尿中CD55/CD9共陽性エクソソームを標的とした膀胱癌の新規診断・治療法の確立
| Project/Area Number |
21K09384
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
| Allocation Type | Multi-year Fund |
|---|
| Section | 一般 |
|---|
| Review Section |
Basic Section 56030:Urology-related
|
|---|
| Research Institution | St. Marianna University School of Medicine |
|---|
Principal Investigator |
菊地 栄次 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (10286552)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉岡 祐亮 (吉岡祐亮) 東京医科大学, 医学部, 講師(特任) (60721503)
薄場 渉 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教 (90867649)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
|
| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
|
|---|
| Keywords | 膀胱癌 / エクソソーム / CD55 / ExoScreen / バイオマーカー / 膀胱腔内注入療法 |
|---|
| Outline of Research at the Start |
再発・病期進展の可能性が高い筋層非浸潤性膀胱癌に対する新たなバイオマーカーを用いた診断方法ならびに治療法の開発を目的に、膀胱癌から分泌されるCD55およびCD9を膜タンパクとして持つエクソソーム（CD55+9+exosome）を指標として、膀胱癌を早期診断する感度と特異度に優れた方法を発案した。本研究では尿中のCD55+9+exosomeが、膀胱癌の診断・予後マーカーとして有用であることを検証し、膀胱癌の機能との関連性を解明する。さらに、CD55+9+exosomeの分泌を抑制するmiRNAを見出し、膀胱癌の機能に与える影響を解析し、このmiRNAを用いた新規膀胱腔内注入療法の開発を目指す。
|
| Outline of Annual Research Achievements |
近年、細胞から分泌される小胞体であるエクソソームは、細胞間の情報伝達手段として注目されている。本研究では、膀胱癌における尿中のCD55+9+exosomeをバイオマーカーとした低侵襲な体液診断法の開発と、CD55+9+exosomeの機能解析を目指している。
本年度は膀胱癌細胞株を用いて抗癌剤（シスプラチン）曝露によるCD9+exosomeならびにCD55+9+exosomeの分泌への影響について検討を行った。
CD55+9+exosomeの発現が最も高い/低い膀胱癌細胞株であるHT1376/UMUC3について、無血清培地（エクソソームフリー）を用いてシスプラチン曝露後の培養上清中のエクソソーム量を、高感度迅速測定法であるExoScreenを用いて定量した。
一般的なエクソソーム全般を検出するCD9+exosome値は両細胞株ともにシスプラチン濃度依存性に減少した。シスプラチン20μM添加では無添加群と比較してHT1376で40.7％、UMUC3で13.0％に減少した。これはシスプラチンの殺細胞効果による生細胞数の減少と一致しており、細胞あたりのCD9+exosomeの分泌量は変化していないことがわかった。
一方、膀胱癌特異的エクソソームであるCD55+9+exosome値はシスプラチン20μM添加で無添加群と比較してHT1376は81.７%、 UMUC3は82.４％とあまり減少しなかった。シスプラチンの殺細胞効果により生細胞数が減少してもCD55+9+exosome分泌量があまり変化しないということは、１細胞あたりの分泌量が増加しているということを示しており、膀胱癌細胞が抗癌剤に抵抗するために分泌量を増加させていることが推察された。
また、細胞元来のCD55+9+exosome分泌量の差や悪性度はシスプラチンの作用によるエクソソーム分泌の変化に関連しないことが判明した。
|
Report
(3 results)
Research Products
(4 results)
