Identification of Indirect Alloreactive T-Cells and Application to Monitoring of anti-Donor Antibody Sensing

• Project/Area Number: 21K09385
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 56030:Urology-related
• Research Institution: Aichi Medical University
• Principal Investigator: 岩崎 研太 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (10508881)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石山 宏平 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (50437589) ; 小林 孝彰 愛知医科大学, 医学部, 教授 (70314010) ; 三輪 祐子 愛知医科大学, 医学部, 助教 (90572941)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000); Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000); Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
• Keywords: 移植免疫 / 樹状細胞 / single cell / 濾胞性T細胞 / アロ応答 / 臓器移植 / 免疫寛容 / CD4 T-cell / 抗原提示

Outline of Research at the Start

本研究では、DSA産生に必要な特定のクローンをAPC-CD4培養系と併用することで、迅速なDSA産生と拒絶反応を感知する新規モニタリングへの使用を第一目的とする。さらに、ドナー抗原特異的なTreg/Tfr作成が可能となれば、免疫順応・寛容を達成するための新たな免疫療法へと展開できる独創性を持っている。本研究ではレシピエントCD4 T細胞に着目しているが、世界的にはDCregによる免疫寛容誘導も研究や治験が進められており、我々の研究室でも簡便に作成可能である。ドナー抗原特異的TCRを持つ細胞の改変を含めた免疫療法へと将来は展開させたい。

Outline of Annual Research Achievements

臓器移植における最重要課題の一つは、de novo donor specific HLA antibody (DSA)による抗体関連型拒絶反応の克服であるが、血清中DSAを測定する以外のリスク評価法はなかった。近年、in silicoによるT/B-cell epitope解析 (PIRCHE, eplet mismatch) を用いたリスク評価が行われている。また、non-DSAであってもDSA産生が惹起されうる、Shared T Cell Epitopeという概念についても報告してきた。一方で、実際の臨床経過との乖離もあるなどリスク評価の根本的解決には至っていない。我々はレシピエントCD14細胞を用いてドナー細胞貪食抗原提示細胞を作成し、獲得免疫を基盤にしたindirect alloresponseを模倣した実験系による腎移植患者の感作状態の把握を試みた。IL-21産生を指標にpreformed/de novo DSA患者におけるmemory CD4 T細胞応答がDSA産生と関連することを明らかとし報告した。Single cell 解析により、DC実験系で得られる増殖CD4 T細胞はB細胞活性化に関与する濾胞性T細胞をはじめとしたeffector 細胞のみならず、制御性T細胞など様々な細胞群へと分化していた。また、同一検体であっても異なる採血ポイントによりその分化パターンは異なっていた。臓器移植ではeffectorの消失とregulatory・anergy・exhaustionへの分化誘導が長期予後に必要であると提唱されている。Indirect alloresponseモニタリングと、誘導細胞種の判別が長期生着に重要であると考えられる。

Research Products

• [Journal Article] Estimation of Sensitization Status in Renal Transplant Recipients by Assessing Indirect Pathway CD4+ T Cell Response to Donor Cell-pulsed Dendritic Cell (2023)
  • Author(s): Kenta Iwasaki、Toshihide Tomosugi、Takashi Sekiya、Shintaro Sakamoto、Yuko Miwa、Manabu Okada、Takahisa Hiramitsu、Norihiko Goto、Shunji Narumi、Yoshihiko Watarai、Mai Okumura、Satoshi Ashimine、Kohei Ishiyama、Ezzelarab Mohamed B.、Takaaki Kobayashi
  • Journal Title: Transplantation Volume: 107 Issue: 5 Pages: 1079-1088
  • DOI: 10.1097/tp.0000000000004491
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Presentation] Indirect alloresponseを模倣したヒト樹状細胞によるドナー特異的T細胞解析 (2023)
  • Author(s): 岩﨑研太1）、三輪祐子1）、雫真人2）、安次嶺聡2）、石山宏平2）、Xian Liu3）、山崎晶3）、小林孝彰2）
  • Organizer: 第31回日本組織適合性学会大会
• [Presentation] DCを用いたCD4 T細胞培養系によるIndirect alloresponse評価 (2023)
  • Author(s): 岩﨑研太1）、友杉俊英2）、関谷高史3）、三輪祐子1）、Mohamed B. Ezzelarab4）、Xiuyuan Lu 5)、山崎晶5)、雫真人1）、安次嶺聡1）、石山宏平1）、小林孝彰1）
  • Organizer: 第59回日本移植学会総会
• [Presentation] 樹状細胞を用いたindirect alloresponse検出系によるドナー特異的T細胞解析 (2023)
  • Author(s): 岩﨑 研太*, 三輪 祐子, 安次嶺 聡, 石山 宏平, 小林 孝彰
  • Organizer: 第20回日本免疫治療学会
• [Presentation] In silico と in vitro 解析における de novo DSA リスク評価 (2022)
  • Author(s): 岩﨑研太
  • Organizer: 第48回日本臓器保存生物医学会学術集会企画プログラム講演
  • Invited
• [Presentation] Indirect allorecognition評価法の確立とモニタリングへの応用 (2021)
  • Author(s): 岩﨑研太, 友杉俊英, 田中一樹, 浜名洋, 三輪祐子, 河野あゆみ, 奥村真衣, 安次嶺聡, 石山宏平, 岸裕幸, 小林孝彰
  • Organizer: 移植学会
• [Presentation] ヒトDCを用いたIndirectアロ応答の検出 (2021)
  • Author(s): 岩﨑研太, 友杉俊英, 関谷高史, 三輪祐子, 石山宏平, 安次嶺聡, 奥村真衣, 小林孝彰
  • Organizer: 組織適合性学会
• [Presentation] Establishment of an evaluation method for donor HLA antigen sensitization using CD14 monocytes from organ transplant recipients (2021)
  • Author(s): Iwasaki Kenta, Sekiya Takashi, Hamana Hiroshi, Kishi Hiroyuki
  • Organizer: 免疫学会