形質細胞様樹状細胞の免疫寛容原性に基づくがん免疫抑制機構の解明

Research Project

Project/Area Number	21K07245
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 50020:Tumor diagnostics and therapeutics-related
Research Institution	University of Miyazaki
Principal Investigator	高木秀明宮崎大学, 医学部, 客員研究員 (10719628)
Project Period (FY)	2021-04-01 – 2024-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000) Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Keywords	形質細胞様樹状細胞 / がん免疫応答 / がん免疫 / がん微小環境 / がん免疫抑制機構
Outline of Research at the Start	本研究では、野生型（WT）マウス、Siglec-H欠損マウス、pDCs特異的消失マウスへ卵白アルブミン（OVA）発現組換えマウス悪性黒色腫細胞株（B16-OVA）を背部に移植する担がんマウスモデルを用いて「がん環境下でのpDCsの機能特性」ならびに「pDCsのSiglec-Hを介するがん免疫応答制御」を明らかにする。さらに、同モデルに対する抗Siglec-H機能阻害抗体のがん進展制御効果と作用機序について明らかにする。
Outline of Annual Research Achievements	本年度では、1.「がん環境下でのpDCsの機能特性」について、1-1) 担がん状態でのpDC動態を解析した結果、所属リンパ節やがん組織においてpDCsが検出された。1-2）細胞表面分子発現を解析した結果、所属リンパ節やがん組織においてpDCsの細胞表面分子（MHC分子、共刺激分子[CD40、CD80、CD86、B7-H1、B7-DC、B7-H2]、CD11c、Siglec-H、BST2の発現が認められた。1-3) サイトカイン産生能を解析した結果、所属リンパ節やがん組織においてpDCsの　TLR7リガンド（Imiquimod; IMQ）やTLR9リガンド（CpG DNA）刺激によるサイトカイン産生（IFN-a/b、IL-6、IL-12、IL-10、TGF-b）が認められた。1-4) RA産生能を解析した結果、所属リンパ節やがん組織においてpDCsのRA産生酵素であるRALDH2 (retinal dehydrogenase 2)の遺伝子発現とALDH（aldehyde dehydrogenase）活性が認められた。1-5) T細胞分化誘導能を解析した結果、所属リンパ節やがん組織においてpDCsのTLRリガンド（IMQ、CpG DNA）やTGF-b/RAの存在下/非存在下でのOVAを抗原とした共培養によるOT-II CD4+Foxp3EGFP-T細胞からのIFN-g産生TH1細胞、IL-17産生TH17細胞、Foxp3EGFP+Treg細胞の生成が認められた。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 1: Research has progressed more than it was originally planned. Reason 研究計画書に提案した年度計画以上に進捗している。
Strategy for Future Research Activity	次年度では、2.「pDCsのSiglec-Hを介するがん免疫応答制御」について、担がん野生型マウスを対照として、担がんSiglec-H欠損マウス/pDCs特異的消失マウスのがん特異的T細胞応答、がん組織浸潤免疫細胞制御効果、がん進展制御効果を解明する。また、担がん野生型マウスの抗体非投与群やコントロール抗体投与群を対照として、抗Siglec-H機能阻害抗体投与群のがん特異的T細胞応答、がん組織浸潤免疫細胞制御果、がん進展制御効果を明らかにする。具体的には2-1) がん特異的T細胞分裂誘導能、2-2) がん特異的細胞傷害性T細胞（CTL）誘導能、2-3）がん特異的Treg細胞誘導能、2-4) がん組織浸潤免疫細胞制御効果、2-5) 抗がん進展効果を検討する。