| Project/Area Number |
21K07220
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 50020:Tumor diagnostics and therapeutics-related
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
田中 謙太郎 九州大学, 医学研究院, 准教授 (00536849)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
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| Keywords | EGFR遺伝子変異陽性肺癌 / Hippo-YAP経路 / Serum deprivation / Apoptosis / MOB1 / YAP / EGFR変異陽性肺癌 / Hippo / Hippo経路 / 分子標的薬 / LATS |
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| Outline of Research at the Start |
1) EGFR遺伝子変異陽性肺癌におけるLATS発現と予後/患者背景相関の検討
2) EGFR遺伝子変異陽性肺癌細胞株におけるMOB1及びLATSの発現量及び結合、及び細胞内におけるYAP局在の検討
3) MOB1強制発現がEGFR遺伝子変異陽性肺癌細胞株の増殖能、移動能及び薬剤感受性に与える影響の検討
4) 網羅的遺伝子解析法を用いた、MOB1発現によりEGFR遺伝子変異陽性肺癌に特異的に誘導される転写因子の同定と、EGFR-TKI耐性化克服の検討
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| Outline of Annual Research Achievements |
EGFR野生型及び変異型肺癌細胞株を用いて、Hippo-YAPシグナル分子のタンパク発現レベルを網羅的に評価したところ、EGFR変異型細胞株ではYAP発現量が多い傾向にあった。次に代表的な増殖刺激であるEGF刺激下のYAP活性化を評価したところ、EGFR変異細胞株でYAPリン酸化の有意な低下が観察される一方、野生型ではYAPのリン酸化はむしろ増強した。
EGFR変異型肺癌細胞株では、EGF刺激下におけるYAPの過剰な活性化が認められたことから、野生型及び変異型EGFR過剰発現非小細胞肺癌細胞株を樹立し、Hippo-YAP経路の動態や細胞の増殖能を評価した。有血清条件下では、YAPの蛋白発現量と細胞増殖にEGFR変異型と野生型で差が認められなかったが、無血清条件を誘導するとEGFR変異型でのみYAPの蛋白発現が増加し、EGF刺激によるYAP活性化が認められた。加えて無血清条件下のEGF刺激により、EGFR野生型細胞株ではアポトーシスによる細胞死が生じたが、EGFR変異型細胞株はアポトーシス耐性であり、抗アポトーシス関連タンパクの発現が上昇した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度前半での論文投稿、及び公開を予定しており、３年での研究完了と結果の発表が十分見込める状態である。
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| Strategy for Future Research Activity |
siYAPの導入により、EGFR変異型細胞株で認められた無血清下EGF刺激によるアポトーシスへの耐性が消失するかフローサイトメトリーにて評価するとともに、抗アポトーシス関連たんぱく質の消失も評価する。次にこれらアポトーシス関連タンパクの誘導に影響するシグナルについて、EGF刺激下に存在するSTAT1/3, MAPK, PI3Kのシグナル解析を実施し同定する。最後に同シグナル経路下流の転写因子が、抗アポトーシス関連タンパクのプロモーター領域に結合するか、クロマチン免疫沈降法を用いて評価する。
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