| Project/Area Number |
21K16770
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
小松 宏彰 鳥取大学, 医学部附属病院, 講師 (20866727)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2025: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2024: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2023: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | 卵巣癌 / 不死化細胞 / センダイウイルス |
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| Outline of Research at the Start |
卵巣癌細胞と正常上皮細胞および良性腫瘍細胞、境界悪性腫瘍細胞それぞれの細胞株を独自の新規不死化法により樹立し、各々の細胞における特徴を遺伝子発現レベルで明らかにする。１）不死化遺伝子を搭載したセンダイウイルスベクター（SeVベクター）により、増殖能の乏しい上記各細胞を可逆的不死化技術を活用して（特許出願中）、不死化細胞株を樹立する。２）細胞株由来のエクソソームを単離、包含するマイクロRNA (miRNA) 等のプロファイルを明らかにする。３）樹立した細胞株およびヒト血清を用いて、正常、良性、境界、悪性（漿液性、粘液性、類内膜、明細胞）の特徴的なmiRNA発現異常が一致していることを確認する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
令和5年度は令和3-4年度に実施した研究成果を論文化し、以下の論文として2024年4月に掲載された。Komatsu H*, Okawa M, Kazuki Y, Kazuki K, Hichiwa G, Shimoya K, Sato S, Taniguchi F, Oshimura M, Harada T. Characterization of immortalized ovarian epithelial cells with BRCA1/2 mutation. Human cell. April. 14. 2024.
また、子宮内膜細胞の不死化を試みた。正常子宮内膜患者および子宮内膜癌患者より採取した子宮内膜細胞を上皮細胞と間質細胞に分離し、不死化遺伝子（Bmi-1、h-TERT、SV40T）を搭載したセンダイウイルスベクターを導入させることで、不死化を試みた。特に内膜間質細胞は順調に不死化（長期継代の実施と免疫染色など細胞特性の確認）が可能であったのに対して、内膜上皮細胞単独での不死化は困難であったが、現在、細かい条件設定を行っており、今後の研究成果に期待したいところである。三次元培養技術（スフェロイド形成など）とセンダイウイルスによる不死化技術を組み合わせることでこれらをうまく不死化できる可能性があると考えており、これらは今後実施する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
本研究課題についてはすでに論文が受理され、掲載されている。（Komatsu H*, Okawa M, Kazuki Y, Kazuki K, Hichiwa G, Shimoya K, Sato S, Taniguchi F, Oshimura M, Harada T. Characterization of immortalized ovarian epithelial cells with BRCA1/2 mutation. Human cell. 2024.）、新たな研究を開始している。
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| Strategy for Future Research Activity |
BRCA1.BRCA2不死化細胞株におけるBRCA1.BRCA2変異を修復させ、正常な細胞株にゲノム編集し、染色体の異常や変化を確認する。さらに、子宮内膜細胞の不死化細胞樹立も試行予定であるが、適切な患者検体の採取が重要なカギとなる。また再発症例における細胞株を採取可能であれば、化学療法抵抗性卵巣癌の細胞株樹立などを試みる。
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