| Project/Area Number |
21K09806
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56070:Plastic and reconstructive surgery-related
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
今川 孝太郎 東海大学, 医学部, 講師 (50366001)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
増田 治史 東海大学, 医学部, 准教授 (50278496)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥3,120,000 (Direct Cost: ¥2,400,000、Indirect Cost: ¥720,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
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| Keywords | NETs / バトロキソビン / 皮弁虚血再灌流モデル / 難治性皮膚潰瘍 / ＮＥＴｓ / カルプロテクチン染色 / 慢性創傷 / NETｓ / 慢性皮膚潰瘍 |
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| Outline of Research at the Start |
NETsに関連する報告は自己免疫性疾患、ＤＩＣ、糖尿病など様々な領域で研究されており、特に動脈硬化の促進因子としてNETsは注目されている。慢性皮膚創傷において好中球が関与する炎症期の遷延が創傷治癒を阻害することが知られているが、その機序に関しては複雑で解明されていないことも多い。慢性皮膚創傷とNETsの関連についても解明されておらず、今回の検討は創傷治癒研究において、非常に重要な視点と考えられる。また、NETsを抑制する効果があるバトロキソビンを糖尿病マウス潰瘍モデルに投与し治療効果を検討する。効果があれば慢性皮膚創傷の新たなカテゴリーの治療薬として臨床応用を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は１．慢性創傷でのNETｓ発現の検討と２．動物モデルによるバトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証を行うものである。
１．慢性創傷でのNETｓ発現についての検討
２０２１年度に虚血性潰瘍、褥瘡４例について壊死部と健常部の境界から組織を採取したものを、NETｓ発現の確認としてカルプロテクチン（S100A8）染色、ミエロペルオキシダー染色を施行した。肉眼的に炎症の強い症例にNETｓの集積が認められ、局所の炎症が強い部位が組織壊死へ伸展する可能性が示唆された。
２．バトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証
動物実験はSD雄性ラット２４匹にて検討する予定である。ラットの腹部に5x3cmの浅腹壁動静脈を茎とする皮弁を挙上し、血管茎をクリップで６時間クランプした後に血流を再開させる皮弁虚血再灌流モデルを使用した。血管クランプ解除時、２４時間後にバトロキソビン30バトロキソビン単位/kgを腹腔内投与し（コントロール群は生理食塩水を腹腔内投与）、皮弁虚血再灌流後の壊死抑制効果を肉眼的および組織学的に検証する。２０２２年度は先行実験として６匹に対して施行した。評価は再灌流後７日目の変化を確認した。肉眼的評価評価として、レーザードップラー血流イメージング（LDI; Moor Instruments, Ltd., Devon, UK）を用いて皮弁の生存範囲を可視化した。組織学的評価としてカルプロテクチン（S100A8）染色、ミエロペルオキシダー染色によるNETｓ発現、血管との関連としてCD31染色を行った。現在、皮弁血流の測定データは、Moor LDI Main software (Laser Doppler Imager ver 5.3; Moor Instruments, Ltd.)を用いて解析、組織標本を作製中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
組織採取する症例が少なく計画よりやや遅れているものの、想定外の事象が生じていることはないため、研究計画に変更はなくすすめることが可能と考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
１．慢性創傷でのNETｓ発現の検討は１５例について検討する予定であるが、２０２３年度は残りの１１例につい検体採取、組織染色を施行する予定である。
２．バトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証
２０２３年度は残りの１８匹について動物実験を行う予定である。
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