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New diagnostic method of oral dryness by ELISA method produced by using salivary biomarker as an antigen

Research Project

Project/Area Number 21K10012
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 57050:Prosthodontics-related
Research InstitutionThe Nippon Dental University

Principal Investigator

水橋 史 (高橋史)  日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (60386266)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 竹澤 晴香 (山口晴香)  日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 講師 (00756942)
戸谷 収二  日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (20287791)
森田 貴雄  日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (20326549)
Project Period (FY) 2021-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2023: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2021: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Keywords唾液バイオマーカー / 口腔乾燥症 / Ca拮抗薬 / 診断法 / ELISA法
Outline of Research at the Start

本研究では,カルシウム拮抗薬服用者の唾液バイオマーカーを抗原として,ELISA 法による薬物性の口腔乾燥症の確定診断をすべく,その診断法を新たに開発することを目的とする。
唾液中のタンパク質とRNAから,カルシウム拮抗薬による口腔乾燥症に特有の唾液バイオマーカーを決定し,唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキットの新規作製を試みる。
診断用のELISAキットを作製したのち,そのELISAキットを用いて,口腔乾燥症の臨床診断を試みる。

Outline of Annual Research Achievements

現在の超高齢社会において,口腔乾燥症の患者が増加している。多くの高齢者が薬物を服用しており,薬物性の口腔乾燥症の患者が多いが,特にCa 拮抗薬による口腔乾燥症が非常に多い。しかし,未だに口腔乾燥症の確定診断には至っていない。本研究では,唾液中タンパク質とRNAから,Ca 拮抗薬による口腔乾燥症に特有の唾液バイオマーカーを決定し,唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキットを新規に作製して,口腔乾燥症の確定診断を行うことを目的としている。
令和5年度は,これまで採取したCa 拮抗薬服用者と内服薬のない健常高齢者の唾液検体を用いたWestern blottingを行い標的遺伝子にコードされるタンパク質の検出確認を行うとともに,リアルタイムPCR によるRNAレベルの測定を行い,標的遺伝子の検出確認を行った。Western blottingとリアルタイムPCRによる検討を重ねた結果,Ca 拮抗薬による口腔乾燥症の唾液バイオマーカーとなり得る唾液タンパク質を1つに絞ることができた。このターゲットタンパク質を抗原として,ELISAキットの作製を段階的に進めていった(委託)。市販抗体と市販抗原を用いたELISA初期検討を2段階行い,ターゲットタンパク質を検出するのに優れた条件を模索した。現在は,検討の最終段階に入っており,ヒトの唾液を用いてELISAキットによる検出確認を行っている。
令和5年度までの研究成果をまとめ,口腔乾燥症の唾液バイオマーカーの決定に関する論文を投稿中(水橋)である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

令和3年度の研究計画であった,Ca 拮抗薬服用者と内服薬のない健常高齢者の唾液採取を令和4年度に行い,さらに,採取した唾液を用いてWestern blottingとRT-PCR ,リアルタイムPCR を行った。令和4年度に行うことを計画していた唾液バイオマーカーを抗原としたELISAキットの作製は,現在,最終段階に入っているが,まだ完成しておらず,やや遅れている。

Strategy for Future Research Activity

令和6年度には,ELISAキットが完成するため,作製したELISAキットを用いて,臨床応用を行う。臨床応用を行うにあたり,唾液採取(水橋,戸谷)とELISAキットによる分析(森田,竹澤)で分担して進めていく。
令和6年度の研究成果発表を行うとともに,論文作成を行う(水橋)。

Report

(3 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (51 results)

All 2024 2023 2022 2021 2020

All Journal Article (19 results) (of which Peer Reviewed: 18 results,  Open Access: 16 results) Presentation (32 results)

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    • Journal Title

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    • DOI

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    • Author(s)
      小出 馨, 水橋 史, 渡曾侑子, 吉田 実, 小出勝義, 近藤敦子, 浅沼直樹, 佐藤利英
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Published: 2021-04-28   Modified: 2024-12-25  

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