CaM結合領域のInv点変異マウスを活用した繊毛シグナルの解析
Project/Area Number |
21K08268
|
Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 53040:Nephrology-related
|
Research Institution | Osaka Medical and Pharmaceutical University |
Principal Investigator |
杉山 紀之 大阪医科薬科大学, 医学部, 准教授 (90381954)
|
Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
|
Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
|
Keywords | 一次繊毛 / 嚢胞腎 / ネフロン癆 / 繊毛 / 線毛 |
Outline of Research at the Start |
細胞外に突出した極小の構造体である一次繊毛の異常が嚢胞腎を代表とする繊毛病を引き起こす。一次繊毛は尿流を感知することによりCaを細胞内に流入させて細胞外の情報を細胞内に伝えると考えられてきた。近年の研究により、このCaの役割について疑問視されるようになった。 我々は、若年性ネフロン癆の責任遺伝子産物であるInvがCa依存的にカルモジュリンと結合することを見出した。本研究は、Invのカルモデュリン結合領域点変異マウスを作製し、嚢胞化シグナルのトリガーとしてCaが関与することを明らかにする。この解析を通して、嚢胞腎の発生機序の解明および臨床応用へ向けた基盤の構築を目指す。
|
Outline of Annual Research Achievements |
嚢胞腎を呈する若年生ネフロン癆は一次繊毛異常によって生じる。一次繊毛は尿流を感知するメカノセンサーであり、Ca2+の流入がそのシグナルの引き金になると考えられてきた。我々が標的にしているInvもCa2+依存的にカルモデュリンとも結合することを見出したが、その意味は不明であった。 その意味を明らかにするためにカルモデュリン結合領域点変異マウスを作製し、そのマウスが嚢胞腎を呈することを明らかにしてきた。ただし、このマウスは内臓逆位などのInvのノックアウトマウスで見られた他の異常は観察されなかった。これから一次繊毛でも組織によって機能が使い分けられていることを明らかにした。さらに、繊毛内でInvとカルモデュリンが共局在していることを明らかにした。これにより、腎臓においては一次繊毛内において、Ca2+、カルモデュリン、Invが関係して機能していることを示唆する結果である。 しかしながら、繊毛の動態によってこれら因子の局在が変化することが考えられるために、点変異マウスから尿細管上皮細胞の初代培養を行ってきた。残念なことにこの点変異マウスの繁殖がうまく行えておらず、必要な匹数が確保されていない。そのためにまずは点変異マウスの系統維持を優先させ、受精卵保存および受精卵移植によるコロニー拡大を実施中である。既に受精卵保存は終了しており、現在は凍結胚からの産仔を確保している。よって、研究計画は遅れているが、研究を行うための環境が整いつつある状況である。
|
Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
解析すべき点変異マウスの系統維持が困難であり、そのために系統維持を優先して繁殖している。よって、研究のための匹数が確保できていない。解決策として人工授精からの凍結胚保存とそこからの繁殖を行っており、現在匹数を確保している段階である
|
Strategy for Future Research Activity |
研究が遅れているが、当初最初に行う予定であった点変異マウスの表現型の解析と尿細管上皮細胞の初代培養系の構築を必ず行うために準備中である。
|
Report
(2 results)
Research Products
(1 results)