Project/Area Number |
21K16507
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Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
Basic Section 55040:Respiratory surgery-related
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
氏家 秀樹 北海道大学, 大学病院, 講師 (70869825)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2021: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
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Keywords | IR700 / IM7 / AB22 / CD44 / LL2-LUC2 / 光免疫治療 / 近赤外光線免疫療法 / がん幹細胞 / アブスコパル効果 / レーザー治療 / マウス肺癌モデル |
Outline of Research at the Start |
本研究では、レーザーの局所に対する治療効果だけでなく、免役機構が賦活化し、治療をしていない腫瘍まで治療効果がある「アブスコパル効果」を評価する。昨今、マウス皮下腫瘍モデルに対するアブスコパル効果の検討は散見されるが、マウス肺癌同所性モデルの検討は今まで類例がない。肺、気道などの呼吸器官は、マクロファージやリンパ球が多く存在し、他臓器と比べて、より複雑な免疫反応を起こす臓器と言われている。肺癌同所性モデルは、皮下腫瘍モデルと比べて胸部悪性腫瘍の腫瘍微小環境に近く、肺そのものが持つ特異的な腫瘍免疫を検討することが可能であると考えられる。
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Outline of Annual Research Achievements |
2022年度はAB22(CD44陽性中皮腫細胞株)を用いて、In Vitro解析を行った。 CD44抗体IM7とCD44陽性細胞AB22を使用した光免疫治療(PIT)のvitroでの結果は良好であった。【抗体】CD44抗体は、抗体:IR700=1:5の割合で混ぜ、IM7-IR700を精製。IM7/IR700比は平均2.5-3.0個程であった(IR700/IM7比に関してはLowry法にて算出)【細胞株】AB22(マウス中皮腫):ECACCで購入 BALB/C由来 LL/2ーLUC2(マウス肺癌):ATCCで購入 C57BL由来 今後肺での同種同所性モデルの作成を行う方針であり上記2種を購入。LL/2はvivoで肺へ移植した際のイメージングのためにLucの方を購入。【AB22】顕微鏡イメージング:4wellチャンバースライド使用. 5.0x104cells/well播種FACS(PI染色による死細胞定量):35㎜ dish使用. 5.0x105cells/well播種 IM7は、添加後1時間程度でもイメージングできる程度にCD44抗原へ結合し、incubateの時間を6時間に延長するとさらにイメージングは良好であった。AB22の細胞膜へのCD44の発現量も多い印象であり、照射Jは45J程度で十分量であった。 今後LL/2でも同様にvitroでの実験を行い、薬剤添加やNIR照射量の条件を調整する。さらに、次の段階としてマウス同種同所性モデルを作成する。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
AB22(CD44陽性中皮腫細胞株)を用いた、In vitro研究では良好な結果を導き出せた。 今後、マウスを用いた、Vivo研究を考えているが、Vitro研究が遅れた影響で、Vivo研究が遅れている状況である。次年度は、動物モデルの作成を重点的に行い、研究を進めていきたい。
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Strategy for Future Research Activity |
今後LL/2でも同様にvitroでの実験を行い、薬剤添加やNIR照射量の条件を調整する。 さらに、次の段階としてマウス同種同所性モデルを作成する。
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