The clarification of aldosterone production machinery and the identification of therapeutic factors based on the posttranscriptional regulation
| Project/Area Number |
21K08557
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 54040:Metabolism and endocrinology-related
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
沖 健司 広島大学, 病院(医), 講師 (30638995)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2023-03-31
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| Project Status |
Discontinued (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | 原発性アルドステロン症 / アルドステロン / アルドステロン合成酵素 / 転写 / 転写後調節 / CYP11B2 / アンギオテンシンII / 遺伝子変異 / 蛋白発現調節 |
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| Outline of Research at the Start |
CYP11B2 mRNA結合蛋白から転写後調節因子を同定し，その因子を調節した細胞株からリボソームプロファイリングの手法を導入し，CYP11B2 mRNA結合因子がCYP11B2の翻訳制御に直接関与することを明らかにする．さらにこれらの因子がCYP11B2の転写後調節に直接かかわっていることを明らかにする．これらの候補因子の絞り込みをAPAモデル細胞株およびPAモデルマウスにおいて行い，絞り込んだ因子の阻害薬投与またはノックアウトマウスを作成し，その表現型の解析によってCYP11B2のmRNAに結合する因子を介したアルドステロン合成制御機序を明らかにする．
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| Outline of Annual Research Achievements |
試験１. CYP11B2 RNA結合蛋白の機能解析
前年度に同定したCYP11B2 RNA結合因子によるアルドステロン合成機構を明らかにするため，同因子の過剰発現およびknock downを行った．原発性アルドステロン症モデル細胞株でのshRNAによるknock downを行ったところ，アルドステロン合成は抑制され、HAC15細胞株での過剰発現解析では，CYP11B2 mRNAは高発現し，アルドステロン分泌は抑制された．
さらに，RNA結合因子のRNA結合部位のアミノ酸変異を加えたplasmidを作成し、同様の解析を行ったところ，アルドステロン分泌に変化はみられなかった．
試験２. CYP11B2 RNA結合蛋白を用いたChiP-seq解析
CYP11B2 RNA結合蛋白がCYP11B2との結合を明らかにするため，同タンパクの抗体を用いたChiP-seq解析を行った．本解析で得られたmRNAにCYP11B2の配列が確認され，その定量解析で原発性アルドステロン症モデル細胞株では対照細胞株に比較し有意に高値であることが示された．
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Report
(2 results)
Research Products
(15 results)
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[Journal Article] A hyperaldosteronism subtypes predictive model using ensemble learning2023
Author(s)
Karashima S, Kawakami M, Nambo H, Kometani M, Kurihara I, Ichijo T, Katabami T, Tsuiki M, Wada N, Oki K, Ogawa Y, Okamoto R, Tamura K, Inagaki N, Yoshimoto T, Kobayashi H, Kakutani M, Fujita M, Izawa S, Suwa T, Kamemura K, Yamada M, Tanabe A, Naruse M, Yoneda T; JPAS/JRAS Study Group.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 13
Issue: 1
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] NFIA determines the cis-effect of genetic variation on Ucp1 expression in murine thermogenic adipocytes2022
Author(s)
Hiraike Y, Tsutsumi S, Wada T, Oguchi M, Saito K, Nakamura M, Ota S, Koebis M, Nakao H, Aiba A, Nagano G, Ohno H, Oki K, Yoneda M, Kadowaki T, Aburatani H, Waki H, Yamauchi T.
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Journal Title
iScience
Volume: 25
Issue: 8
Pages: 104729-104729
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Association of aldosterone and blood pressure with the risk for cardiovascular events after treatments in primary aldosteronism.2021
Author(s)
1.Haze T, Hirawa N, Yano Y, Tamura K, Kurihara I, Kobayashi H, Tsuiki M, Ichijo T, Wada N, Katabami T, Yamamoto K, Oki K, Inagaki N, Okamura S, Kai T, Izawa S, Yamada M, Chiba Y, Tanabe A, Naruse M.
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Journal Title
Atherosclerosis.
Volume: 324
Pages: 84-90
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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