頸部リンパ節における腫瘍免疫環境の解明-免疫学的頸部郭清術の確立を目指して

• Project/Area Number: 21K09664
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 56050:Otorhinolaryngology-related
• Research Institution: Aichi Medical University
• Principal Investigator: 小川 徹也 愛知医科大学, 医学部, 教授 (40334940)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉川 和宏 愛知医科大学, 加齢医科学研究所, 特務教授 (60109759) ; 鈴木 進 愛知医科大学, 加齢医科学研究所, 准教授 (70518422) ; 都築 豊徳 愛知医科大学, 医学部, 教授 (70627645)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000); Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2022: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000); Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
• Keywords: 頭頸部癌 / 外科腫瘍免疫学 / 頭頸部外科学 / 腫瘍免疫学 / 頸部郭清術 / 免疫

Outline of Research at the Start

本研究では、頸部郭清術の組織を用いて頸部リンパ節腫瘍免疫環境を主にフローサイトメトリーと多重免疫染色を用いた免疫関連分子の発現、及びTCRレパートア解析により検討し、新たな頸部郭清術の確立に向けた基盤的知見を蓄積することを目的とします。その結果、最善の免疫能を確認するマーカー分子を同定、将来に施行すべく新たなる免疫学的頸部郭清術を施行するための精密な診断方法を確立することを目的とします。

Outline of Annual Research Achievements

（はじめに）頭頸部癌における頸部郭清術は重要な治療手段である。100年以上前から施行され、根治的に頸部組織を一塊摘出することで根治性を狙う概念である。しかしながら現在腫瘍免疫の概念が確立し、免疫チェックポイント阻害剤が頭頸部癌において標準治療となっている。頸部には抗腫瘍免疫に重要且つ必要な頭頸部所属リンパ節が存在する。もし頸部転移症例の頸部リンパ節に抗腫瘍免疫能が存在するならば、従来の頸部郭清術概念を考え直す時期に来ている。HPV関連頭頸部癌で実験系を考案した。（対象と方法）頭頸部癌p16陽性HPV関連腫瘍4例に、原発切除と頸部郭清術を施行した。原発腫瘍、転移リンパ節、転移なしリンパ節（近位と遠位）、末梢血からリンパ球を抽出した。これらをHPV E6, E7の抗原で14日間刺激し、その後E6, E7特異的ペプチドにて特異的T細胞増殖が見られるかどうか、インターフェロンγ、TNF-α刺激でフローサイトメトリーで確認した。HPV発現はRNAスコープ発現で確認した。（結果）全4例でHPV16発現が確認された。p16免疫染色陽性は、HPV16感染と関連していることが示された。抗腫瘍免疫に関しては１例において、 E6, E7の特異的CD8陽性T細胞が転移リンパ節に確認された。さらに、近位の転移なしリンパ節おいても確認された。 一方、E6, E7特異的CD4陽性T細胞は全ての症例で確認されなかった。（考察）本研究により、HPV関連頭頸部癌の頸部転移症例において、癌の頸部転移が存在するのにも係わらず、その頸部転移リンパ節では抗腫瘍免疫が働いていることが示された。更にその近傍の転移なしリンパ節においても同様に抗腫瘍免疫が働いていることも示された。外科腫瘍免疫学が確立される現在、従来の頸部郭清術の概念を変えていく事も必要とされる事が示された。頸部転移リンパ節レパートア解析も行っている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

実際の手術症例を用いて、HPV関連頭頸部癌における抗腫瘍免疫に関する研究は順調に進んでおり、この観点からは免疫学的頸部郭清の概念確立に向け、順調に推移していると考えている。さらに、原発腫瘍と頸部郭清術を施行した、HPV関連頭頸部癌で無い症例に対しては、原発腫瘍と頸部リンパ節転移との間に、何らかの抗腫瘍免疫関連性があるのではないかという視点から、T細胞のレパートア解析を施行している。原発腫瘍と頸部リンパ節転移においては、明らかな関連性があることが示唆されており、その結果を現在英文誌に投稿、査読中となっている。これら両者を組み合わせることで、より重要な免疫学的頸部郭清の概念確立に向けての手法が進んで行くと考えている。

Strategy for Future Research Activity

さらに詳細に検討を行うことで、免疫学的頸部郭清の概念確立を目指したいと考えている。具体的には原発腫瘍と頸部郭清術を施行した、HPV関連頭頸部癌で無い症例に対してのT細胞のレパートア解析を、英文誌査読の結果の基、更に充実した内容にしていくことで国際発信をしていくことを考えている。又今後、頸部郭清術をなるべく施行せず、頭頸部癌抗腫瘍免疫の視点から考えた場合に、それら抗腫瘍免疫能の増強に向けた、新たなる取り組みとして、頸部リンパ節における免疫活性化のための方策を考えていくことが重要であると考え、研究を遂行していく予定である。