骨肉腫の足場依存的な肺内増殖メカニズムの解明と肺転移抑制療法への応用
| Project/Area Number |
21K09290
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56020:Orthopedics-related
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| Research Institution | 医療法人徳洲会野崎徳洲会病院(附属研究所) |
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Principal Investigator |
由井 理洋 医療法人徳洲会野崎徳洲会病院(附属研究所), 研究所, 主任研究員 (20547757)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | CRISPR活性化スクリーニング / 骨肉腫 / 肺転移 / RNA-seq解析 / 機械的シグナル伝達 |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では、転移先臓器の腫瘍外環境の軟らかさという工学的性質と腫瘍増殖の関係性に焦点を当て、新規の治療標的分子を探索する。肺の軟らかく足場の乏しい環境での足場依存的増殖メカニズムから導き出された治療標的分子は、転移を特異的に抑える分子標的薬の開発など新規の治療法開発の足掛かりとなる。また、本研究の成果は、肺線維化抑制療法と組み合わせを検討することで、より効果的な肺転移抑制療法の礎となる。
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| Outline of Annual Research Achievements |
骨肉腫肺転移は、腫瘍細胞が原発巣から離脱し、血行性に肺組織に到着後、肺組織に侵入し生着・増殖することで成立する。本研究は、肺組織の軟らかさに着目して、工学的手法を用いて肺転移の初期段階である肺生着メカニズムを解明することを目指す。本年度は前年度から引き続き、軟らかい環境と硬い環境で培養した骨肉腫高肺転移株と低肺転移株のRNA-seq解析と解析結果の検証を進めている。候補因子は、米国NCI主導で行われたTARGET Osteosarcoma projectのデータを用いて、患者予後との相関を確認した。予後との相関が見られた因子として、複数のGTPase-activating proteinと複数のRibosomal proteinが確認された。現在、分子生物学的手法や動物実験によって肺転移への関与を検証することを計画している。さらに、前年度に引き続きCRISPR活性化スクリーニングのサンプル準備を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
CRISPR活性化スクリーニングのサンプル準備が遅れていたが、本年度はgRNAの骨肉腫細胞への導入は確認できた。さらに、移植後の肺組織から抽出した遺伝子をPCRで増幅し、gRNAライブラリーの増幅が確認できた。今年度前半には次世代シーケンサー解析を行うことができる状態である。RNA-seq解析からは、患者予後に相関する新規因子が複数見つかっている。
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| Strategy for Future Research Activity |
CRISPR活性化スクリーニングのサンプルを準備し、次世代シーケンサー解析を行う。解析結果とRNA-seq解析の比較検討を行う。予後との相関が見られたGTPase- activating proteinやRibosomal proteinの肺転移への影響を、分子生物学的手法や動物実験によって検証する。
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Report
(2 results)
Research Products
(5 results)
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[Journal Article] Establishment of organoids from human epithelioid sarcoma with the air-liquid interface organoid cultures.2022
Author(s)
Wakamatsu T, Ogawa H, Yoshida K, Matsuoka Y, Shizuma K, Imura Y, Tamiya H, Nakai S, Yagi T, Nagata S, Yui Y, Sasagawa S, Takenaka S
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Journal Title
Front. Oncol.
Volume: 12
Pages: 893592-893592
DOI
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Peer Reviewed / Open Access
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