新規分子を標的とした痒み治療薬の開発に向けた末梢神経における痒み伝達の解明

Research Project

Project/Area Number	21K08976
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 55050:Anesthesiology-related
Research Institution	Wakayama Medical University
Principal Investigator	丸山智之和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (00894883)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	時永泰行和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60438281)
Project Period (FY)	2021-04-01 – 2024-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000) Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000) Fiscal Year 2022: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000) Fiscal Year 2021: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Keywords	IL-31 / Tmem45b / 掻痒 / 痒み / IL-31RA / TRPV1 / 末梢神経
Outline of Research at the Start	当研究室で研究を進めているTmem45bという分子の機能は未知であるが、機械的な痛みに関与していると考えている。一方で熱による痛みを伝達するTRPV1陽性神経はTmem45と高率に共発現しており、かつアトピー性皮膚炎に関わるIL-31RAとも発現を共にしていることがわかった。 Tmem45陽性神経は痛み以外の感覚受容にも関わっている可能性があり、本研究では痒みに関わっているのではないかという仮説を立て、マウスを用いて遺伝子発現分布解析、行動解析、電気生理学的解析、神経化学的解析を行う。
Outline of Annual Research Achievements	マウスの後根神経節に対して免疫染色とin situ ハイブリダイゼーションを行い、IL-31RA、Tmem45b、TRPV1の3重染色を行ったところ、Tmem45b陽性かつTRPV1陽性の細胞のうちIL-31-RAも陽性であったものは60％認められ、高率に共発現していた。IL-31RA、Tmem45b、TRPV1の間には掻痒に関する関連性があると考えられる。マウスに対して掻痒誘発物質（IL-31、ヒスタミン、クロロキン、SLIGRL、Compaund48/80）の投与を行い、掻爬回数を評価したところ、wildマウスに比較してTmem45bKOマウスは溶媒投与では掻爬回数に差がなかったものの、IL-31、掻爬回数が有意に低いことが行動実験として示された。（128.3 ± 28.4 vs 89.6 ± 24.1, p = 0.0297)。現在行っている実験としてはwestan-blot法によるIL-31RAの発現量がwildマウスとTmem45bKOマウスで差がないか比較する実験を行っており、比較するには至っていないが、IL-31RAの検出は行うことができている状況である。また、現在マウスの後根神経節細胞を単離し、カプサイシン、IL-31、KClを用いたカルシウムイメージングの実験を行っている。wildとTmem45bKOマウスと比較することで反応する細胞群の頻度に差がないことを調べる予定である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 現時点で予定している研究は概ね終了している。今後追加実験が必要となる可能性は否定できない。学会発表を行っているが、論文作成は未完成である。
Strategy for Future Research Activity	上記に記載したwestan blot、カルシウムイメージングの実験を終了させ、論文を作成することで本研究は終了する予定である。