HPV維持複製におけるE4の機能解析:癌化メカニズムの解明と臨床応用を目指して
Project/Area Number |
21K09454
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
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Research Institution | Keio University |
Principal Investigator |
村上 功 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 共同研究員 (70445237)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000)
Fiscal Year 2024: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2023: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2022: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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Keywords | ヒトパピローマウイルス / E4 / 維持複製 / raft culture / 子宮頸部発癌機構 |
Outline of Research at the Start |
本研究の培養細胞は、角化細胞の中で最も生体内での生活環を模倣しているNIKSを用いる。野生型もしくは変異型HPV11、HPV16、HPV18をNIKSに導入し、ゲノム量の変化と細胞密度の関連を定量PCRにより解析する。同時にE4のmRNA量を測定し、発現パターンを解析する。また臨床検体におけるE4発現と臨床情報の関連の検討によりCIN、特にCIN2における予後因子としての可能性を解析する。
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Outline of Annual Research Achievements |
申請者がケンブリッジ大学で修得した培養方法で野生型もしくはE4欠損型HPV11、HPV16、HPV18 を角化細胞の中で最も生体内での生活環を模倣しているnormal immortal ker atinocytes (NIKS) に導入した。以前の研究で野生型ではHPV11、HPV16、HPV18が恒常的にHPVが発現しているNIKSの作製に成功していたが、E4 欠 損型においてもHPV11、HPV16、HPV18が遺伝子導入されたNIKSの作成に成功した。しかし継代と共にHPVゲノムが減少するため、常に継代初期の細胞がその後の実 験に必要となることが明らかになった。 各HPVを導入したNIKSを用いてraft cultureの作成を行った。野生型HPV16、HPV18のraft cultureの作成は可能であったが、野生型HPV11とE4 欠損型HPV11、HPV16、HPV18に関してはraft cultureの作成ができなかった。technical な問題はないと考えられるため、低リスク型HPVとE4 欠損型HPVのraft cultureは作成が困難であることが予想される。 CINの臨床検体、特にCIN2の予後予測因子を明らかにする事を目的に、CIN2の検体の収集と患者情報の整理を行った。またこれらの臨床検体を用いて、免疫染色の条件設定を行った。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
申請時の2022年度の研究計画通りに実験が遂行されているため。ただ臨床検体数が当初の見込みよりも少ないため、2023年度も引き続き収集を行う予定である。
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Strategy for Future Research Activity |
2022年度に引き続き臨床検体の収集と患者情報の整理、および臨床検体の免疫染色を試みる。
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Report
(2 results)
Research Products
(1 results)