmar, 20192023
Author(s)
Ngwe Tun MM, Kyaw AK, Nabeshima T, Dumre SP, Soe AM, Nwe KM, Myaing SS, Lwin EP, Win YT, Inoue S, Takamatsu Y, Urano T, Thu HM, Thant KZ, Htun ZT, Morita K
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Journal Title
Microbes Infect.
Volume: 25(6):105129
Issue: 6
Pages: 1-9
DOI
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Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] CP100356 Hydrochloride, a P-Glycoprotein Inhibitor, Inhibits Lassa Virus Entry: Implication of a Candidate Pan-Mammarenavirus Entry Inhibitor2021
Author(s)
Takenaga T, Zhang Z, Muramoto Y, Fehling SK, Hirabayashi A, Takamatsu Y, Kajikawa J, Miyamoto S, Nakano M, Urata S, Groseth A, Strecker T, Noda T.
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Journal Title
Viruses
Volume: 13
Issue: 9
Pages: 1763-1763
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Development of an RT-LAMP Assay for the Rapid Detection of SFTS Virus.2021
Author(s)
Shiori Sano, Shutetsu Fukushi, Souichi Yamada, Shizuko Harada, Hitomi Kinoshita, Satoko Sugimoto, Tomoki Yoshikawa, Takeshi Kurosu, Yuki Takamatsu, Masayuki Shimojima, Shoichi Toda, Yuka Hamada, Naoki Fujisawa, Takayuki Sugimoto, Masayuki Saijo.
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Journal Title
Viruses
Volume: 13(4)
Issue: 4
Pages: 1-11
DOI
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Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Presentation] Coinfection and circulation of chikungunya virus and dengue virus in pediatric patients in Myanmar, 20192023
Author(s)
Mya Myat Ngwe Tun, Aung Kyaw Kyaw, Takeshi Nabeshima, Shyam Prakash Dumre, Aung Min Soe, Khine Mya Nwe, Su Su Myaing, Ei Phyu Lwin, Ye Thu Win, Shingo Inoue, Yuki Takamatsu, Takeshi Urano, Hlaing Myat Thu, Kyaw Zin Thant, Zaw Than Htun, Kouichi Morita
Organizer
第70回日本ウイルス学会学術集会
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[Presentation] Insights on the mechanism of dengue virus serotype 2 genotype shift in the Philippines2023
Author(s)
Jean Claude Balingit, Mark Pierre Dimamay, Ryosuke Suzuki, Mami Matsuda, Dalouny Xayavong, Mya Myat Ngwe Tun, Ronald Matias, Filipinas Natividad, Richard Culleton, Meng Ling Moi, Yuki Takamatsu, Corazon Buerano, Kouichi Morita
Organizer
第70回日本ウイルス学会学術集会
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[Presentation] Characterization of cross-reactive peptides with SARS-CoV-2 VOCs in Vietnam before COVID-19 pandemic.2023
Author(s)
Ngan Thi Thanh Nguyen, Linh Ngoc Nguyen, Hau Thi Bich Vu, Thuy Thi Thu Nguyen, Thanh Thi Le, Phuong Vu Mai Hoang, Hang Le Khanh Nguyen, Anh Duc Dang, Mai Thi Quynh Le, Meng Ling Moi, Yuki Takamatsu, Hasebe Futoshi, Morita Kouichi
Organizer
第70回日本ウイルス学会学術集会
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[Presentation] Chikungunya virus infection in blood donors and patients during outbreak, Mandalay, Myanmar, 2019.2022
Author(s)
Mya Myat Ngwe Tun, Aung Kyaw Kyaw, Takeshi Nabeshima, Khine Mya Nwe, shingo Inoue, Basu Dev Pandey, Yuki Takamatsu, Kyaw Zin Thant, Kouichi Morita
Organizer
第56回日本脳炎ウイルス生態学研究会
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[Presentation] オートファジー誘導によるリンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス感染細胞の細胞死回避2021
Author(s)
梶川 純一, 平林 愛, 宮本 翔, 高松 由基, 胡 上帆, 野澤 孝志, 中川 一路, 浦田 秀造, 安田 二朗, 遊佐 宏介, 中野 雅博, 村本裕紀子, 野田 岳志
Organizer
第68回日本ウイルス学会学術集会
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[Presentation] エストロゲン受容体作動薬はラッサウイルスの細胞侵入を阻害する2021
Author(s)
張 子涵, 武長 徹, 村本 裕紀子, Katharina Fehling Sarah, 平林 愛, 髙松 由基, 梶川 純一, 宮本 翔, 中野 雅博, 浦田 秀造, Groseth Allison、Strecker Thomas, 野田 岳志
Organizer
第68回日本ウイルス学会学術集会
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