子宮内膜症関連卵巣癌における分離癌腺管及び腫瘍間質のmicroRNA発現解析研究

• Project/Area Number: 21K16797
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
• Research Institution: Iwate Medical University
• Principal Investigator: 佐藤 千絵 岩手医科大学, 医学部, 任期付助教 (70883726)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000); Fiscal Year 2022: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000); Fiscal Year 2021: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
• Keywords: 子宮内膜症 / 卵巣子宮内膜症性嚢胞 / 子宮内膜症関連卵巣癌 / 卵巣癌 / 腺管分離法 / microRNA

Outline of Research at the Start

子宮内膜症を発生母地とする卵巣癌は、悪性度や治療奏功性が異なり、治療法に直結する病態の解明に至っていない。近年、難治性腫瘍に対する抗腫瘍免疫治療薬の有用性が相次いで報告されているものの、卵巣癌ではコンパニオン診断の陽性率は低く、治療効果は限定的である。本研究では卵巣子宮内膜症性嚢胞と子宮内膜症関連卵巣癌の腺管分離培養解析を行い、微小環境シグナルの解明を行い、子宮内膜症癌化予防薬の開発につなげる。

Outline of Annual Research Achievements

2021年6月から12月まで産前産後休暇、育児休業を取得し、研究できない期間が大半であったため、研究をすすめる準備を行っていた。本研究の研究計画を1年延長とし、当初の計画を1年繰り上げ、研究を行っていく。
令和4年度は、研究サンプルの採取を行い、悪性疾患症例に関してのサンプルはこれまでに蓄積していた症例を用いることとした。子宮内膜症症例に関してのサンプル採取が難航したため、令和5年度は再度サンプル採取方法に関し、検討していく。令和5年度は採取した臨床検体を用いてmicroRNA解析を行う。摘出された癌組織と子宮内膜症から腺管分離法にて癌腺管と癌間質、対照となる子宮内膜症の腺管と間質を採取し、miRNA発現をGeneChipR miRNA 4.0 Array (Thermo Fisher Scientific, Inc.) を用いて比較解析する。腺管・間質について卵巣高異型度漿液性癌のデータを参照し、子宮内
膜症関連発癌にかかわる責任候補miR（EAOCmiR）を抽出する。抽出解析で用いた40例と新たな20例を合わせた計60症例分の癌腺管および癌間質を用い、qRTPCRによる検証的定量解析を行う。さらに各miR発現量から予後や臨床病理学的因子との相関を検討する。統計解析にはTAC4.0 (Thermo Fisher Scientific Inc.)，JMPpro 13.0 software package (SAS　Institute Inc, Cary, NC, USA.) を使用し、t検定(網羅的解析; p<0.01，妥当性検証;p<0.05)、Kaplan Meier法(Log rank
Test, p<0.05)、Cox proportional hazards regression models(p<0.05)を行う予定である。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

子宮内膜症症例のサンプル採取が難航しているため。また、前年度の育児休暇取得に伴い、研究できない期間を要したため。

Strategy for Future Research Activity

令和5年度も引き続き、研究サンプルの採取を行い、症例数が集まったところで、microRNA解析を行なっていく。子宮内膜症症例に関しては、腺管分離法による腺管と間質の分離が難渋する可能性があるため、新たな方法で腺管と間質を分けることができるかどうか探っていく。
miRNA発現をGeneChipR miRNA 4.0 Array (Thermo Fisher Scientific, Inc.) を用いて比較解析する。腺管・間質について卵巣高異型度漿液性癌のデータを参照し、子宮内膜症関連発癌にかかわる責任候補miR（EAOCmiR）を抽出し、さらに症例数を追加し、qRTPCRによる検証的定量解析を行う。さらに各miR発現量から予後や臨床病理学的因子との相関を検討する。統計解析にはTAC4.0 (Thermo Fisher Scientific Inc.)，JMP pro 13.0 software package (SAS Institute Inc, Cary, NC, USA.) を使用し、t検定(網羅的解析; p<0.01，妥当性検証;p<0.05)、Kaplan Meier法(Log rank Test, p<0.05)、Cox proportional hazards regression models(p<0.05)を行う予定である。