脳梗塞の病態進行における卵巣ホルモン-細胞免疫相互作用の役割
Project/Area Number |
21K07306
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 51030:Pathophysiologic neuroscience-related
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Research Institution | Kobe Pharmaceutical University |
Principal Investigator |
長谷川 潤 神戸薬科大学, 薬学部, 教授 (10332230)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
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Keywords | 脳梗塞 / ミクログリア / アストロサイト / エストラジオール / 卵巣 / 卵巣ホルモン / 細胞性免疫 / 生体ストレス |
Outline of Research at the Start |
脳梗塞の発症において卵巣ホルモンは予防的に働くことが知られている。一方、脳梗塞発症後の病態進行に対する卵巣ホルモンの働きには未知な点が多い。本研究では、マウス光血栓性脳梗塞モデルを用いて、脳梗塞発症後の病態進行に対する卵巣ホルモンの役割について検討する。加えて、この卵巣ホルモンの作用が免疫系の制御を介しているのか、加齢やメンタルストレスなどにより影響を受けるのかを検討する。これらの解析により、高齢女性が脳梗塞を発症した際の病態進行を左右する生物学的因子を明らかにする。
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Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、発症後の脳梗塞の病態進行に、卵巣ホルモン及び細胞性免疫がどのように関与するか、またホルモン療法が脳梗塞の予後を左右するかを明らかにすることを目的としている。 2022年度は、卵巣摘出を施した雌マウスに光血栓性脳梗塞モデルを作製し、その後7日目までエストラジオール(E2)又は溶媒を投与することで、雌マウスにおけるエストラジオールの効果を検討した。その結果、E2投与マウスではミクログリアの活性化が抑制された一方、アストロサイトの反応性が上昇していることが分かった。我々はこれまでに、光血栓性脳梗塞モデルにおいては、ミクログリアの活性とアストロサイトの反応性が逆相関することを見出しており(Kondo et al., 2022)、本結果も同様の結果を示していた。一方、光血栓性脳梗塞モデルを作製した雄マウスにE2を投与し、7日後の脳梗塞部位の状態を観察したところ、卵巣摘出雌マウスほどE2の顕著な効果は認められなかった。このことからE2の効果は卵巣ホルモン以外の性差因子により影響を受けることが分かった。卵巣摘出雌マウスの脳梗塞部位から抽出したRNAを試料としてRT-PCR法を用いたcandidate screeningを行い、E2が発現に影響する分泌因子の同定を行ったところ、いくつかの炎症性サイトカイン類が候補因子として見つかった。現在、雄マウスからのRNAを用いて検証を行い、E2による脳梗塞部位炎症反応抑制に関与すると考えられるサイトカインの確定を試みているところである。 細胞性免疫については、脳梗塞作製後7日目、14日目の組織切片を、抗CD3,CD4,CD8抗体を用いた免疫染色を行ったが、脳梗塞部位には明確なシグナルは観察されなかった。従って、光血栓性脳梗塞モデルにおける脳炎症には、T細胞の関与は薄いと考えている。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
卵巣摘出雌マウス及び雄マウスにE2を投与したマウスでの、脳梗塞部位のグリア細胞に関わる知見を得て、比較することが出来た。また、E2の効果を仲介する可能性がある分泌因子の候補も同定できている。さらに、当初の想定とは異なっていたが、光血栓性脳梗塞モデルにおいては、病態進行にT細胞が関与しないこともほぼ確定できた。 これらのことから研究は概ね順調に進んでおり、最終年度に向け十分な予備的知見を得ることが出来たと考えている。
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Strategy for Future Research Activity |
(1)E2の効果を仲介する可能性がある分泌因子の候補が同定できているので、それらの検証を行う。またそれらの分泌因子がどの細胞種により産生されるのかを明らかにする。 (2)卵巣ホルモンとしてはE2に加えてプロゲステロン(P4)も重要な生理機能を担っている。そこで、P4単独及びE2とP4の同時投与が脳梗塞の病態進行をどのように左右するかを、これまでと同様の研究手法により検証する。 (3)光血栓性脳梗塞モデルの病態進行においては、T細胞の関与は薄いことが分かったが、一方で胸腺や脾臓に対しての影響は観察される。そこで、脳梗塞を発症した後の胸腺や脾臓の組織的な変化及びそれらに対するE2及びP4の影響を明らかにする。
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Report
(2 results)
Research Products
(5 results)