Genomics analysis of immune microenvironmental changes in hepatocarcinogenesis after cure of hepatitis C
| Project/Area Number |
21K08745
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 55020:Digestive surgery-related
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| Research Institution | National Hospital Organization, Kyushu Cancer Center |
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Principal Investigator |
杉町 圭史 独立行政法人国立病院機構(九州がんセンター臨床研究センター), 未登録, 肝胆膵外科部長 (90452763)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
間野 洋平 独立行政法人国立病院機構(九州がんセンター臨床研究センター), その他部局等, 肝胆膵外科医師 (10792244)
増田 隆明 九州大学, 大学病院, 講師 (50463493)
荒木 啓充 九州大学, 経済学研究院, 助教 (60572823)
吉住 朋晴 九州大学, 医学研究院, 教授 (80363373)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | 肝細胞癌 / メチル化シークエンス / mRNAシークエンス / ウイルス学的著効 / 免疫微小環境 / ゲノミクス / 肝がん / C型肝炎 |
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| Outline of Research at the Start |
肝がんは予後不良の固形悪性腫瘍である。近年は抗ウイルス治療により発癌原因となるC型肝炎ウイルス(HCV)を消失させることが可能になった一方で肝炎治癒後に発生する肝がんが増加しており改めて肝発癌機序の根本的解明が求められている。近年、肝発癌機序に宿主肝の免疫環境の変化が関わっていることが示唆されてきたが詳細は未だに分かっていない。本研究の目的は、ゲノミクスによる腫瘍の免疫微小環境の解析によりC型肝炎治癒後に発生する肝がんの発癌機序を解明し、さらに肝がんに対する免疫療法の作用機序や治療効果予測に関するバイオマーカーを同定することである。
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| Outline of Annual Research Achievements |
ゲノミクス解析によってC型肝炎治癒後の肝発癌における免疫微小環境変容を解明することを目指して研究を継続した。まず肝細胞癌に対する肝切除手術を行った症例について、切除標本の癌部、非癌部の新鮮凍結標本を採取し, 各症例の凍結組織よりそれぞれゲノムDNA と全RNA を抽出し精製した。また同症例の末梢血液のサンプリングも行った。
DNAを用いてメチル化シークエンスを行った。各症例のメチル化異常を網羅的に解析し、免疫微小環境変容とメチル化異常の関連を解析している。
またRNA よりmRNAシークエンス(RNAseq)を行った。具体的には逆転写cDNAのアダプター付きライブラリ作製し、DNBSEQ社のG400RS FASTでシークエンシングしトランスクリプト毎の発現解析を行った。
現在はシークエンス結果をin silicoにて解析中である。具体的にはRNAseqのデータよりgranzyme(GZMA)とperforin(PRF1)のmRNA 発現値の幾何平均値より免疫応答予測スコア(cytolytic activity値)を算出している。その他の細胞障害性T細胞関連遺伝子(CD3G, CD3E, CD4, TBX21)、免疫抑制(疲弊)関連遺伝子(PD-1, CTLA-4, LAG3, TIM-3, A2aR)の発現データを網羅的にクラスタリング解析し、免疫微小環境と発癌要因の相関を解析している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
臨床検体のサンプリングを行い、シークエンス結果を想定通りに得ることができている。
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| Strategy for Future Research Activity |
mRNAシークエンシング(RNAseq)の結果より、免疫応答予測スコアやその他免疫応答に関係するデータを網羅的に解析していく予定である。
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Report
(2 results)
Research Products
(3 results)
