Impact of cysteine modifications of apolipoprotein E on the remnant lipoprotein metabolism
| Project/Area Number |
21K07310
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 52010:General internal medicine-related
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
山内 一由 信州大学, 学術研究院保健学系, 教授 (70419414)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | apoE / LRP1 / Cys基 / レドックス状態 / リポ蛋白代謝 / apo E / Cys-thiol 基 / レドックス変化 / ヒト繊維芽細胞 / 蛍光標識エマルジョン / Syndecan-1 / レムナントリポ蛋白 / LPL / LRP-1 / 動脈硬化 / リポ蛋白リパーゼ / ヘパラン硫酸プロテオグリカン / LDL受容体関連蛋白 / 動脈硬化症 |
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| Outline of Research at the Start |
apoEは脂質代謝を担う血漿蛋白であり、動脈硬化症やアルツハイマー病の発症と病変形成に関与していることが知られているが、そのメカニズムは不明である．申請者は、これらの疾患の主な原因である酸化ストレスがapoEの機能にどのような影響を及ぼすのかを明らかにすることが病態メカニズムの解明に繋がると考えている．そこで本研究では、動脈硬化を惹起する異常リポ蛋白の主要代謝経路であるとともに脳神経組織の脂質代謝も担いアルツハイマー病の発症に関与するLDL受容体関連蛋白/ヘパラン硫酸プロテオグリカン経路に対して、酸化ストレスを受けたapoEがどのような挙動を呈するのかを培養細胞を用いた実験系等で解析する．
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| Outline of Annual Research Achievements |
apoEにはE2(Cys112/158)、E3(Cys112,Arg158)、E4(Arg112/158)の３アイソフォームが存在し、アルツハイマー病(AD)など様々な疾患の罹患性に差を生じさせているがその機序は不明である。apoE含有リポ蛋白(apoE-LP)の代謝を担うLRP1 はADの発症にも関与していることからapoEアイソフォームを識別していると考えられるがその詳細は不明である。また、Cys基の酸化修飾はタンパク質の機能に変化をもたらすが、apoEへの影響については不明である。本研究では、レドックス修飾した各apoEアイソフォームを蛍光標識エマルジョンと反応させて作製した疑似LPをヒト線維芽細胞 (LRP1+/LDLR-)の培養液中に添加し、LRP1との結合性とクリアランス/異化能を評価し、LRP1とapoEとの相互作用に及ぼすapoEアイソフォームおよびCys基のレドックス修飾の影響について検討した。その結果、1）LRP1との結合性は E3＞E4＞E2、クリアランス能/異化能はE3≒E2＞E4とアイソフォーム間で有意な違いが認められた。2）Cys基の還元はE3の結合性を増強しクリアランス/異化能を減弱させたが、E2では影響が認められなかった。3）ジスルフィド結合形成はE3の結合性を増強したが、E2では影響が認められなかった。4）ジスルフィド結合を介したapoAIIとの複合体形成によりE2の結合性は減弱し、クリアランス/異化能は増強したが、E3では影響が認められなかった。5）E4にはいずれのレドックス処理も影響しなかった。以上の結果より、LRP1を介したapoE-LP代謝はapoE分子におけるCys基の有無とCys基のレドックス状態の影響を受けて調節されており、Cys基をもたないE4ではその調節機構が本質的に欠落していると考えられた。
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Report
(3 results)
Research Products
(13 results)
