好酸球性多発血管炎性肉芽腫の腎障害メカニズムの解明

• Project/Area Number: 21K16179
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 53040:Nephrology-related
• Research Institution: Akita University
• Principal Investigator: 齋藤 雅也 秋田大学, 医学部附属病院, 助教 (00831215)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000); Fiscal Year 2023: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2022: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000); Fiscal Year 2021: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
• Keywords: 好酸球性多発血管炎性肉芽腫症 / 好酸球性炎症 / 細胞外トラップ / 腎障害

Outline of Research at the Start

好酸球性多発血管炎性肉芽腫症(EGPA)では、急速進行性糸球体腎炎の経過を呈し末期腎不全に至る症例も存在する。腎組織像は好酸球浸潤を伴う間質性腎炎や半月体形成性糸球体腎炎が多い。腎機能障害はEGPA患者死亡の独立した予後因子であり、腎はEGPAの重要な臓器合併症である。
一方、好酸球活性化に伴う非アポトーシス細胞死(ETosis)では、細胞外に放出される細胞内成分が組織傷害性を有するため、過剰な好酸球ETosisが様々なアレルギー性疾患の病態に関連していることが判明し注目されている。本研究では、EGPA腎障害に対する好酸球ETosisの寄与を解明し治療標的となり得るかを探る。

Outline of Annual Research Achievements

本研究は好酸球性多発血管炎性肉芽腫症(EGPA)の腎合併症での好酸球性炎症の寄与について検討し、治療標的となり得るかを探る。EGPAでは様々な臓器における好酸球の非アポトーシス死(ETosis)による臓器障害性が明らかになってきており、また、EGPAの血栓病変の形成にETosisが関与していることが報告されている。その一方で、EGPAの腎障害におけるETosisの関与は未だ明らかとなっていない。
昨年度、今年度で好酸球非アポトーシス細胞死(ETosis)のin vitro条件下での腎組織傷害作用を検討するため、既報に則り活性化した好酸球とHuman kidney-2(HK-2)細胞のインキュベーションによる実験を行っている。尿細管細胞の傷害性についてはHK-2細胞から放出されたLDHやヨウ化プロピジウム染色による視細胞の可視化と解析を行っており、データ解析後に論文化を進める予定となっている。
腎での好酸球ETosisの局在を確認するため、EGPA患者腎組織の電子顕微鏡検査を進めているが、より広範な組織での確認を行うため、パラフィン包埋検体からの電顕包埋切片作成としていたが、観察画像が荒く正確な評価が困難であった。そのため、今後は好酸球ETosisのマーカーによる免疫染色を行うことで腎組織での好酸球ETosisの局在評価を行う予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

腎組織における好酸球ETosisの局在評価のための電子顕微鏡検査で、多数例かつ広範囲での評価は、パラフィン包埋切片での電顕観察がうまくいかない部分があった。代替案としてパラフィン切片での免疫染色を予定している。
研究計画の遅れの原因として新型コロナウイルス感染症による予期しない業務の増加が挙げられる。コロナウイルス感染症患者数は減少しているため、次年度は研究のための時間確保がしやすくなることが予想され、積極的に研究計画を遂行する。

Strategy for Future Research Activity

腎組織での好酸球ETosisの局在評価のための電子顕微鏡検査では、パラフィン切片からの戻し切片のため画像が荒く正確な評価が難しいことが判明した。代替案としてパラフィン切片での免疫染色を予定している。好中球ETosisに関連した腎組織免疫染色は当科の過去の研究でも実績があるため、好酸球ETosisマーカーの免疫染色へ応用することで十分に対応できると考えられる。

Research Products

• [Book] リウマチ科 (2022)
  • Author(s): 富澤宏基、齋藤雅也、植木重治
  • Total Pages: 6
  • Publisher: 科学評論社