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Development of clinical test using new amino acid coloring method

Research Project

Project/Area Number 21K07394
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 52010:General internal medicine-related
Research InstitutionKagawa Prefectural College of Health Sciences

Principal Investigator

Tokuhara Yasunori  香川県立保健医療大学, 保健医療学部, 准教授 (60746329)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 小原 一朗  徳島文理大学, 薬学部, 講師 (60581775)
Project Period (FY) 2021-04-01 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Keywordsアミノ酸 / 次亜塩素酸ナトリウム五水和物 / 吸光度 / トリプトファン / ホモゲンチジン酸 / 質量分析 / 生化学自動分析装置 / アスコルビン酸 / 臨床検査法 / 亜硝酸 / アンモニア
Outline of Research at the Start

アミノ酸代謝異常症には重篤な症状を引き起こす疾患が多いが,尿中アミノ酸を簡易・迅速に測定する臨床検査法は確立されていない.このような状況の中,申請者は種々のアミノ酸を青緑色に発色させる新たな方法を見出した.本研究の目的は,尿中アミノ酸を測定する新規臨床検査法を確立する事である.本研究では,以下の2点を検証する.
① アミノ酸が発色する至適条件と発色機構を解明する.
② 生化学自動分析装置により尿中アミノ酸濃度を測定する.
以上の結果より,尿中アミノ酸濃度の臨床検査が可能となるため,アミノ酸の代謝異常を示す様々な疾患の早期発見・治療へと繋がる検査項目としての利用が期待できる.

Outline of Final Research Achievements

This study aims to develop a novel colorimetric method for amino acids and apply it to clinical tests for measuring amino acids in biological samples. During the research period (2021-2023), we focused on developing a new detection method for tryptophan, one of the essential amino acids, and conducted research on the detection of amino acid intermediates (homogentisic acid) using electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS).

Throughout the entire research period, the principal investigator (Yasunori Tokuhara) published three papers as the corresponding author and made six presentations at domestic conferences. Furthermore, in 2023, the principal investigator was awarded the Outstanding Young Investigator Award of the Japan Society of Clinical Chemistry (JSCC). These research results on new methods for detecting amino acids and their metabolites were presented both domestically and internationally.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

①トリプトファンは必須アミノ酸の一つであり、肝疾患や精神疾患等で体内濃度が変化するため、体内動態を観察することが重要である。希塩酸や次亜塩素酸ナトリウム五水和物等を用いてトリプトファンを赤褐色に発色させる我々の方法は、生体試料中のトリプトファン濃度を定量する簡易・迅速な臨床検査法の開発に有用である。
②ホモゲンチジン酸は、アミノ酸であるフェニルアラニンやチロシンの中間代謝産物であり、アルカプトン尿症患者の尿中に大量に排出される物質である。微量物質を検出できるエレクトロスプレーイオン化質量分析法(ESI-MS)を用いてホモゲンチジン酸を測定することは、アルカプトン尿症患者の発見に有用である。

Report

(4 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2023 2022

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 2 results) Presentation (6 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Detection of homogentisic acid by electrospray ionization mass spectrometry2023

    • Author(s)
      Tokuhara Yasunori、Ohara Kazuaki、Morinishi Tatsuya、Yamaguchi Kentaro、Tada Satoshi
    • Journal Title

      Journal of Clinical Laboratory Analysis

      Volume: 37 Issue: 21-22

    • DOI

      10.1002/jcla.24976

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] A spectrophotometric method for the determination of tryptophan following oxidation by the addition of sodium hypochlorite pentahydrate2023

    • Author(s)
      Hosokawa Sho、Morinishi Tatsuya、Ohara Kazuaki、Yamaguchi Kentaro、Tada Satoshi、Tokuhara Yasunori
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 18 Issue: 1 Pages: e0279547-e0279547

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0279547

    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Absorption and Mass Spectrometry Measurements of Aqueous Ammonia after the Addition of Phenol and Sodium Hypochlorite Pentahydrate2022

    • Author(s)
      Yasunori Tokuhara, Tatsuya Morinishi, Yasuhiko Ota, Satoshi Tada
    • Journal Title

      Journal of Kagawa Prefectural University of Health Sciences

      Volume: 13 Pages: 45-49

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 次亜塩素酸ナトリウム五水和物を用いた トリプトファンの新規発色法に関する基礎的検討2023

    • Author(s)
      村川晴香,今治留菜,徳原康哲
    • Organizer
      第17回生物試料分析科学会中国四国支部学術集会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 論文投稿の経験から会誌の在り方を考える~若手研究者の視点から~2023

    • Author(s)
      徳原康哲
    • Organizer
      第70回日本臨床検査医学会学術集会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 次亜塩素酸ナトリウム五水和物を用いたアンモニア発色法の基礎的検討2023

    • Author(s)
      徳原康哲,多田達史
    • Organizer
      第33回日本臨床化学会四国支部例会・総会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
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    • Author(s)
      徳原康哲,森西起也,宿谷賢一,多田達史
    • Organizer
      第71回日本医学検査学会
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  • [Presentation] 亜硝酸塩検査の新たな陰性化要因に関する基礎的検討2022

    • Author(s)
      有田小夏,久保春華,徳原康哲
    • Organizer
      第16回生物試料分析科学会中国四国支部学術集会
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  • [Presentation] 新規トリプトファン発色法の考案2022

    • Author(s)
      徳原康哲,細川翔,小原一朗,山口健太郎,森西起也,多田達史
    • Organizer
      第62回 日本臨床化学会年次学術集会
    • Related Report
      2022 Research-status Report

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Published: 2021-04-28   Modified: 2025-01-30  

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